Overview
يقدم هذا الفيديو اختبار التعود باللمس ، وهو طريقة سلوكية C. elegans لتقييم mechanosensation وتحديد الوقت للتعود.
Protocol
البروتوكول التالي مقتطف من ميرشا وآخرون. العواقب السلوكية والإنجابية طويلة الأجل للتعرض الجنيني للمواد السامة منخفضة الجرعة ، J. Vis. Exp. (2018)
-
اختبار التعود اللمسي الأمامي
- نقل ما يقرب من 10 الديدان الشباب الكبار متزامنة إلى لوحات جديدة غير المصنف NGM باستخدام النار المعقمة 30 G اختيار الأسلاك البلاتينية. ترك الديدان دون عائق لمدة 5 دقائق للسماح لهم الوقت للتأقلم مع لوحة جديدة.
- للاستجابة للتعود ، استخدم شعر الحاجب المرفق بنهاية سيخ خشبي أو مسواك ، وتعقيمه عن طريق الغطس في الإيثانول بنسبة 70٪. امسح بأنسجة نظيفة خالية من الوبر وانتظر دقيقة واحدة حتى يتبخر الإيثانول. المس الدودة بلطف على الرأس (الأمامي لمبة البلعوم) باستخدام شعر الحاجب. كرر اللمسات، مما يسمح 10 ق بين اللمسات من أجل السماح للدودة لاسترداد.
- استمر في اللمس (السماح بفواصل زمنية فاصلة 10 s) حتى لا تتحرك الدودة إلى الخلف. عند هذه النقطة، تعودت الدودة على التحفيز. تسجيل num + ber من اللمسات المطلوبة للدودة للتعود.
- تحليل الفرق بين متوسط معدلات التعود من الضوابط المعالجة وغير المعالجة باستخدام ANOVA في اتجاه واحد تليها اختبار توكي في مرحلة ما بعد مخصصة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
| N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
| Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
| Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
| Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |
