Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

एक मान्य इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली का प्रयोग बृहदांत्रशोथ और कोलोरेक्टल ट्यूमर की गंभीरता का मूल्यांकन करने के लिए चूहों में लचीला Colonoscopy

Published: October 16, 2013 doi: 10.3791/50843
* These authors contributed equally

Summary

पिछले कुछ वर्षों में, नई पीढ़ी एंडोस्कोप murine कोलाइटिस और कोलोरेक्टल ट्यूमर के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण नैदानिक ​​अनुसंधान एड्स के रूप में उभरा है. हम चूहों में सूजन और कोलोरेक्टल ट्यूमर के इंडोस्कोपिक मूल्यांकन, साथ ही कोलाइटिस और कोलोरेक्टल ट्यूमर के इंडोस्कोपिक गंभीरता दस्तावेज़ करने दशमलव पहचानकर्ता का उपयोग करता है कि एक उपन्यास स्कोरिंग प्रणाली के लिए इस के साथ साथ एक विस्तृत प्रोटोकॉल उपस्थित थे.

Abstract

अनुसंधान प्रयोजनों के लिए आधुनिक एंडोस्कोपी का उपयोग बहुत जठरांत्र विकृतियों के बारे में हमारी समझ में मदद की है. विशेष रूप से, प्रयोगात्मक एंडोस्कोपी इस तरह जीर्ण सूजन आंत्र रोग के तंत्र और कोलोरेक्टल कैंसर की प्रगति का मूल्यांकन करने के लिए उन के रूप में एक भी प्रयोगशाला पशु में दोहराया आकलन, आवश्यकता है कि अध्ययन के लिए अत्यधिक उपयोगी है. हालांकि, अध्ययन में इस्तेमाल किया तरीकों अत्यधिक चर रहे हैं. कम से कम तीन इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली murine कोलाइटिस के लिए प्रकाशित और कोलोरेक्टल ट्यूमर के मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल सहवर्ती colonic सूजन की उपस्थिति को संबोधित करने के लिए असफल प्रकाशित किया गया है. इस अध्ययन को विकसित करता है और साथ ही साथ सूजन और ट्यूमर दोनों के मूल्यांकन को एकीकृत एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली पुष्टि की. Perianal निष्कर्षों के आधार पर कोलोरेक्टल सूजन की हद और गंभीरता का 1) मूल्यांकन (वाल की पारदर्शिता: यह उपन्यास स्कोरिंग प्रणाली के तीन प्रमुख घटक हैंएल, mucosal खून बह रहा है, और फोकल घावों), 2) ट्यूमर के घावों (ग्रिड का नक्शा और बार ग्राफ), और मनाया घावों का सौंपा श्रेणियों के साथ दशमलव इकाइयों के आधार पर उनके रोग और अनुसंधान प्रासंगिकता के आधार पर नैदानिक ​​मामलों के 3) संख्यात्मक छँटाई की मात्रात्मक रिकॉर्डिंग और इंडोस्कोपिक जटिलताओं (दशमलव पहचानकर्ता). इस के साथ साथ प्रस्तुत वीडियो और पांडुलिपि जांचकर्ताओं समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस (डी पी ई सी से बाहर का अंतर करने के लिए प्रणाली के विकल्प के साथ, एक अच्छी तरह से पुष्टि और अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य इंडोस्कोपिक पद्धति का उपयोग अपने स्वयं के प्रयोगात्मक चूहों स्कोर करने के लिए अनुमति देने के लिए, IACUC अनुमोदित प्रोटोकॉल के बाद तैयार किया गया ).

Introduction

Murine एंडोस्कोपी एक दशक से अधिक 1-3 के लिए एक उपयोगी अनुसंधान उपकरण के रूप में प्रदर्शन किया गया है. कुछ भी लचीला sigmoidoscopy का इस्तेमाल किया है, हालांकि तारीख को, murine एंडोस्कोपी रोजगार सबसे अध्ययन, कठोर एंडोस्कोप का इस्तेमाल किया है. Murine एंडोस्कोपी तत्काल परिणाम प्रदान करता है और आंतों की सामान्य स्थिति, सूजन की गंभीरता, और इस तरह शरीर के वजन घटाने, दस्त, और ऊतक विज्ञान के रूप में अप्रत्यक्ष उपाय, (घावों बद हैं जब suboptimal है) की तुलना में ट्यूमर प्रगति की हद तक का एक और उद्देश्य का अनुमान है, जबकि पेट के के समग्र स्वास्थ्य पर अंतर्दृष्टि की पेशकश की. Euthanized किया जाना है और कोलन विश्लेषण 1 के लिए काटा जा करने के लिए पशु की आवश्यकता है कि परंपरागत ऊतकीय परीक्षा के लिए विरोध के रूप में सबसे विशेष रूप से, एंडोस्कोपी, समय के साथ प्रयोगशाला पशु मॉडल के दोहराया आकलन के लिए अनुमति देता है. इन फायदों के बावजूद, murine इंडोस्कोपिक प्रौद्योगिकी का उपयोग बड़े पैमाने पर नहीं किया गया है और implementati के लिए मानकीकृत प्रोटोकॉल की कमी के द्वारा सीमित हैपर और रोग निष्कर्षों की स्कोरिंग. ठीक से लागू किया, murine एंडोस्कोपी आगे हमारी समझ और सूजन आंत्र रोग, कोलाइटिस, और कोलोरेक्टल ट्यूमर सहित कई पुरानी जठरांत्र रोग राज्यों के पशु मॉडल के लक्षण वर्णन की सुविधा के लिए महान वादा धारण.

murine इंडोस्कोपिक प्रौद्योगिकी की उपयोगिता मानकीकृत परीक्षा प्रक्रियाओं के अस्तित्व और आंतों की विकृतियों के लिए एक सुसंगत, गैर बेमानी, और विश्वसनीय स्कोरिंग प्रणाली की आवश्यकता है जो अपने reproducibility और निष्पक्षता, पर टिका है. कम से कम तीन वर्णनात्मक स्कोरिंग कोलाइटिस 4-6 की इंडोस्कोपिक मूल्यांकन के लिए सिस्टम, साथ ही colonic ट्यूमर चूहों में 4,7,8 के लिए प्रकाशित किया गया है. हालांकि, इन सूचना दी दृष्टिकोण और स्कोरिंग प्रणाली के अध्ययन के पार आसानी से तुलनीय नहीं हैं. कई मामलों में, घावों के वर्गीकरण के लिए इस्तेमाल किया मापदंड का कोई स्पष्ट परिभाषा नहीं है, और मापदंड दिए जाते हैं, वे व्यापक रूप से बदलती हैं. इसके अलावा,कोलाइटिस और ट्यूमर, एक ही माप उपकरण में एक साथ होते हैं और परिणाम पर इंटरैक्टिव प्रभाव हो सकता है कि सबसे आम colonic विकृतियों के दो, दोनों का आकलन है कि एकीकृत कोई रिपोर्ट स्कोरिंग प्रणालियों रहे हैं. अंत में, कोलाइटिस के लिए मौजूद है कि इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली अक्सर सीमित भेदभाव के साथ भड़काऊ श्रेणियों है (यानी. अक्सर 1-4 कम पूर्णांक पैमाने पर संकीर्ण स्कोरिंग विकल्प,) ठीक से रोग प्रगति परिदृश्यों का प्रतिनिधित्व करते हैं और पैरामीट्रिक सांख्यिकीय विश्लेषण के उपयोग को सक्षम करने के लिए.

इस पत्र में, हम murine कोलाइटिस और colonic ट्यूमर की गंभीरता का आकलन और perianal क्षेत्र, मलाशय, और बाहर का बृहदान्त्र के संरचनात्मक मूल्यांकन में इस प्रौद्योगिकी को रोजगार के लिए एक मानकीकृत प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए एक लचीला एंडोस्कोप के उपयोग का वर्णन. हम आघात और छवि कलाकृतियों को कम करने के लिए एंडोस्कोपी के दौरान प्रभावी निवारण उदाहरण देकर स्पष्ट करना, और हम एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य स्कोरिंग प्रणाली का वर्णनमान्य प्रकाशित नैदानिक ​​मानकों पर आधारित है. स्कोरिंग प्रणाली (विशिष्ट नैदानिक ​​मूल्य के साथ निष्कर्षों को उजागर करने के लिए 12 सूजन, ट्यूमर मानचित्रण के संभावित ग्रेड और साजिश रचने के विकल्प, और एक उपन्यास दशमलव इकाई प्रणाली (यानी, दशमलव पहचानकर्ता) के साथ भेदभाव के एक उच्च स्तर का उपयोग आंतों में सूजन और ट्यूमर दोनों के मूल्यांकन को एकीकृत यानी ट्यूमर के विकास, एंडोस्कोपी, आदि के दौरान जटिलताएं). दशमलव पहचानकर्ता का उपयोग आगे डाउनस्ट्रीम विश्लेषण के लिए प्रासंगिक डेटा सेट का तेजी से ट्रैकिंग के लिए अनुमति देता है. अंत में, हम कोलाइटिस और कोलाइटिस से जुड़े कैंसर (dextran सल्फेट सोडियम (DSS) प्रेरित कोलाइटिस, क्लोस्ट्रीडियम बेलगाम संक्रमण, और azoxymethane / DSS प्रेरित colonic कैंसर) के कई murine मॉडल में विश्वसनीयता और स्कोरिंग प्रणाली की वैधता का परीक्षण करते हैं.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. एंडोस्कोपी प्रणाली स्थापित

  1. निर्माता के निर्देशों का पालन, चूहों anesthetizing पहले एंडोस्कोपी प्रणाली की स्थापना की. इस प्रोटोकॉल के लिए मनुष्य के लिए बनाया गया एक वीडियो ureteroscope (चित्रा 1) का प्रयोग करें. प्रविष्टि ट्यूब के बाहरी व्यास 9.9 फादर (3.3 मिमी) है, इसके बाहर का अंत 8.5 फादर (2.8 मिमी) है, और इंस्ट्रूमेंटेशन चैनल का भीतरी व्यास 6 फादर (1.2 मिमी) है.
  2. एंडोस्कोप का उपयोग रोग संचरण से जुड़ा हुआ नहीं किया गया है [9], बीजाणु के गठन सूक्ष्मजीवों के साथ कार्य करते समय 70% इथेनॉल के 10 के साथ या उचित तकनीक के साथ एंडोस्कोप और लेंस बाँझ. बैक्टीरियोस्टेटिक बाँझ स्नेहक और गैर scratching एंडोस्कोप टिप तर करने के लिए ऊतकों पोंछ तैयार करते हैं.
  3. इंस्ट्रूमेंटेशन चैनल के शीर्ष करने के लिए हवा से भरा एक 3 मिलीलीटर सिरिंज (या एक उपयुक्त सीओ 2 गैस मिश्रण) संलग्न करें.
  4. सत्ता पर बारी, और सामान्य सफेद रोशनी में सफेद संतुलन स्थापित किया,जब लागू करने के साथ ही संकीर्ण बैंड इमेजिंग (NBI) मोड,. यह विशेषता असामान्य vascularization 11 है जो अल्सरेटिव और tumorous घावों, सहित श्लेष्मा झिल्ली पर ठीक रक्त वाहिनियों की संरचनाओं, पर जोर देती है के रूप में 2001 के बाद से, NBI नैदानिक ​​इमेजिंग लाभ प्रदान की गई है. NBI फिल्टर मोड हीमोग्लोबिन के साथ संरचनाओं पर प्रकाश डाला गया है, जो 390-445 एनएम और 530-550 एनएम, पर कब्जा कर लिया प्रकाश की तरंग दैर्ध्य प्रतिबंधित करता है.
  5. अपने निष्कर्षों को रिकार्ड करने के लिए मूल्यांकन स्कोरिंग फॉर्म (चित्रा 2) प्रिंट. (धारा 6.1 देखें) परीक्षा से पहले उम्मीद की सामान्य और NBI छवियों (चित्रा 3) और परिभाषा और हर कसौटी के ग्रेड के साथ परिचित हो जाते हैं.
  6. अगर वांछित, chromoendoscopy के लिए फॉस्फेट बफर खारा (पीबीएस) पर एक colorant आधारित समाधान तैयार करें. Chromoendoscopy में, परीक्षा mucosal परिवर्तन को उजागर करने के लिए इसके विपरीत माध्यम के रूप में एक डाई का उपयोग किया जाता है. Methylene नीले (0.1-1%) और इंडिगो कारमाइन (0.1%) समाधान (3B चित्रा) का प्रयोग करें. नोटकि methylene नीले नमूना विश्लेषण के साथ हस्तक्षेप कर सकता है जो ऑक्सीकरण कण, अमीनो एसिड के अवशेष का अप्रत्यक्ष पार से जोड़ने, और डीएनए गिरावट 12, उत्पादन कर सकते हैं कि एक ऑक्सीकरण में कमी एजेंट है.

2. माउस के सामान्य संज्ञाहरण

  1. संवेदनाहारी एजेंट और प्रशासन मार्ग चुनें. प्रतिरक्षा प्रणाली और अनुसंधान लक्ष्यों के साथ दवाओं के संभावित हस्तक्षेप के बारे में एक पशु संसाधन सुविधा या संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) से एक पशु चिकित्सक से परामर्श करें. कुछ दवाएं कृन्तकों 13 सहित, पशुओं में साइटोकाइन प्रोफ़ाइल अभिव्यक्ति को प्रभावित कर सकते हैं. उचित नियंत्रण के साथ, अस्तित्व endoscopies के लिए टर्मिनल प्रक्रियाओं या isoflurane के लिए इंजेक्शन tribromoethanol का प्रयोग करें.
  2. शामिल होने के लिए, 0.2-0.5 एल / मिनट की दर से 100% ऑक्सीजन में isoflurane की 4-5% प्रशासन, रखरखाव के लिए 0.5-2% का उपयोग करें. इस प्रोटोकॉल सभी जानवरों के लिए उपयुक्त नहीं है. अपनी सुविधा के पशु चिकित्सक से परामर्शउचित निर्देश और प्रशिक्षण के लिए. पशु कल्याण के लिए उच्चतम मानकों को प्राप्त करने के लिए प्रासंगिक IACUC सिफारिशों का पालन. माउस को पूरी तरह से anesthetized अगर सुनिश्चित करें.
  3. 'पट्टा' प्रयोगशाला चिपकने वाला टेप का उपयोग कर एक पृष्ठीय या उदर स्थिति में एक सहायक की सतह की मेज पर anesthetized माउस. अपने एंडोस्कोप स्क्रीन पर शारीरिक उन्मुखीकरण के खबरदार. इसके निचले हिस्से और पूंछ सुरक्षित. टेप का एक बैंड भी दूर श्वासयंत्र से आंदोलन को रोकने, लेकिन वक्ष ventilatory आंदोलनों सीमित बचने के लिए सीने पर रखा जा सकता है.

3. विस्तृत इंडोस्कोपिक परीक्षा

  1. तो गुदा के माध्यम गुंजाइश अग्रिम, मलाशय में एंडोस्कोप डालने से पहले perianal घावों के लिए देखो.
  2. कोट बाँझ शल्य स्नेहक के साथ एंडोस्कोप. नहीं सीसीडी (चार्ज कपल्ड डिवाइस) सेंसर की कोट सतह सुनिश्चित करें.
  3. एंडोस्कोप डालें और रिकॉर्डिंग शुरू. रिकॉर्ड किए गए वीडियो मीटर के लिए उपयोगी होते हैंपरीक्षा के बाद अगर जरूरत एंडोस्कोपी के eticulous मूल्यांकन. Mucosal / आंतों में जलन कम करने के लिए समय कम से कम संभव लंबाई में एंडोस्कोपी प्रदर्शन करने की कोशिश करें.
  4. धीरे धीरे आंतों की दीवारों अलग सेट करने के लिए एक सिरिंज का उपयोग करके हवा लागू करें. माउस के आकार पर निर्भर करता है, हवा की 1-2 मिलीलीटर का उपयोग करें. अत्यधिक हवा साँस से बचें, यह anesthetized माउस के श्वसन संकट और मौत का कारण बन सकता है.
  5. आप हवा या दायरे के कोमल रोटेशन के साथ जिस तरह से स्पष्ट रूप में आगे एंडोस्कोप अग्रिम. आप आंतों लुमेन नहीं दिख रहा है अगर एंडोस्कोप अग्रिम नहीं है. Perforations या colonic / मलाशय के आँसू विशेष रूप से युवा चूहों (<8-10 सप्ताह पुराने) में, इस स्तर पर हो सकता है. आवश्यक के रूप में तस्वीरें ले लो.
  6. गुंजाइश अग्रिम के रूप में (परिभाषित के रूप में स्वाभाविक रूप से होती mucosal ख़ून का बहाव दर्दनाक एंडोस्कोपी के साथ जुड़ा नहीं) खून बह रहा सहज नहीं है, का आकलन करें. एंडोस्कोप मलाशय और पेट में प्रवेश करती है के रूप में सहज रक्तस्राव मनाया जा सकता है.
  7. जैसाcolonic दीवार की पारदर्शिता सेक्स. पारदर्शिता पेट में अंदर रक्त वाहिकाओं कल्पना और अन्य आसपास के विसरा की कि चित्रा (4) करने की क्षमता के रूप में परिभाषित किया गया है. दायरे से कोमल प्रस्ताव (पीठ के आगे, दक्षिणावर्त, वामावर्त) रक्त वाहिकाओं अन्य आंत के संदर्भ में देखा जा सकता है, यह निर्धारित करने में मदद मिलेगी. Mesenteric वसा ऊतकों को भी देखा जा सकता है. श्रोणि गुहा के अंदर मलाशय उदर गुहा में colonic दीवार से कम पारदर्शी दिखाई देता है, तो ध्यान दें.
  8. फोकल घावों (edematous क्षेत्रों erosions, अल्सर, tumorous जनता) के प्रकार और संख्या का निर्धारण करने के लिए निरीक्षण किया. इस colonic सूजन स्कोर और विकसित किया गया है कि दशमलव पहचानकर्ता का उपयोग स्कोरिंग के रूप में दर्ज किया जाएगा.
  9. पेट के समीपस्थ बृहदान्त्र में दुमदारी flexes जहां क्षेत्र पर पहुंच गया है एक बार, धीरे धीरे एंडोस्कोप वापस लेने और बाद भुरभुरापन mucosal की वजह से होता है, जो खून बह संपर्क (की उपस्थिति के लिए देखोएंडोस्कोप) उन्नत या हटा दिया है. यह जानबूझकर पेट के सतह परिमार्जन करने के लिए आवश्यक नहीं है. स्वस्थ कोलोरेक्टल म्यूकोसा उचित इंडोस्कोपिक परीक्षा के बाद खून बहाना नहीं है.

4. बायोप्सी

  1. बायोप्सी की जरूरत है, इंस्ट्रूमेंटेशन के लिए समर्पित एंडोस्कोप चैनल के माध्यम से बायोप्सी संदंश डालें. आंतों वेध को रोकने के लिए एंडोस्कोप स्क्रीन पर संदंश की उन्नति मॉनिटर.
  2. एक 60-80 ° कप से कप कोण के बारे में संदंश की बायोप्सी कप खोलें, और हित के क्षेत्र के लिए उन्हें प्रत्यक्ष. जरूरत से ज्यादा खोला संदंश या दबाव स्वस्थ पारदर्शी आंतों की दीवारों की एक बायोप्सी प्रेरित वेध में जो परिणाम आंतों के ऊतकों, के अतिरिक्त परतों को समझ सकता है. वेध होती है, तो आपके IACUC सिफारिशों के बाद संज्ञाहरण के दौरान पशु euthanize. Perforations endotoxemia और पेरिटोनिटिस में परिणाम.
  3. बायोप्सी कप को बंद करें, और संदंश बंद रखते हुए उन्हें बाहर निकाल.
  4. रेमोऊतक और संदंश कोमल है कि एक समाधान के साथ ऊतक निस्तब्धता द्वारा संदंश से नमूना लिया. शाही सेना बाद में और पीबीएस आम काम कर समाधान कर रहे हैं, अगर जरूरत है, नमूना बेदखल करने के लिए सुई का उपयोग करें. Forcep कप खिसक या किनारों को काटने से बचें.

5. संज्ञाहरण से वसूली

  1. यह ठीक नहीं है जब तक परीक्षा के पूरा होने पर, माउस के लिए एक गर्म वातावरण प्रदान करते हैं. एक बिजली की रोशनी, या 37 डिग्री सेल्सियस पर सेट एक गर्म पैड या तो प्रयोग करें Overheating से बचने; परिधीय vasodilation पशु वसूली समझौता. पूरी वसूली तक बारीकी माउस मॉनिटर.

6. दशमलव पहचानकर्ता के साथ कोलोरेक्टल स्वास्थ्य की एकीकृत इंडोस्कोपिक स्कोरिंग सिस्टम

  1. के लिए: (पैरामीटर परिभाषाएँ, और प्रोटोकॉल एक दशमलव भारित स्कोरिंग प्रणाली का प्रयोग Murine कोलोरेक्टल सूजन और ट्यूमर के इंडोस्कोपिक आकलन) स्कोरिंग फॉर्म (चित्रा 2) और नीचे पैरामीटर परिभाषा का उपयोगउदाहरण और nonbiased आकलन और विस्तृत रिकॉर्ड रखने के लिए दिशा निर्देशों के रूप में वैकल्पिक 'बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग प्रणाली' (डी पी ई सी).
  2. स्कोरिंग प्रणाली फॉर्म (चित्रा 2) पर वर्णित कोलोरेक्टल सूजन के चार मापदंडों स्कोर. सावधानी perianal क्षेत्र, आंतों पारदर्शिता, खून बह रहा है आंतों का प्रकार (अगर मौजूद है), और उपस्थिति और फोकल घावों की मात्रा (कटाव, अल्सरेटिव, और / या tumorous) का मूल्यांकन.
  3. अनुसंधान प्रयोजनों के लिए ट्यूमर का आकलन करते समय, मात्रा, स्थान, और आकार की जांच, और colonic नक्शा और स्कोरिंग फॉर्म पर बार ग्राफ का उपयोग उन का वर्णन. प्राप्त अंक और घावों की संख्या (जब लागू हो) के संख्यात्मक राशि पृष्ठभूमि colonic सूजन, घाव का सबसे प्रमुख प्रकार, और घावों की संख्या का निर्धारण करेगा.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

इस अध्ययन में प्रस्तुत प्रोटोकॉल और छवियों को एक ओलिंप URF-V लचीला एंडोस्कोप 14 और NBI 11,15 के साथ तैयार थे. वीडियो चित्र एमपीईजी -2 प्रारूप और JPG, TIF, PNG, या मानक यूएसबी फ्लैश पोर्टेबल यादों को संक्रमणीय अधिकतम 1280 x 1024 पिक्सल के साथ DICOM प्रारूप में चित्रों में बच गए. NBI हीमोग्लोबिन युक्त ऊतकों के दृश्य विपरीत बढ़ाता है. सामान्य प्रकाश और NBI इमेजिंग कोलोरेक्टल म्यूकोसा के सामान्य शारीरिक रचना और छालों और ट्यूमर के विकास (आंकड़े 3 ए और 6A) के दौरान सामान्य और असामान्य vascularization के बीच मतभेदों को वर्णन करने के लिए प्रमुख विशेषताएं हैं. Chromoendoscopy दौरान विपरीत माध्यम के रूप में methylene नीले रंग के साथ छवियों colonic तहखाने के हवाई सामान्य छत्ते उपस्थिति (चित्रा 3 बी में बंद देखें), खुलासा बंद हुआ छवियों के लिए अपने लाभ दिखा.

तिथि करने के लिए, हम 500 से अधिक murine endoscopies follo का आयोजन कियाविंग दोहराया परीक्षा का प्रतिनिधित्व करने के बारे में 10% के साथ इस प्रोटोकॉल,. आम तौर पर, कार्यविधि को पूरा करने के लिए 10-15 मिनट की आवश्यकता है, संज्ञाहरण, एंडोस्कोपी, और संज्ञाहरण से वसूली के प्रशासन के बीच समान रूप से विभाजित. परीक्षा गुदा से बाहर का बृहदान्त्र के प्लीहा वंक को शामिल किया गया है. हम भी सफलतापूर्वक तुरंत पहले ऊतक विज्ञान (चित्रा 6B) के लिए कटाई के ऊतकों को ऊतकों का पोस्टमार्टम विच्छेदन के बाद, कुछ मामलों में समीपस्थ पेट के, cecum और लघ्वान्त्र का पोस्टमार्टम इंडोस्कोपिक परीक्षाओं का आयोजन किया है. एक मामले में, हम भी मनाया और कारण आंतों adhesions को गंभीर ग्रहणी निंदा और कसाव से प्रभावित एक माउस में संदिग्ध गैस्ट्रिक फैलाव की पुष्टि की. असामान्य छवि एक नरम शब्दों में सूजन बाहर का बृहदान्त्र के सबसे कपाल पहलू से transmurally मनाया गया; शवपरीक्षा परीक्षा distended पेट पेट के लिए juxtaposed गया था दिखाया.

हम एक वैध और विश्वसनीय दशमलव भारित है विकसित किया हैप्रकाशित शोध अध्ययनों में murine एंडोस्कोपी के मानकीकृत आवेदन में सुधार करने के लिए प्रणाली coring. तीन स्कोरिंग सिस्टम पहले से कार्यरत हैं और हमारी दशमलव भारित प्रणाली 4-6 के विकास के लिए नींव के रूप में कार्य किया गया है. इन प्रणालियों को विभिन्न मानदंडों और घाव की गंभीरता के स्तर के वर्गीकरण के लिए अनुमति देते हैं, वे इंडोस्कोपिक छवियों से मूल्यांकन करने के लिए कठिन हैं, जिनमें से कुछ उचित मापदंड परिभाषाओं, कमी है. स्कोरिंग सिस्टम चूहों में इंडोस्कोपिक परीक्षा को संदिग्ध प्रासंगिकता में कुछ मामलों में, अस्पष्ट पैरामीटर शामिल थे. ग्यारह प्रकाशित मापदंडों 4-6 और उनके इंडोस्कोपिक फायदे, सीमाओं, और शारीरिक प्रासंगिकता का एक सारांश तालिका 1 में प्रस्तुत कर रहे हैं.

प्रस्तावित murine colonic एंडोस्कोपी स्कोरिंग प्रणाली अनुसंधान प्रयोजनों के लिए उपयोग किया जाएगा, क्योंकि सांख्यिकीय अनुमान के प्रदर्शन के लिए इसकी उपयोगिता आवश्यक था. स्कोरिंग प्रणाली था कि विश्वास दिलाता हूंउच्च निर्माण की वैधता, हम पहले, प्रासंगिक मापदंडों की पहचान करने के लिए एक वैचारिक ढांचे विकसित कम मापदंड (n = 3), के लिए इन मापदंडों वर्गीकृत किया है और सूजन और चिकित्सा की वास्तविक उपस्थिति (चित्रा 7) के साथ उनकी colinearity और सहसंबंध का आकलन किया. अगला, हम गंभीरता से क्रमसूचक स्तर का प्रतिनिधित्व करने के लिए असतत पूर्णांकों का उपयोग perianal निष्कर्ष गयी, और दशमलव पहचानकर्ता का उपयोग ट्यूमर प्रेरण और विकास की अवधारणा को एकीकृत. इसके अलावा, हम murine आंतों एंडोस्कोपी की रिपोर्ट में पहले से विचार नहीं किया एक और पैरामीटर के रूप में / 'strictures' जोड़ा. जिसके परिणामस्वरूप उत्पादन स्कोर उच्च वैधता उत्पादन और पैरामीट्रिक सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए उपयुक्त हैं. अन्त में, हम मानचित्रण और विस्तृत रोग निगरानी के लिए संख्यात्मक साजिश रचने क्षमताओं गयी.

