Overview
이 비디오는 터치 습관 분석, 메카노 센세이션을 평가하고 습관에 시간을 정량화하는 C. elegans 행동 방법을 소개합니다.
Protocol
다음 프로토콜은 Mersha 외에서 발췌한 것입니다. 저용량 독성제에 배아 노출의 장기 행동 및 생식 결과, J. Vis. Exp. (2018)
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전방 터치 습관 분석
- 약 10개의 동기화된 젊은 성인 웜을 불살균 된 30 G 플래티넘 와이어 픽을 사용하여 새로운 시드되지 않은 NGM 플레이트로 옮긴다. 벌레를 5분 동안 방해하지 않고 두어 새로운 접시에 적응할 시간을 허용합니다.
- 습관적 반응을 위해 나무 꼬치 나 이쑤시개 끝에 부착 된 눈썹 머리를 사용하고 70 % 에탄올에 찍어 멸균하십시오. 깨끗한 보풀이 없는 티슈로 닦아내고 에탄올이 증발할 때까지 1분 간 기다립니다. 눈썹 머리를 사용하여 머리에 벌레 (인두 전구의 전방)를 부드럽게 만지십시오. 웜이 복구할 수 있도록 터치 사이에 10s를 허용하여 터치를 반복합니다.
- 웜이 더 이상 뒤로 이동하지 않는 때까지 계속 만지거나(10s 의 상호 자극 간격 허용). 이 시점에서, 벌레는 자극에 습관화했다. 웜이 습관화하는 데 필요한 터치의 num+ber를 기록합니다.
- 단방향 ANOVA를 사용하여 처리된 대조군과 치료되지 않은 컨트롤의 평균 습관률 의 차이를 분석한 다음 Tukey의 포스트 호크 테스트가 뒤따릅니다.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |