Summary
מחקר זה מציג שיטה עבור ההקלטה סימולטני של שדה מקומי פוטנציאל המוח, electrocardiograms, electromyograms, ונשימה אותות של חולדה נעה בחופשיות. טכניקה זו, אשר מפחית את עלויות ניסיוני ומפשטת את ניתוח הנתונים, יתרום להבנה של אינטראקציות בין המוח לבין איברים היקפיים בגוף.
Abstract
פיקוח על הדינמיקות פיזיולוגיים של המוח ושל רקמות היקפיים הוא הכרחי עבור כתובות מספר שאלות לגבי איך הפקדים המוח הגוף פונקציות ומקצבים ואיברים פנימיים כאשר חיות נחשפים אתגרים רגשיים ושינויים שלהם סביבות חיים. באופן כללי הניסויים, אותות של איברים שונים, כגון המוח והלב, נרשמים על ידי מערכות הקלטה עצמאיות הדורשים מספר התקני הקלטה והליכים שונים לעיבוד קבצי הנתונים. מחקר זה מתאר שיטה חדשה בו זמנית יכול לפקח biosignals חשמל, כולל עשרות שדה מקומי פוטנציאל מרובות אזורים במוח, electrocardiograms המייצגים את קצב הלב, electromyograms המייצגים ערים / בשינה, להתכווצות שריר הנשימה אותות, בעכברוש נעה בחופשיות. תצורת הקלטה של שיטה זו מבוססת על מערך מיקרו-כונן קונבנציונליים עבור שדה מקומי קורטיקלית פוטנציאליים הקלטות בו עשרות אלקטרודות המשתכנים, וכל האותות המתקבלים האלקטרודות משולבים יחיד לוח חשמל רכוב על ראשה. . הנה, מערכת הקלטה זו שופרו כך אותות האיברים היקפיים מועברים גם לוח חשמל ממשק. בניתוח יחיד, אלקטרודות קודם בנפרד מושתלים לתוך חלקי גוף המתאים ואת אזורי המוח היעד. הקצוות הפתוחים של כל האלקטרודות ואז הולחמו על ערוצים בודדים של הלוח חשמל מעל ראשה כך כל האותות ניתן לשלב את לוח חשמלי יחיד. חיבור לוח זה מכשיר הקלטה מאפשר עבור האוסף של כל האותות במכשיר אחד, אשר מפחית את עלויות ניסיוני ומפשטת עיבוד נתונים, כי כל הנתונים יכולות להיות מטופלות באותו קובץ נתונים. טכניקה זו יסייע להבנת ה"מפה neurophysiological של השיוכים בין מרכזי והיקפי איברים.
Introduction
מערכת העצבים המרכזית שולט הברית הגוף בתגובה לשינויים סביבתיים שונים, שליטה זו מיוצגת בדרך כלל שינויי קצב הלב, קצב נשימה, התכווצויות שרירים. עם זאת, מחקרים מעטים בחנו איך גורמים פיזיולוגיים היקפיים כגון משויכים פעילות קורטיקלית. כדי לטפל בבעיה זו, שיטת ההקלטה בקנה מידה גדול עבור ניטור biosignals חשמל רקמות מרכזי והיקפי הכרחי. בקליפת, שדה מקומי פוטנציאליים (LFP) אותות נרשמים extracellularly על ידי אלקטרודות אשר מוכנסים לתוך רקמות קורטיקלית1,2,3. במקביל להקליט אותות מרובים LFP מהאזורים קורטיקלית של יונקים קטנים, כגון חולדות ועכברים, מספר מחקרים פיתחו סוגים שונים של ההרכבות אלקטרודה מחוייט מכונים מיקרו-כוננים. מיקרו-כונן רגיל מורכב ברגי מתכת המחוברים החלקים האמצעי של האלקטרודות (שהם בדרך כלל tetrodes), גוף הליבה התואם את הברגים ואלקטרודות וקרש הממשק החשמלי (EIB) התואם חורים מתכת כדי לחבר את הקצוות הפתוחים של האלקטרודות (איור 1 2 איור, איור 3). הרכבה אלקטרודה זו מאפשרת למפעיל לשלוט העומק של אלקטרודות רבים מוכנס לתוך המוח במשך ימים עד שבועות, ומאפשר ביצוע הקלטות כרונית לטווח ארוך של פעילות. עצבית כמו החיה היא אתגר שונות פעילויות התנהגותיות. באיברים ההיקפיים, פעימות הלב אותות נרשמים כמו electrocardiograms (ECGs) על-ידי זוג אלקטרודות אשר מושתלים בערך ב-5,64,אזור הלב, שרירי השלד אותות נרשמים כמו electromyograms (EMGs) עם אלקטרודות אשר מוכנסים8,97,רקמת שריר. היחס בין אותות חשמליים של הנורה הריח, קצב הנשימה (BR) נחקרה עם יחידה אחת הקלטות10,11. במערכות הקלטה קונבנציונאלי, אלה אותות ברקמות שונות שנלכדו באמצעות התקני הקלטה עצמאית, מה שאומר כי מערכת ניסויית נוסף נדרש בדיוק לסנכרן את המכשירים הללו מרובים עבור בו זמנית הקלטות של אותות המוח-הגוף. מערכת זו פותחה כדי להתגבר על בעיה זו. בשיטה זו כל אותות חשמליים הקליט האיברים היקפיים, כולל ECGs, EMGs אותות חשמליים מן הנורה הריח המשקפים את קצב הנשימה, משולבים לתוך מערך מיקרו-כונן יחיד1,2 ,3, כאן כינה מערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית. מערכת זו דורשת מכשיר הקלטה רב-ערוצית אחד בלבד, החלים על כל מערך מיקרו-כונן קונבנציונלי. היתרונות של שיטה זו הם כי הוא אינו דורש במכשירים מיוחדים או אותות על ההדק כדי להתאים את זמן ההקלטה של התקנים מרובים, זה מאפשר עיבוד נתונים נוחה יותר, מאז כל האותות נרשמים כסוגי נתונים דומים. טכניקה זו יסייע להבנת ה"מפה neurophysiological של השיוכים בין מרכזי והיקפי איברים. מאמר זה מתאר את ההליכים הקשורים עם הטכניקה ומציגה datasets נציג המתקבל חולדה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל הנהלים הקשורים בנושאים בעלי חיים בוצעו על פי הנחיות NIH על טיפוח ועל השימוש בבעלי חיים.
1. הכנה של המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית
- ליצור מערך מיקרו-כונן להקלטות LFP בקליפת המוח כפי שתואר במקומות אחרים1,2,3. להשאיר לפחות 6 חורים מתכת פתח על לוח ממשק אלקטרודה (EIB) לשימוש כערוצי אק ג/EMG/BR המחוברים bioflex חוטים כמתואר ב- 1.2.
- תחתוך את החוט bioflex 6 חלקים באורכים של 5.0 ס"מ. לקלף את טפלון (PTFE) ציפוי שני הקצוות של כל החלקים תיל באורכים של ~5.0 מ"מ. חבר קצה אחד של כל אחד מהחלקים תיל באחד החורים מתכתי פתוח (א/EMG/BR ערוצים) EIB עם סיכת זהב.
- חותכים כבל אמייל לתוך שתי חתיכות 5.0-ס"מ. הלחמה בקצה אחד של כל אחד החוטים האלה לערוצים הקרקע/הפניה (g/r) על EIB (איור 3, ראה גם הקודם ניירות12,13).
- עבור הכנת אלקטרודות אק ג, תחתוך את החוט bioflex לתוך שתי חתיכות 16 ס מ. לקלף את ציפוי PTFE קצוות אלה חתיכות חוט אורך ~5.0 מ מ בקצה אחד (סיום קצר) ו ~ 15 מ"מ בצד השני (סיום ארוך).
- יוצרים טבעת חוט בקוטר של 2.0 מ מ על ידי כיפוף סוף החוט ארוך, ולתקן את הצורה של הטבעת על ידי הלחמה.
- עבור הכנת EMG אלקטרודות, תחתוך את החוט bioflex 2 חלקים באורכים של 8 ס מ. לקלף את הציפוי PTFE משני קצוות אלה חתיכות חוט באורכים של ~5.0 מ מ.
- עבור הכנת BR אלקטרודות, תחתוך את החוט bioflex 2 חלקים באורכים של 6.0 ס מ. לקלף את ציפוי אמייל שני הקצוות של יצירות אלו תיל באורכים של ~5.0 מ"מ. הלחמה בקצה אחד של כל היצירות תיל לראש של בורג פלדה אל חלד (גזע למישור הארץ מהמים מד: 1.0 נובעות מ מ, אורך: 4.0 מ"מ).
- עבור הכנת אלקטרודות קרקע/הפניה (גר), חיתוך כבל אמייל 2 חלקים באורכים של 6.0 ס מ. לקלף את ציפוי אמייל שני הקצוות של יצירות אלו תיל באורכים של ~5.0 מ"מ. הלחמה בקצה אחד של כל היצירות תיל לראש של נירוסטה-סנט צלופח בורג (גזע בקוטר: 1.4 נובעות מ מ, אורך: 3.0 מ מ).
- גז לעקר כל אלקטרודות וברגים נירוסטה ולשמור אותם ברווח נקי.
2. השרשת האלקטרודות אק ג/EMG
הערה: בצע את כל השלבים כירורגית עם הטכניקה aseptic באמצעות כפפות סטיריליים ומכשירים בלוק. עבור כל השלבים הכרוכים היצירה של חתך, לחטא את העור עם 70% אתנול לפני ולכסות את החתך עם וילונות כירורגי.
- לתקן את anesthetized של עכברוש (1.0 – 3.0% איזופלוריין גז) על גבו על משטח שטוח חום. לתת הבופרנורפין בתור מקבל. במקום וטרינרי משחה על העיניים של החולדה למניעת יובש. השתמש betadine כדי לנקות את פני השטח של העור.
- לעשות חתך של ~2.0 ס מ באזור החזה המדיאלי. לחשוף את השרירים הבין-צלעי על-ידי הפרדת שרירי החזה. תפר את הטבעות של האלקטרודות אק ג השרירים הבין-צלעי.
- לתקן את הבטן של החיה על משטח חום. לעשות חתך של ~1.0 ס מ באזור הצוואר הגבי.
- הכנס האלקטרודות אק ג subcutaneously דרך החתך החזה. להחליק את הקצוות אל אזור הצוואר הגבי, להוציא אותם מן החתך הצוואר. תפר החתך החזה.
- הכנס בקצה אחד של כל אחד החקירה EMG subcutaneously באורך של ~2.0 ס מ, דרך החתך הצוואר. לתקן את האלקטרודות EMG ל שריר הצוואר על ידי תפירה.
3. ההשתלה של המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית ואלקטרודות BR
- לתקן את החולדה במכשיר stereotaxic. לעשות חתך של ~3.0 ס מ על הראש לאורך הקו האמצעי נקודה בין העיניים אל אזור הצוואר. לחשוף את הגולגולת.
- לבצע שני מעגלי גולגולת עם קטרים של 0.7-1.0 מ מ מעל הנורה הריח 11.0 מ מ קדמי ו- 1 מ מ דו צדדיים bregma עם מקדח במהירות גבוהה. שתל שתי אלקטרודות BR בתוך הגולגולת עד קצות הגבעולים הברגים מחוברים אל פני השטח את המוח.
- לבצע שני מעגלי גולגולת עם קטרים של 0.7-1.0 מ מ מעל בצמוד הקדמי 2.7 מ"מ ו 2.7 מ"מ דו צדדיים bregma. שתל שתי אלקטרודות g/r בגולגולת עד קצה הגבעול בורג מצורפת אל פני השטח את המוח.
- לעשות חורים שישה עד שמונה עם קטרים של 1.0 מ מ באזור הסובב את גולגולת גדולה. שתל בורגי עיגון (גזע בקוטר: 1.4 נובעות מ מ, אורך: 3.0 מ מ) בתוך הגולגולת.
- לבצע גולגולת עגול גדול בקוטר של ~2.0 מ מ מעל ההיפוקמפוס האחורי 3.8 מ"מ ו 2.5 מ מ דו צדדיים bregma. למקם את המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית כך קצה הצינורית המערך נסיעה ממוקם מעל גולגולת גדולה
- למלא את החלל הפער בין קצה הצינורית על פני המוח ~ 100 µL של שני פתרונות, כלומר., 0.5% (על-ידי המסה) alginate נתרן וכלוריד הסידן 10% (על-ידי המסה).
הערה: תהליך זה יוצר ג'ל שקוף ~ 5 דקות, לאחר שני פתרונות מעורבבים על הגולגולת. - מכסה את הצינורית, BR אלקטרודות, אלקטרודות g/r, ברגי עיגון עם מלט שיניים עם עובי של 0.5 ס מ. להיות זהירים לא לכסות את הקצוות הפתוחים של אלקטרודות BR ו- g/r עם הבטון בשלב זה.
- הלחמה את הקצוות פתוחים של החקירה קצות חוט בודדים בעבר היו מחוברים לרשת EIB אק ג, EMG, BR ו- g/r (ראה את השלבים 1.2, 1.3).
- לכסות את החלק התחתון של המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית, ואת כל החוטים אלקטרודה, עם שיניים מלט. להבטיח כי כל החוטים אלקטרודה מכוסה כולו כך החולדה לא יכולה לגרד אותם לאחר ההשתלה.
- לאחר הכרתו מספיק כדי לשמור על recumbency בחזה ובצלעות שבה, לחזור החיה חטיבתי הביתה פרספקס שקוף שלה, ולשמור אותו בכוחות עצמו עם גישה חופשית לחיבור מים ומזון. לאחר הניתוח, פנקו את החיה עם אנטיביוטיקה (גנטמיצין).
- לאחר הניתוח, לפקח על החיות עם תצפית מדי יום. בדוק כי הליכה כראוי, כי לא מצפצפים כאשר הנסיין נוגע המערך מיקרו-כונן.
4. in Vivo הקלטות
הערה: כל הסימנים הם מוגבר, לטעום-2 kHz, ומעביר הלהקה-מסוננים (0.1 - 500 הרץ) למעט פעילות יחידה (לטעום-30 קילו-הרץ ו הלהקה לעבור מסוננים (500-6 kHz)).
- לחבר את EIB של המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית headstage של מכשיר הקלטה.
- לקדם את tetrodes על-ידי הפעלת את הברגים של כמה שבועות לאחר הניתוח. לאחר tetrodes סמוכים לאזורי המוח היעד, ליישב את tetrodes לתוך האזורים על פני תקופה של מספר ימים להקלטות יציב.
- נטר את האותות החשמליים בזמן החיה נע בחופשיות בחדר ההקלטה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
בשיטה זו ניתן ללכוד בו זמנית הביו-חשמליות אותות באיברים רבים המייצגים את הפעילות העצבית במוח, קצב הלב, קצב נשימה, התכווצויות שרירי השלד (איור 1). איור 4 מספק נציג את ההקלטה של עכברוש נעה בחופשיות זה היה שיחור מזון בחופשיות בתוך קופסה מלבנית (25 × 40 ס מ2). ערכת הנתונים לדוגמה כולל מעברים התנהגותית טיפוסי נע בין נח הברית. קשת כוח היה מחושב של עקבות LFP בהיפוקמפוס על ידי ניתוח דיסקרטית. האות BR הקליטה של פני השטח של הנורה הריח שימש להעריך בערך השינויים היחסיים נושם תדרים, כגון אלה להתרחש במהלך לניתוח התנהגות לרחרח.
איור 1 : איור של מערכת הקלטה עבור ניטור המוח מרובים-הגוף מאותת מעכברוש נעה בחופשיות. כל הסימנים הביו-חשמליות (LFP, אק ג, EEG, BR אותות) מעכברוש נעה בחופשיות נאספים לתוך המערך אינטגרטיבית-microdrive רכוב על הראש. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2 : מערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית. אותות כל LFP, אק ג, EEG ו BR מועברות החורים על EIB כפי שצוין על ידי החצים. האזור מנוקד מוגדל שבחלונית הימנית ומציגה את חלק tetrodes בולטות מן המערך מיקרו-כונן זה מוכנסים לתוך רקמת המוח. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3 : נוף העליון EIB. EIB כוללת 24 ערוצים LFP (LFP) קורטיקליים המחוברים tetrodes, 2 ערוצים אק ג, 2 ערוצים EMG, 2 BR ערוצים 2 ערוצים הקרקע (גר). כל הערוצים למעט ערוצים LFP היו מחוברים מבודדים חוטים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 4 : דוגמה של ההקלטה מרובה ערוצים בו זמנית של אותות הביו-חשמליות.
(מלמעלה למטה) LFP אותות בתוך קליפת המגע (סרגל קנה מידה: 250 µV). LFP אותות באזור hippocampal CA1 (סרגל קנה מידה: 500 µV). קשת כוח מקודדות לפי צבעים של המעקב LFP בהיפוקמפוס. אות א (מסונן ב 20-200 הרץ, מעברים הלהקה סרגל קנה מידה: 500 µV). אות EMG (סינון ב- 100-500 הרץ, מעברים הלהקה סרגל קנה מידה: 100 µV). אות BR (סרגל קנה מידה: 500 µV). קשת כוח מקודדות לפי צבעים של האות BR זה מציין מרחרח התנהגות כפי שהוגדרו על ידי גידול ארעי של קצב נשימה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
בשביל להבין איך המוח ממיקרו רמות פעילות היקפיים, סגן נחוצים ולהפך, בקנה מידה גדול הקלטה שיטות ללכוד biosignals חשמל מאזורי גוף מרובים בו-זמנית. מחקר זה תיאר הליך כירורגי, ומערכת הקלטה עבור ניטור מוחי שדה מקומי פוטנציאל, הלב, את סדר הגודל של בניית השרירים והדופק, אשר שופרו על מערכת הקלטה המשמש עבור הקלטות חוץ-תאי ברקמת המוח. מערכת זו אוספת אותות חשמליים במוח והן איברים היקפיים לתוך EIB יחיד על מערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית. ההכנה של המערך מיקרו-כונן אינטגרטיבית אמורה להתחיל לפחות מספר שעות לפני הניתוח, כמו זה לוקח קצת זמן. כאן, המערך נסיעה כולל tetrodes עבור הקלטה המוח שדה מקומי פוטנציאל, אך סוגים אחרים של אלקטרודות מתכת, כגון אלקטרודות פלטינה ו טונגסטן, ניתן לחבר את EIB אם קצות האלקטרודות הם מולחמים כראוי. בעת ביצוע הניתוחים בפרוטוקול, ניסויים מנוסים הצליחו להשלים את כל ההליכים בתוך 2-3 h.
שלב קריטי בתוך פרוטוקול זה הוא המיקום של האלקטרודות על הרקמה, במיוחד עבור האלקטרודות אק ג ו- EMG. מספר חזרות אימון יידרש לקבל הקלטות יציב. עד כה, כל ההקלטות היה יציב חודש אחד לפחות לאחר הניתוח. ניסויים עליך לשים לב, אם יחס אות לרעש של נתוני ההקלטות להיות נמוך, שהבעיה לעתים קרובות עקב הקיבועים רופף של האלקטרודות הקרקע/הפניה, או הלחמה לא מספיקות של קצות החוטים בין את EIBs או את הקצוות האחרים של חוטים. לעומת הקלטה אלקטרופיזיולוגיות המקובלת באמצעות כמה מכשירים עצמאית, היתרונות של שיטה זו הם (1) שזה פשוט טכנית לנהל, אם אימן מספר פעמים, (2) הוא אינו דורש מערכת תקשורת כדי לסנכרן התקנים מרובים, (3) זה מפחית את עלויות בסך הכל ניסיוני, כמו מכשיר הקלטה אחת בלבד נדרשת, והקליט (4) כל נתוני קבצים יכולים להיות מטופלים על ידי שיטת עיבוד באותה תוכנית, אשר מגביר את היעילות של ניתוח נתונים. יתר על כן, התפיסה מתודולוגי ישימה על שילובים רבים של מרובות אזורים במוח ובאיברים היקפיים, לרבות מערכת הנשימה, מערכת הדם, מערכת העצבים האוטונומית. הוא גם ישים לכל מכשיר הקלטה חשמל זמין מסחרית. סימולטני ניטור של דפוסי פעילות פיזיולוגית מערכתית בשיטה זו יהיה מועיל שחקרתי דפוסי פעילות. עצבית במצבים פיזיולוגיים שונים נגד אתגרים רגשיים, אפנון חיצוני חושית, ופתולוגיים מחלות, המוביל אל הבנה מוגברת של המנגנונים הביולוגיים האגודה מוח-גוף.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף.
Acknowledgments
עבודה זו נתמכה על ידי Kaken-שלום (17 H 05939; 17 H 05551), קרן נקאטומי, וקרן הזיכרון Suzuken.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| FEP Hookup Wire Stranded Stainless Steel | Cooner Wire Company, Chatsworth, CA | AS 633 | Bioflex wire |
| EIB-36-PTB | Neuralynx, Inc., Bozeman, MT | EIB-36-PTB | EIB |
| Cereplex M | Blackrock Microsystems, Salt Lake City, UT | Digital headstage | |
| Cereplex Direct | Blackrock Microsystems, Salt Lake City, UT | Data acquisition system | |
| UEW polyurethane magnet wire | Oyaide.com, Tokyo, Japan | UEW 0.14mm 20m | Enamel wire |
| SD-102 | Narishige, Tokyo, Japan | SD-102 | High-speed drill |
| Minimo ONE SERIES ver.2 | Minitor Co.,Ltd, Tokyo, Japan | C2012 | High-peed drill Power Supply |
| Provinice 250 mL | Shofu Inc., Kyoto, Japan | 213620136 | Dental cement |
| Small Animal Anesthetizer | Biomachinery, Chiba, Japan | TK-7 | Anesthetizer |
| Buprenorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | B7536-1ML | Analgesic |
| Isoflurane | DS Pharma Animal Health, Osaka, Japan | Isoflu 250mL | |
| Vaseline, White | Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan | 224-00165 | Vet ointment |
| Sodium alginate | Nacalai tesque, Kyoto, Japan | 31131-85 | |
| Calcium Chloride Dihydrate | Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan | 031-00435 | |
| Stainless steel screw M1.0×4.0 | MonotaRO, Hyogo, Japan | 42617504 | Stainless steel screw for BR electrodes |
| Stainless steel screw M1.4×3.0 | MonotaRO, Hyogo, Japan | 42617687 | Stainless steel screw for g/r electrodes and anchors |
References
- Kloosterman, F., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication. JoVE. (26), e1094 (2009).
- Nguyen, D. P., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (26), e1098 (2009).
- Jog, M. S., et al. Tetrode technology: advances in implantable hardware, neuroimaging, and data analysis techniques. J Neurosci Methods. 117 (2), 141-152 (2002).
- Fenske, S., et al. Comprehensive multilevel in vivo and in vitro analysis of heart rate fluctuations in mice by ECG telemetry and electrophysiology. Nat Protoc. 11 (1), 61-86 (2016).
- Rossi, S., et al. The effect of aging on the specialized conducting system: a telemetry ECG study in rats over a 6 month period. PLoS One. 9 (11), 112697 (2014).
- Cesarovic, N., Jirkof, P., Rettich, A., Arras, M. Implantation of radiotelemetry transmitters yielding data on ECG, heart rate, core body temperature and activity in free-moving laboratory mice. JoVE. (57), (2011).
- Zeredo, J. L., Kumei, Y., Shibazaki, T., Yoshida, N., Toda, K. Measuring biting behavior induced by acute stress in the rat. Behav Res Methods. 41 (3), 761-764 (2009).
- Young, G. A., Khazan, N. Electromyographic power spectral changes associated with the sleep-awake cycle and with diazepam treatment in the rat. Pharmacol Biochem Be. 19 (4), 715-718 (1983).
- Oishi, Y., et al. Polygraphic Recording Procedure for Measuring Sleep in Mice. JoVE. (107), e53678 (2016).
- Chaput, M. A. Respiratory-phase-related coding of olfactory information in the olfactory bulb of awake freely-breathing rabbits. Physiol Behav. 36 (2), 319-324 (1986).
- Ravel, N., Pager, J. Respiratory patterning of the rat olfactory bulb unit activity: Nasal versus tracheal breathing. Neurosci Lett. 115 (2-3), 213-218 (1990).
- Okada, S., Igata, H., Sakaguchi, T., Sasaki, T., Ikegaya, Y. A new device for the simultaneous recording of cerebral, cardiac, and muscular electrical activity in freely moving rodents. J Pharmacol Sci. 132 (1), 105-108 (2016).
- Sasaki, T., Nishimura, Y., Ikegaya, Y. Simultaneous Recordings of Central and Peripheral Bioelectrical Signals in a Freely Moving Rodent. Biol Pharm Bull. 40 (5), 711-715 (2017).