हमारे मूल्यांकन प्रणाली के अभिसरण की वैधता का आकलन करने के लिए, 36 माउस colonoscopies के लिए तीन प्रकाशित मापदंडों से प्राप्त अंक स्कोर के खिलाफ तुलना में थे obtaiआँख बंद करके पिछले तीन स्कोरिंग प्रणाली 4-6 का उपयोग कर एक ही व्यक्ति द्वारा नेड. हर तुलना हमारे एकीकृत स्कोरिंग प्रणाली (चित्रा 8 पियर्सन पी <0.0001) के लिए उच्च अभिसरण वैधता का संकेत है, अच्छा सकारात्मक संबंध दिखाया. यह स्कोर 0 और 1, पी के बीच गंभीर कोलाइटिस और बेहतर डेटा फैलाव (पी = 0.0351 के मामलों में आमतौर पर मौजूद था के रूप में विश्लेषण, कोलोरेक्टल स्वास्थ्य का आकलन करने के लिए नैदानिक ​​मानदंडों के हिस्से के रूप में perianal निष्कर्ष के शामिल किए जाने का समर्थन करता है = स्कोर 2 और बीच में 0.0086 3, चित्रा 8B). (Perianal निष्कर्ष जोड़ने के बाद) एकीकृत स्कोरिंग प्रणाली उपलब्ध अन्य प्रणालियों की तुलना में किया गया था, जब वह 3 अन्य प्रणालियों के 2 कारण चार संभव पूर्णांक श्रेणियों में से एक, एक प्रमुख करने के मामलों की क्लस्टरिंग के लिए एक प्रमुख आनुमानिक सीमा है कि स्पष्ट हो गया था विधि misclassification पूर्वाग्रह के संकेत (चित्रा 8C) 16. दशमलव पहचानकर्ता के साथ, हमारे उपन्यास स्कोरिंग प्रणाली clus की सबसे कम संभावना हैपूर्णांक श्रेणियों में डेटा बिंदुओं TERING.

चित्रा 1
चित्रा 1. उपकरण. लचीले एंडोस्कोप, वीडियो नियंत्रण प्रणाली, प्रकाश स्रोत, वीडियो रिकॉर्डर, और इस अध्ययन में इस्तेमाल साँस लेना संज्ञाहरण मशीन. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

चित्रा 2
चित्रा 2. चूहों में कोलाइटिस और कोलोरेक्टल ट्यूमर के आकलन के लिए दशमलव स्कोरिंग प्रणाली फार्म. प्रणाली चार गैर सह रैखिक मानकों का एक कोर भड़काऊ घटक, टी के लिए ग्राफिक्स हैumor जानकारी, और उल्लेखनीय घावों या जटिलताओं को दशमलव इकाइयों. (एक दशमलव भारित स्कोरिंग प्रणाली का प्रयोग Murine कोलोरेक्टल सूजन और ट्यूमर के इंडोस्कोपिक आकलन) नीचे अनुभाग में विस्तृत मानदंड और उदाहरण देखें. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

चित्रा 3
चित्रा 3. सामान्य इंडोस्कोपिक प्रकाश मोड, NBI मोड, और रक्त वाहिकाओं के chromoendoscopy. द्रुमायण साथ में सामान्य म्यूकोसा की बनती छवियों मलाशय में सामान्य रूप से कम आम है. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

चित्रा 4 के लिए: के लिए सामग्री चौड़ाई = "5in": src = "/ files/ftp_upload/50843/50843fig4highres.jpg" src = "/ files/ftp_upload/50843/50843fig4.jpg" चौड़ाई = "500px" />
चित्रा 4. चूहों में आंतों की दीवारों. इंडोस्कोपिक भित्ति आंतों वाहिकाओं और mesenteric वसा के दृश्य, और mesenteric वाहिकाओं और आसन्न स्वस्थ आंत से वसा की है कि इंडोस्कोपिक पारदर्शिता के सिद्धांत को वर्णन करने के लिए आंत्र छोरों के पार के अनुभागीय प्रतिनिधित्व, एक की दीवार के माध्यम से संभव है स्वस्थ बृहदान्त्र. बाहर का बृहदान्त्र के पेरिटोनियल वर्गों में आंतों की दीवारों में सूजन और उमड़ना अन्य आंतों क्षेत्रों स्वस्थ हैं, भले ही अन्य आंत से अंदर और transmural संरचनाओं के दृश्य को रोकता है. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

3/50843fig5highres.jpg "src =" / files/ftp_upload/50843/50843fig5.jpg "चौड़ाई =" 500px "/>
चित्रा 5. समस्या निवारण. आंतों सामग्री, blurry छवियों और क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला आंदोलनों की वजह से कम दृश्यता का समाधान. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

चित्रा 6
चित्रा 6. बनती छवियों रोगग्रस्त कोलोरेक्टल म्यूकोसा और अन्य समीपस्थ आंतों क्षेत्रों में से (नियमित रूप से प्रकाश बनाम संकीर्ण बैंड इमेजिंग, NBI). NBI अल्सरेटिव और tumorous घावों की पहचान करने में मदद करता है. कुछ अल्सर NBI साथ भूरा दिखाई देते हैं, रेशेदार सामग्री के साथ कवर दूसरों, मोटी और सफेद दिखाई देते हैं. जब वे नहीं हैं AOM / DSS ट्यूमर विशेष रूप से प्रारंभिक दौर के दौरान, NBI साथ बेहतर विशेषता हैलुमेन में फैला हुआ है. सितारे (*) पेट के हवा के साथ distended है, जहां सभी अन्य छवियों में नहीं मनाया पीबीएस से भरा पेट में इंडोस्कोपिक विरूपण साक्ष्य (mucosal चलि) पर प्रकाश डाला. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

चित्रा 7
चित्रा 7. आंतों में सूजन की गंभीरता और colonic सूजन की नेत्रहीन विचार और ग्रेड विभिन्न प्रकाशित मापदंड करने की क्षमता (देखें तालिका 1) के बीच सैद्धांतिक सहसंबंध और सह linearity. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

8 चित्रा चित्रा 8. हमारे स्कोरिंग प्रणाली और पहले प्रकाशित स्कोरिंग प्रणालियों के बीच प्रदर्शन की तुलना करें. डाटा 36 माउस वीडियो endoscopies की बनती अंधा विश्लेषण से perianal घावों को छोड़कर भड़काऊ मापदंडों, (3 मानकों) के लिए सिस्टम एक के. ए) तुलना (5 पैरामीटर). बी) स्कोरिंग प्रणाली में perianal निष्कर्ष सहित के महत्व;. लगातार चूहों में मध्यम / गंभीर कोलाइटिस के मामलों में अतिरिक्त सांख्यिकीय महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान की perianal परीक्षा में पहले से सूचना प्रणालियों (36 माउस वीडियो की तुलना में perianal निष्कर्ष सहित के बाद स्कोरिंग प्रणाली की सी) का प्रदर्शन endoscopies) प्रत्येक विधि के साथ रन बनाए थे. सिस्टम बी और सी की वजह से misclassificat के लिए अग्रणी उनके चार श्रेणियों में से एक में मामलों की क्लस्टरिंग के लिए एक प्रमुख सीमा है कि नोटआयन पूर्वाग्रह (सिस्टम बी और nonequivalent श्रेणियों में सी क्लस्टर मामले). अब सार्थक संख्यात्मक अंकों की ट्रैकिंग की अनुमति है जबकि दशमलव पहचानकर्ता जोड़ कर, हम भी, पूर्णांक श्रेणियों में क्लस्टर का मौका कम. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

तालिका 1
चूहों में आंतों की सूजन मूल्यांकन करने के लिए इंडोस्कोपिक मापदंड रूप में प्रकाशित तालिका 1. नैदानिक ​​मानकों. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

इंडोस्कोपिक AssessmeMurine कोलोरेक्टल सूजन और ट्यूमर के NT एक दशमलव भारित स्कोरिंग प्रणाली का प्रयोग: पैरामीटर परिभाषाएँ और प्रोटोकॉल

; स्थान, आकार और tumorous घावों की संख्या के 2) रिकॉर्डिंग, और 3 चार मापदंडों और 12 संभव संख्यात्मक ग्रेड के साथ कोलोरेक्टल सूजन की हद और गंभीरता का 1) आकलन: कोलोरेक्टल स्वास्थ्य के लिए हमारे एकीकृत इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली के तीन प्रमुख घटक हैं शोधकर्ता के लिए विशेष महत्व के निष्कर्षों को उजागर करने के लिए प्राथमिक या प्रमुख घावों और इंडोस्कोपिक जटिलताओं का सौंपा प्रकार) के साथ दशमलव इकाइयों, इस के साथ साथ "दशमलव पहचानकर्ता" के रूप में भेजा. ट्यूमर के स्थान और आकार एक आभासी colonic मानचित्र पर दर्ज हैं, और लुमेन में फलाव (रुकावट) के प्रत्येक प्रतिशत में ट्यूमर की संख्या एक ग्राफ पर दर्ज की गई है. इन दो चार्ट तीन आयामों में एकीकृत किया जा सकता है कि ट्यूमर जानकारी प्रदान करते हैं. घाव श्रेणियों के लिए दशमलव इकाइयों 0.0-0.9 सीमा होती है. यदि संख्याएक विशेष वर्ग के लिए घावों की संख्या, प्रासंगिक दूसरे और तीसरे दशमलव स्थानों घावों की संख्या इंगित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. तीन घावों मनाया जाता है उदाहरण के लिए, 0,003 जोड़ने शोधकर्ता तीन घावों रहे थे कि पता करने की अनुमति होगी, 12 घावों कर रहे हैं, तो 0.012 इस्तेमाल किया जाएगा. दोहराया इंडोस्कोपिक परीक्षाओं प्रत्याशित रहे हैं तो यह ट्रैकिंग प्रणाली विशेष लाभ की है. सूजन मापदंड और गंभीरता ग्रेड की विस्तृत परिभाषा नीचे दिए गए हैं.

इंडोस्कोपिक मानदंडों की परिभाषा - ए चार नैदानिक ​​मानकों के साथ कोलोरेक्टल infammation आकलन

1. Perianal निष्कर्ष: के बाद एंडोस्कोपी रक्तस्राव के साथ भ्रम की स्थिति से बचने के लिए scoping शुरू होने से पहले इस पहलू का आकलन करें. Perianal क्षेत्र की स्वास्थ्य बृहदान्त्र, त्वचा, और सामान्य में पशु के रवैये के स्वास्थ्य की स्थिति के लिए एक प्रॉक्सी है, और इंडोस्कोपिक परीक्षा के हिस्से के रूप में शामिल है कुछ घावों नहीं कर सकते हैं और है क्योंकिhould नग्न आंखों के साथ बारीकी से जांच की जा नहीं. उचित रूप में जैव सुरक्षा उपाय का प्रयोग. चूहों द्वारा स्वस्थ संवारने वाला रक्त / निर्वहन निकाल सकते हैं, लेकिन perianal क्षेत्र से त्वचा के घावों को दूर नहीं पड़ेगा. स्कोरिंग:

  1. सामान्य. कोई रक्त, दस्त, दरारें, fistulas या मुक्ति मनाया.
  2. Fecal बात या दस्त के clumps मनाया.
  3. खूनी मुक्ति, ढीली मल (दस्त), मवाद, या मनाया मामूली ulcerations के थक्के / clumps.
  4. दानेदार बनाने का कार्य ऊतक या आसपास त्वचा के सबसे शामिल है और पशु perianal क्षेत्र में जलन या सूजन के रूप में चिह्नित किया गया है कि संकेत मिलता है कि मनाया घावों, गुदा आगे को बढ़ाव.

2. पेट के की पारदर्शिता: पेट के एंडोस्कोप के रूप colonic दीवार के माध्यम से रक्त वाहिकाओं या बाह्य अंगों कल्पना करने की क्षमता के रूप में परिभाषित धीरे ले जाया जाता है. मलाशय स्वाभाविक रूप से होने के कारण पेशी परतों को कम पारदर्शी है कि नोट एकयह कम विपरीत मौजूद है जहां श्रोणि गुहा में है D क्योंकि. यह बात murine बृहदान्त्र के समग्र भड़काऊ हालत या स्वास्थ्य को दर्शाता है के रूप में physiologically सबसे व्यापक मानकों में से एक है. यह संक्रमण या उपकला पर विषाक्त प्रभाव के प्रारंभिक दौर में mucosal erosions / अल्सर के साथ एक गैर सूजन पेट के लिए संभव है कि ध्यान दें. शारीरिक isotonic समाधान लंबी अवधि के लिए उपयोग (6 चित्र में तारों देखें) अगर इस तरह के पानी के रूप में hypotonic समाधान के रूप में, चूहों में म्यूकोसा के दांत और संकुचन के साथ बदलाव का कारण, एंडोस्कोपी दौरान निस्तब्धता के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए कि खबरदार.

  1. सामान्य. पेट के बड़े और छोटे रक्त वाहिकाओं और आसपास के विसरा स्पष्ट रूप से दिखाई दे रहे हैं. थोड़ा (आगे और पीछे, घड़ी / वामावर्त) एंडोस्कोप ले जाएँ. सफेद mesenteric वसा या अन्य आंत के अंधेरे सामग्री को भी देखा जा सकता है.
  2. छोटे जहाजों आंशिक रूप से अदृश्य रहे हैं लेकिन बड़े जहाजों दिखाई दे रहे हैं.
  3. लघु vesseलोकसभा अदृश्य हैं और बड़े जहाजों स्पष्ट नहीं कर रहे हैं. म्यूकोसा प्रकट गाढ़ा नहीं है.
  4. आंतों की दीवारों और / या mucosal शोफ / सामान्यीकृत के स्पष्ट और अधिक मोटा होना. रक्त वाहिकाओं दिखाई नहीं देते हैं. कुछ distended / वैरिकाज़ वाहिकाओं कुछ मामलों में दिखाई दे सकता है.

3. Mucosal खून बह रहा: अंतर सहज रक्तस्राव से खून बह रहा से संपर्क करें. स्वस्थ चूहों में नियमित मानक इंडोस्कोपिक प्रक्रियाओं से खून बह रहा प्रेरित नहीं करना चाहिए. सूजन है, तो वृद्धि हुई mucosal vascularity और ऊतक कमजोरी mucosal कटाव और खून बह रहा हो सकता है. जानबूझकर इस पैरामीटर का आकलन करने के लिए पेट के परिमार्जन करने की कोई जरूरत नहीं है.

  1. सामान्य, कोई खून बह रहा है.
  2. आम संपर्क खून बह रहा है. इस दर्दनाक रक्तस्राव संपर्क खून बह रहा है के रूप में परिभाषित किया गया है, यह केवल एंडोस्कोप वापस लेने के बाद न्याय किया जाना चाहिए.
  3. लागू नहीं. जानबूझकर natur तय करने के लिए परीक्षक बल को सौंपा नहींरक्तस्राव के ए.
  4. एंडोस्कोप बृहदान्त्र में प्रवेश करती है के रूप में मनाया जाता है कि एक गैर दर्दनाक और स्वाभाविक रूप से होने वाली नकसीर के रूप में परिभाषित सहज रक्तस्राव,. कभी कभी, हवा साँस गंभीर कोलाइटिस दौरान सहज रक्तस्राव लाती है.

4. फोकल घावों: कोलोरेक्टल रोगों के बद, अप्रत्याशित प्रकृति को समायोजित करने के लिए, इस एकीकृत स्कोरिंग प्रणाली की अनुमति देता है सूजन की गंभीरता से फोकल घावों की उपस्थिति (ज्यादातर अल्सरेटिव प्रकृति में) के लिए ग्रेडिंग. पेट के चूहों में एक छोटे, सीधे ट्यूबलर खंड है, यह घावों के स्थान का वर्णन करने के लिए अनावश्यक समझा था. इसके बजाय, घावों की संख्या दर्ज की गई और दशमलव पहचानकर्ता की प्रणाली का उपयोग कर कुल स्कोर में जुड़ जाते हैं. घावों के स्थान पर जोर जरूरत है हालांकि, अगर हम एफ आगे सुव्यवस्थित अनुप्रयोगों हो सकता है अनुभाग में नीचे वर्णित 'बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग सिस्टम' (डी पी ई सी) नामक एक विकल्प हैहमारे दशमलव स्कोरिंग प्रणाली से निकाली गई. ट्यूमर शायद ही कभी चूहों में कोलोरेक्टल क्षेत्र में सूजन के कुछ फार्म उत्प्रेरण के बिना अस्तित्व में है, इसलिए हम विशिष्ट (नीचे देखें) आंत्र स्वास्थ्य के संदर्भ में ट्यूमर के अध्ययन की अनुमति के लिए दशमलव पहचानकर्ता अनुभाग में ट्यूमर को शामिल किया है.

  1. सामान्य, कोई फोकल घावों.
  2. सामान्य म्यूकोसा द्वारा कवर छोटे से फ्लैट ऊंचाई की अच्छी तरह से परिभाषित क्षेत्रों मनाया. यह हल्के कोलाइटिस के रूप में पाया, स्थानीय edematous क्षेत्रों या सेल घुसपैठ / प्रसार के संभावित क्षेत्रों का पता है.
  3. लाल या कटाव क्षेत्रों मनाया.
  4. छालों या strictures. अल्सर के कारण edematous या fibrotic घाव की मरम्मत की लालिमा और विकृति (असामान्य vascularization के सबूत के साथ अनियमित किनारों) द्वारा पहचाने जाते हैं. NBI एंडोस्कोपी का पता लगाने या ulcerations का अवलोकन अंतर करने के लिए उपयोगी है. Strictures अनुबंध या पूर्व के रूप में विस्तार नहीं है कि असामान्य रूप से, संकीर्ण परिपत्र या अनियमित और आकार में स्थिर क्षेत्रों के रूप में पहचाने जाते हैंpected. अक्सर strictures लघ्वान्त्र में असामान्य mucosal तहखाने, या विल्ली के क्षेत्रों को शामिल करना. लचीला एंडोस्कोप (बाहरी व्यास = 3.3 मिमी) के मामले में पेट की अधिक समीपस्थ क्षेत्रों में गुंजाइश अग्रिम करने के लिए सावधान असमर्थता लगातार पोस्टमार्टम सत्यापित असामान्य strictures के साथ संबद्ध किया गया है.

रिकॉर्डिंग स्थान, आकार और संख्या के लिए बी ट्यूमर चार्ट

1. वर्चुअल colonic नक्शे: इस मानचित्र में लुमेन के ऊपर (0 °) काटने और इसे बाहर रोलिंग द्वारा किया जाता है कि बाहर का बृहदान्त्र और मलाशय के एक आभासी परिप्रेक्ष्य छवि है. चार्ट के ऊपर और नीचे क्रमश: पेट के (वंक) के समीपस्थ, और गुदा सौंपा है. मध्य रेखा (180 °) लुमेन के नीचे (जानवर के उदर पहलू) इंगित करता है, और अर्धवृत्त का अधिकार है और छोड़ दिया हिस्सों सही और लुमेन की बाईं दीवार से संकेत मिलता है. मानचित्र पर स्थान और ट्यूमर का क्षैतिज आकार का वर्णन है, के रूप में अच्छी तरह से करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता हैulcerations के रूप में.

2. ट्यूमर कब्जे से प्रत्येक डिग्री के लिए ट्यूमर संख्या: colonic नक्शा ही दो आयामी जानकारी प्रदान करता है फलाव आंतों प्रकार का रोग या रुकावट पैदा कर सकता है, क्योंकि ट्यूमर पेट लुमेन में विकसित करने के लिए किस हद तक, ट्यूमर का एक महत्वपूर्ण विशेषता है. इस जानकारी पर कब्जा करने के लिए, हम colonic ट्यूमर की हद तक का आकलन करने के लिए एक तीन आयामी दृष्टिकोण की अनुमति, प्रत्येक प्रतिशत रेंज में ट्यूमर की संख्या है कि दस्तावेजों लुमेन में प्रतिशत फलाव के लिए एक रिकॉर्डिंग ग्राफ गयी.

संख्यात्मक स्कोर सार्थक बनाने के लिए सी. दशमलव पहचानकर्ता और फास्ट ट्रैक प्रासंगिक मामलों

हमारे स्कोरिंग प्रणाली प्रासंगिक घावों या जटिलताओं की उपस्थिति दर्ज करने के लिए एक उपन्यास दशमलव पहचानकर्ता प्रणाली का उपयोग करता है. इन पहचानकर्ता विवरण उद्देश्य के लिए कर रहे हैं और इंडोस्कोपिक ब्याज की एक संख्यात्मक स्कोर और फास्ट ट्रैक मामलों की व्याख्या की सुविधा के लिए इरादा कर रहे हैं. हालांकि, उन्होंने यह भी घावों का वजन प्रमुख प्रकार संख्यानुसार, और पैरामीट्रिक आँकड़े करने के लिए उत्तरदायी डेटा सेट की पीढ़ी की अनुमति के लिए काम करते हैं. विकसित स्कोरिंग फार्म का उपयोग करते समय, उचित रूप में घावों के निशान, और एक दशमलव पहचानकर्ता भड़काऊ स्कोर में जोड़े जाने के लिए चुनते हैं.

  1. कोई विशेष निष्कर्ष.
  2. Perianal नालव्रण, या अत्यधिक perianal सूजन, गुदा आगे को बढ़ाव.
  3. नाबालिग दीवार भागीदारी के साथ मुख्य रूप से कटाव का घावों.
  4. अधिकतर अल्सरेटिव घावों, कुछ (अल्सर की संख्या आदि,, दो ट्यूमर के लिए, एक ट्यूमर के लिए 0.301 के रूप में ग्यारह ट्यूमर के लिए 0.311 0.302 दर्ज किया जा सकता है.) खून बह रहा है, आतंच के साथ कवर, या कारण छोटे अल्सर के coalescing को अनियमित आकार के साथ बड़े.
  5. आंतों निंदा (वैकल्पिक निंदा कोलाइटिस में एक गंभीर भड़काऊ जटिलता है, क्योंकि कुल भड़काऊ स्कोर को 2 अंक जोड़).
  6. अच्छी तरह से परिभाषित पट्टिका (आंतों की दीवारों के भीतर मोटी / nontransparent ऊतक, जैसे & #160; एक फ्लैट कम ऊंचाई ट्यूमर). घावों के लिए वर्णित के रूप में सजीले टुकड़े की संख्या (यानी, 0.401, 0.402, ... 0.411, आदि.) दर्ज किया जा सकता है. वे आंतों लुमेन के परिधीय उपस्थिति को संशोधित करता है जिसके बारे में 5-10% तक फैलाना को लग सकता है कि एक फ्लैट गैर विस्तार योग्य सतह के रूप में प्रकट हो सकता है.
  7. जन या tumorous घाव उभरे. घावों के लिए वर्णित के रूप में जनता की संख्या (यानी, 0.601, 0.602, ... 0.611, आदि.) दर्ज किया जा सकता है. उन्होंने स्पष्ट रूप से उभड़ा हुआ है, लेकिन फ्लैट दिखाई दे सकते हैं लेकिन आंतों लुमेन की distended परिधि के> 15% फैला हुआ.
  8. एंडोस्कोपी के दौरान आंसू / वेध प्रेरित किया.
  9. एंडोस्कोपी के दौरान पशु की मौत.
  10. अन्य: _____________ (जैसे गंभीर समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस, नीचे बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग प्रणाली देखें).

डी. उदाहरण और अनुप्रयोगों

इस अखबार में प्रस्तुत murine एंडोस्कोपी स्कोरिंग प्रणाली हैpecifically colonic सूजन और कोलोरेक्टल ट्यूमर पर डेटा के संग्रह और विश्लेषण एकीकृत करने के लिए डिज़ाइन किया गया. ट्यूमर के लिए सम्मान के साथ, डेटा वक्र के अंतर्गत क्षेत्र, मंझला, मोड, या प्रमुख घटक विश्लेषण सहित कई सांख्यिकीय दृष्टिकोण, का उपयोग विश्लेषण किया जा सकता है. व्यक्तिगत स्तर पर, स्कोरिंग प्रणाली शोधकर्ताओं समय पर एक माउस में colonic स्वास्थ्य की निगरानी कर सकते हैं. भड़काऊ subscores संक्षेप और प्रकार और घावों जहां उपयुक्त की संख्या के लिए उचित दशमलव पहचानकर्ता appending के बाद कुल स्कोर शोधकर्ताओं संख्यानुसार colonic सूजन, घाव का सबसे प्रमुख प्रकार, और घावों की संख्या की हद तक यों के लिए अनुमति देगा. उदाहरण के लिए, 12.609 के स्कोर के इस माउस tumorous जनता फैला हुआ गंभीर कोलोरेक्टल सूजन और नौ इंगित करता है कि, एंडोस्कोपी दौरान छिद्रित किया गया था कि एक सामान्य perianal क्षेत्र और कोलोरेक्टल म्यूकोसा के साथ एक स्वस्थ माउस 0.7 के कुल स्कोर होगा. दशमलव पहचानकर्ता सिस्टम होगाशोधकर्ताओं सूची और आसानी से रन बनाए चूहे के बड़े डेटा खजाने खोज करने के लिए अनुमति देते हैं. उदाहरण के लिए, एक शोधकर्ता "0.6" है कि अंत में सभी स्कोर की पहचान के लिए खोज मापदंड सेट और फैला हुआ ट्यूमर है कि सभी मामलों को पुनः प्राप्त कर सकता है. अधिक उदाहरण अनुपूरक आंकड़े S1-S3 में सचित्र हैं.

ई. बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग प्रणाली (डी पी ई सी)

यह गंभीर / व्यापक समीपस्थ कोलाइटिस के साथ मामलों को अलग करने के लिए हमारी दशमलव पहचानकर्ता स्कोरिंग प्रणाली की एक वैकल्पिक संशोधन है. चूहों में कोलाइटिस और कोलोरेक्टल ट्यूमर के इंडोस्कोपिक लक्षण पेट के बाहर का क्षेत्रों में लगातार विकसित करने के लिए दिखाई देते हैं क्योंकि हम सलाह देते हैं:

  • पेट के बाहर का दो तिहाई के लिए विशेष ध्यान दे, वर्णित मापदंड निम्नलिखित पेट के स्कोर और यह जाहिरा तौर पर स्वस्थ है अगर समीपस्थ खंड की उपेक्षा करने के लिए. इस भ्रम से बचा जाता है और एडवेंचर्स के लिए एंडोस्कोपी की भेदभावपूर्ण शक्ति बढ़ जाती हैव्यापक कोलाइटिस के विभिन्न डिग्री के साथ tiate जानवरों.
  • अन्य, 'गंभीर समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस के रूप में चिह्नित किया जा सकता है - जो सूजन या ट्यूमर परिवर्तन समीपस्थ तीसरे में मनाया जाता है, तो हम कुल स्कोर (1.0) के लिए एक बिंदु जोड़ने के लिए और '0 .9 के रूप में दशमलव पहचानकर्ता आवंटित करने के लिए सलाह देते हैं. नक्शा ग्रिड और बार चार्ट में निष्कर्ष प्लॉट.
  • पेट के समीपस्थ तीसरे में इंडोस्कोपिक असामान्यताएं है कि जानवरों पर नज़र रखें. रोग असामान्य रूप से गंभीर हो सकता है या समीपस्थ पेट के दिशा प्लीहा वंक से परे का विस्तार हो सकता है, के रूप में विशेष ध्यान देने की पोस्टमार्टम भुगतान करें.
  • इस सिफारिश के बाद किया गया है, मूल्यांकन फार्म की 'टिप्पणियों अनुभाग' में इस दृष्टिकोण का रिकॉर्ड, और प्रयोगों भर में इस प्रवृत्ति का अनुसरण करें. मूल्यांकन 0-13.9 पर्वतमाला जो हमारे 'बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग प्रणाली' या डी पेक्स, निम्न आयोजित किया गया है कि अपने अंतिम प्रकाशन में तलब करें. इस संशोधन नहीं हुआ है कि नोट व्यापक / गंभीर समीपस्थ कोलाइटिस बिना पशुओं में इस्तेमाल अगर हमारे स्कोरिंग प्रणाली पर tatistical प्रभाव.

पूरक आंकड़े.

चित्रा S1
चित्रा S1. कोलोरेक्टल ट्यूमर के साथ एक माउस के इंडोस्कोपिक मूल्यांकन का उदाहरण है. पशु AOM और डीएसएस पूर्व एंडोस्कोपी के साथ इलाज किया गया. इंडोस्कोपिक निष्कर्षों से भरा ए) क्रमश: सामान्य और NBI मोड में प्रतिनिधि छवि,. बी) स्कोरिंग फार्म. दो प्रासंगिक निष्कर्ष कर रहे हैं, हालांकि शोधकर्ता नैदानिक ​​गंभीरता और अनुसंधान लक्ष्यों के आधार पर दशमलव पहचानकर्ता 0.6 आवंटित करने के लिए चुना है कि ध्यान दें. पैरामीट्रिक सांख्यिकीय विश्लेषण की एक किस्म के ट्यूमर / अल्सर का नक्शा 'और चार्ट' ट्यूमर protrusions के रिकार्ड 'में दर्ज आंकड़ों के साथ आयोजित किया जा सकता है. iles/ftp_upload/50843/50843figs1highres.jpg "लक्ष्य =" _blank "> बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा S2
चित्रा S2. एक colonic निंदा और एक इंडोस्कोपिक जटिलता. आंतों लुमेन के संकुचन और एक nonperforating, mucosal आंसू निंदा साइट के लिए सिर्फ बाहर का एंडोस्कोपी के दौरान प्रेरित किया गया था कि नोट के साथ एक माउस का उदाहरण है. सूजन बृहदान्त्र के संकुचन और दुर्बलता mucosal आँसू में हो सकता है. पशु सामान्य संज्ञाहरण के तहत किया गया. स्कोरिंग प्रणाली हमें प्रक्रियात्मक जटिलताओं पर नजर रखने और कम करने के लिए अनुमति दी गई है कि ध्यान दें. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

43/FigureS3.jpg "चौड़ाई =" 500px "/>
चित्रा S3. एक DSS इलाज माउस में सूजन और इंडोस्कोपिक स्कोरिंग के समय के पाठ्यक्रम का उदाहरण है. संख्या सुगम हो सकता है कि नोट और colonic सूजन (1-5 और 8) प्रगति की है, और कहा कि संकेत मिलता है कि सुबह 8 (दशमलव 0.2 द्वारा विकसित erosions सुबह 11 से) और अल्सर (दशमलव 0.3). बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

चूहों में इंडोस्कोपिक तकनीक के संशोधन और समस्या निवारण के बारे में कई विचार कर रहे हैं. लचीला एंडोस्कोपी के प्रयोग के दौरान महारत हासिल करने की आवश्यकता है कि प्रक्रिया के महत्वपूर्ण पहलुओं कोणीयकरण और टोक़ नियंत्रण के समन्वय के साथ पेट फैलावट और माउस की सांस समझौता रोकने की जरूरत हवा की मात्रा का समायोजन, और दृश्य नियंत्रण का मामूली तकनीकी पहलुओं को शामिल . टोक़ नियंत्रण आंतों वेध के जोखिम को कम करने के लिए महत्वपूर्ण है. जब ठीक से संभाला, murine लचीला एंडोस्कोपी प्रत्यक्ष दृश्य और अनुसंधान ब्याज की आंतों क्षेत्रों की बायोप्सी नमूने की अनुमति देता है कि एक बहुत ही सुरक्षित, तेजी से प्रक्रिया हो जाता है.

(चित्रा 5) fecal बात के कारण देखने अवरोधों को हल करने के लिए, यह fecal छर्रों आमतौर पर भी उपवास या जुलाब के उपयोग के बाद मनाया जाता है समझने के लिए महत्वपूर्ण है. जब वर्तमान, मल आसानी से कोमल हवा आईएनएस साथ proximally ले जाया जा सकता हैufflation. मामलों के बारे में 11%, यह भी पीबीएस एनीमा के 1 मिलीलीटर का उपयोग करने के लिए आवश्यक है. उदर फैलावट या कि गर्भवती हैं है लगता है कि जानवरों की जांच जब पिछले एनीमा का आयोजन करने, सावधानी बरतें. क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला आंदोलनों के लिए इसे हवा साँस peristalsis को बंद नहीं करता है के बाद से क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला लहर गुजरता है जब तक कुछ ही सेकंड प्रतीक्षा करने के लिए महत्वपूर्ण है.

तिथि करने के लिए, murine आंत्र रोग का मूल्यांकन किया जाता है सबसे इंडोस्कोपिक मूल्यांकन प्रणाली कोलाइटिस या कैंसर के लिए या तो विशिष्ट हैं. इन दो स्थितियों अक्सर समन्वित रूप से पाए जाते हैं और एक दूसरे, जिससे कैंसर शोधकर्ताओं द्वारा जठरांत्र अनुसंधान के दौरान प्राप्त जानकारी के प्रयोज्य बढ़ाने, सूजन और ट्यूमर गठन दोनों बहुत पार अनुशासन संचार सुविधा होगी खाते में लेता है कि एक मानकीकृत स्कोरिंग प्रणाली के साथ बातचीत कर सकते हैं यह देखते हुए कि, और इसके विपरीत. ट्यूमर शायद ही कभी कोलोरेक्टल क्षेत्र में भड़काऊ परिवर्तन के कुछ फार्म उत्प्रेरण बिना मौजूद है क्योंकि मैंn चूहों, हम विशिष्ट आंत्र स्वास्थ्य के संदर्भ में ट्यूमर के अध्ययन की अनुमति के लिए हमारे स्कोरिंग प्रणाली की दशमलव पहचानकर्ता अनुभाग में ट्यूमर को शामिल किया है. स्कोरिंग प्रणाली की वैधता और विश्वसनीयता बढ़ाने और लंबी अवधि के प्रयोगों या नैदानिक ​​परीक्षणों में इसके उपयोग की सुविधा है, हम भी व्यवस्थित करने के लिए आवश्यक डेटा तत्व जो भंडार स्कोरिंग प्रणाली (चित्रा 2) के साथ एक साथ उपयोग करने के लिए एक मानकीकृत रिपोर्ट प्रपत्र विकसित प्रत्येक वर्गीकरण मापदंड के लिए सटीक परिभाषा पर आधारित murine आंतों में सूजन के स्कोर की गणना.

सीमित वैधता के कई murine एंडोस्कोपी स्कोरिंग प्रणाली के पिछले उपलब्धता अध्ययनों में परिणामों की व्याख्या hinders. उपयोग करने के लिए विधि प्रकाशित की जिसमें तय करने में प्रयोगशाला कर्मियों द्वारा अनुभवी भ्रम को कम करने के लिए हमने दो आयामी छवियों से अनुमान लगाया जा सकता है कि मापदंड का उपयोग इंडोस्कोपिक मूल्यांकन प्रदर्शन की सिफारिश (जैसे मापदंड था बचनेटी बनावट या स्थिरता को देखें - मल की;.) रोगाणु मुक्त सहित कुछ चूहों मुलायम दस्त हो सकता है ध्यान दें कि, और सह रैखिक (यानी नहीं कर रहे हैं कि physiologically और अस्थायी वही भड़काऊ संदर्भ द्वारा संचालित कर रहे हैं कि) कार्डिनल लक्षण क्योंकि ., 2) रक्तस्राव, mucosal और रक्त वाहिनियों की अखंडता का एक संकेतक के रूप में पहली दीवार मोटाई का एक प्रतिबिंब के रूप में, बेकर एट अल 4 से वर्णित 1) आंतों पारदर्शिता,: सूजन की, हम निम्नलिखित मानदंडों भड़काऊ घटनाओं कालानुक्रमिक के कारण अनुक्रमिक की सिफारिश कर रहे हैं , 3) perianal निष्कर्ष, एक अत्यधिक सूजन को colonic अखंडता और त्वचा में जलन या गड़बड़ी का सूचक है, और ग्रेड के लिए 4) फोकल घावों, मुख्य रूप से अल्सरेटिव चूहों में हैं जो सूजन घावों () की गंभीरता के रूप में. तिथि करने के लिए, हम 3% DSS प्रेरित murine कोलाइटिस के विशिष्ट मॉडल में tumorous घावों को नहीं देखा है. इस पत्र में वर्णित murine इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली हमारे ज्ञान करने के लिए, पहली बार के लिए प्रदान करता हैcolonic सूजन के संदर्भ में उपस्थिति और tumorous घावों के शामिल होने के मूल्यांकन के लिए एक मात्रात्मक तंत्र.

वे आंतों में सूजन, जैसे SAMP / Yit / एफसी के कुछ पशु मॉडल में आमतौर पर मौजूद होना दिखाई देते हैं के बाद से पहली बार के लिए, हम भी, murine एंडोस्कोपी के दौरान एक पैरामीटर के रूप में प्रतिबंधों को शामिल करने के महत्व पर प्रकाश डाला. Strictures कारण नौसिखिए के लिए endoscopically आकलन करना मुश्किल है, जो वृद्धि हुई फाइब्रोसिस, आंतों लोच की हानि के साथ submucosal जीर्ण सूजन की (अर्ध) परिधीय क्षेत्रों का प्रतिनिधित्व करते हैं. हम कारण धीमा आंतों पारगमन की संभावना (endoscopically जांच की जा सकती है) बाहर का खंडों की तुलना में निंदा करने के लिए समीपस्थ हैं कि क्षेत्रों में अधिक सूजन है कि, endoscopically परिभाषित निंदा प्रभावित चूहों में देखा है. अनुसंधान प्रयोजनों के लिए, यह बेहतर inflam चिह्नित करने के लिए प्रयोगों के अंत में histologically जानवरों पालन करने के लिए सलाह दी जाती हैउम्मीदवार निंदा क्षेत्रों पार्श्व कि matory के हिमायती हैं.

उचित प्रशिक्षण और विशेषज्ञ राय के बिना, किसी भी स्कोरिंग प्रणाली किसी भी समय में परिवर्तनशीलता हो सकता है. यह सुनिश्चित करने के लिए चिकित्सा पेशेवर की एक प्रशिक्षित पशु चिकित्सा द्वारा निगरानी की जानी चाहिए चूहों पर किए गए कि इंडोस्कोपिक प्रशिक्षण की प्रक्रिया पर जोर देना जरूरी है: अन्य वैज्ञानिकों या तकनीशियनों की मैं) उचित प्रशिक्षण, और द्वितीय) जानवरों के दौरान misdiagnosed या अनजाने में घायल नहीं रहे हैं यह सुनिश्चित करने के लिए प्रक्रिया. श्रेष्ठ संभव प्रथाओं और पशु कल्याण सुनिश्चित करने के लिए इस प्रक्रिया को लागू करने के लिए आगे बढ़ने से पहले विशेषज्ञों की सलाह के लिए अपने पशु अनुसंधान सुविधा के आरोप में पशु चिकित्सक से परामर्श करें. यह नियमित रूप से प्रशिक्षित endoscopists के प्रदर्शन पर नजर रखने की सलाह दी जाती है. हम दिशा निर्देशों के रूप में, जानवरों मूल्यांकन कर रहे हैं जिस क्रम में randomize, और एक अंधा फैशन में हर जानवर का आकलन इस के साथ साथ प्रस्तुत किया है छवियों का उपयोग करें. समय - समय पैरामीटर परिभाषाएँ और प्रोटोकॉल मानदंड से परामर्श करें और कश्मीर) एंडोस्कोपी और स्कोरिंग धारा 6 के दौरान हाथ पर उन्हें eep.

संक्षेप में, चिकित्सा और पशु चिकित्सा gastroenterologists की एक टीम के रूप में, हम कोलाइटिस और ट्यूमर के murine मॉडल के इंडोस्कोपिक मूल्यांकन के लिए एक मानकीकृत प्रोटोकॉल और अर्द्ध मात्रात्मक स्कोरिंग प्रणाली मौजूद है. इन अनुसंधान उपकरण दिनचर्या murine endoscopies संचालन करने के लिए सक्षम हो जाएगा शोधकर्ताओं, और अनुसंधान कर्मियों प्रयोगशालाओं के पार और विषयों के बीच की आंतों में सूजन और ट्यूमर गठन की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और तुलनीय उपायों उत्पन्न करने के अनुभव के सभी स्तरों पर की अनुमति देगा. हम उच्च वैधता के साथ सार्थक संख्यात्मक अंकों का उत्पादन करने के लिए प्रणाली विकसित की है, और व्यक्तिगत प्रयोगशालाओं के भीतर आंतरिक उपयोग के लिए अनुकूलन हो सकता है जो विशेष रूप से निष्कर्ष के तेजी से ट्रैकिंग के लिए क्षमताओं को प्रदान की है. हम भी ̵, धारा ई देख (पेट के भीतर बीमारी के लिए क्षेत्रीय संवेदनशीलता में विचार मतभेदों में ले जाता है कि एक भेदभावपूर्ण स्कोरिंग वैकल्पिक वर्णन6; बाहर का समीपस्थ इंडोस्कोपिक कोलाइटिस स्कोरिंग प्रणाली, करा डी पी ई सी). डेटा रिपोर्ट प्रपत्र और कुछ आंकड़े अनुभवहीन वैज्ञानिकों सहायता करने के लिए दीवार पोस्टर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है (आंकड़े 1, 3, 5, 6). संरचनात्मक मतभेदों सूक्ष्म इंडोस्कोपिक मतभेदों 17 के लिए खाते के रूप में murine एंडोस्कोपी के सफल कार्यान्वयन, गुदा, मलाशय, पेट, और आसपास के विसरा में श्लेष्मत्वक संगम की सामान्य शरीर रचना विज्ञान से परिचित होने पर टिका है.

वर्तमान में भी छोटी सबसे अधिक लचीली, और बेहतरीन इंडोस्कोपिक प्रौद्योगिकियों तेजी से निकट भविष्य में चूहों के लिए उपलब्ध हो सकता कैप्सूल और एक फाइबर एंडोस्कोपी के क्षेत्र में तकनीकी विकास के लिए आगे बढ़, विवो में समीपस्थ पेट के नहीं पहुँच सकते हैं. मानकीकृत प्रोटोकॉल और इस अखबार में प्रस्तुत इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली जीवित पशुओं में murine आंतों पर्यावरण की स्थिति visualizing और आकलन करने के लिए कीमती उपकरण का प्रतिनिधित्व करते हैं. इन उपकरणों सुविधाओं होगाटेट कागजात के बीच और विषयों में परिणाम की तुलनात्मकता, और नए और उभरते murine इंडोस्कोपिक प्रौद्योगिकियों को प्रयोज्यता होगा.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

वित्तीय या खुलासा हितों का संघर्ष नहीं है.

Acknowledgments

सारा Kossak, मिशेल Guanzon, सुंग Yeun यांग और उनके प्रायोगिक पशुओं के इंडोस्कोपिक मूल्यांकन के दौरान उनके सहयोग के लिए ली गुओ जिया, के लिए विशेष धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isoflurane, USP Webster Veterinary
Surgical lubricant Savage laboratories surgilube, 0281-0205-45
Phosphate Buffered Saline Thermo Scientific SH30256
RNAlater Ambion AM7021
Methylene Blue 1% Aqueous Solution Fisher Science Education S96393
Flexible digital ureteroscope Olympus America URF-V
Video system center Olympus America VISERA Pro OTV-S7 Pro
Xenon light source Olympus America VISERA Pro CLV-S40 Pro
Video recorder MediCapture, Inc. MediCap USB200
Flexible biopsy cup forceps Olympus America FBC-3115
Anesthesia machine Euthanex Corporation EZ-7000 Classic System

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Huang, E. H., et al. Colonoscopy in mice. Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).
  2. Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA. J. Immunol. 168, 411-420 (2002).
  3. Funovics, M. A., Alencar, H., Su, H. S., Khazaie, K., Weissleder, R., Mahmood, U. Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging. Mol Imaging. 2, 350-357 (2003).
  4. Becker, C., et al. In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy. Gut. 54, 950-954 (2005).
  5. Ravnic, D. J., Konerding, M. A., Huss, H. T., Wolloscheck, T., Pratt, J. P., Mentzer, S. J. Murine microvideo endoscopy of the colonic microcirculation. J. Surg. Res. 142, 97-103 (2007).
  6. Hamilton, M. J., et al. Essential role for mast cell tryptase in acute experimental colitis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 290-295 (2011).
  7. Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. High resolution colonoscopy in live mice. Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).
  8. Hensley, H. H., Merkel, C. E., Chang, W. C., Devarajan, K., Cooper, H. S., Clapper, M. L. Endoscopic imaging and size estimation of colorectal adenomas in the multiple intestinal neoplasia mouse. Gastrointest. Endosc. 69, 742-749 (2009).
  9. Banerjee, S., et al. Infection control during GI endoscopy. Gastrointest. Endosc. 67, 781-790 (2008).
  10. Cleaning and disinfection of equipment for gastrointestinal endoscopy. Report of a Working. Party of the British Society of Gastroenterology Endoscopy Committee. Gut. 42, 585-593 (1998).
  11. Sano, Y., et al. New diagnostic method based on color imaging using narrow band imaging (NBI) system for gastrointestinal tract. Gastrointest. Endosc. 53, 125-12 (2001).
  12. Davies, J., Burke, D., Olliver, J. R., Hardie, L. J., Wild, C. P., Routledge, M. N. Methylene blue but not indigo carmine causes DNA damage to colonocytes in vitro and in vivo at concentrations used in clinical chromoendoscopy. Gut. 56, 155-156 (2007).
  13. Chiang, N., Schwab, J. M., Fredman, G., Kasuga, K., Gelman, S., Serhan, C. N. Anesthetics impact the resolution of inflammation. PLoS One. 3, e1879 (2008).
  14. Zilberman, D. E., et al. The digital flexible ureteroscope: in vitro assessment of optical characteristics. J. Endourol. 25, 519-522 (2011).
  15. Machida, H., Sano, Y., Hamamoto, Y., Muto, M., Kozu, T., Tajiri, H., et al. Narrow-band imaging in the diagnosis of colorectal mucosal lesions: a pilot study. Endoscopy. 36, 1094-1098 (2004).
  16. Dohoo, I., Martin, W., Stryhn, H. Cohort studies. Veterinary Epidemiologic Research. McPike, S. M. , AVC, Inc. Charlottetown, Prince Edward Island, Canada. 151-162 (2003).
  17. Yiou, R., et al. The pathophysiology of pelvic floor disorders: evidence from a histomorphologic study of the perineum and a mouse model of rectal prolapse. J. Anat. 199, 599-607 (2001).

Tags

चिकित्सा अंक 80 Crohn रोग अल्सरेटिव कोलाइटिस पेट के कैंसर, SAMP चूहों डीएसएस / AOM-कोलाइटिस दशमलव स्कोरिंग पहचानकर्ता
एक मान्य इंडोस्कोपिक स्कोरिंग प्रणाली का प्रयोग बृहदांत्रशोथ और कोलोरेक्टल ट्यूमर की गंभीरता का मूल्यांकन करने के लिए चूहों में लचीला Colonoscopy
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kodani, T., Rodriguez-Palacios, A.,More

Kodani, T., Rodriguez-Palacios, A., Corridoni, D., Lopetuso, L., Di Martino, L., Marks, B., Pizarro, J., Pizarro, T., Chak, A., Cominelli, F. Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System. J. Vis. Exp. (80), e50843, doi:10.3791/50843 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter