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Medicine

동시 심전도 기록 및 침략 적 혈액 압력 측정 쥐에

Published: January 31, 2019 doi: 10.3791/59115

Summary

여기, 우리 실험 쥐, 동물 시설에 표준 장비와 함께 할 수 있으며 생리 또는 약리학에 적용할 수 있는 심전도와 간 동맥 혈압 (BP) 동시 녹음에 대 한 설치 설명 심장 혈관 약에 병원 또는 치료 메커니즘을 조사 연구.

Abstract

심장 혈관 생리학 또는 이상에 관련 된 연구, 심전도 및 혈압 (BP)은 기본적인 관측. 심혈 관 질환 모델, 잠재적인 심장 혈관 치료 대상 또는 제약 에이전트에 초점을 맞추고 연구 조직의 동맥 압력 및 심장 리듬 변화에 대 한 평가 요구 한다. 무선 원격 시스템 없는 경우 사용할 수 또는 저렴 한 가격, 대 퇴 동맥 cannulation 기법에서는 내부 동맥 압력 파형 기록 및 조직 혈압 측정 하는 다른 방법입니다. 이 기술은 경제적 이며 동물 시설에 표준 장비와 함께 수행할 수 있습니다. 그러나, 침략 적 동맥 압력 기록 도전 외과 기술 될 수 있는 작은 동맥의 cannulation을 필요 합니다. 여기, 우리는 대 퇴 동맥에 대 한 단계별 프로토콜 cannulation 절차를 제시. 주요 절차 보정 데이터 수집 시스템, 조직 해 부 및 대 퇴 동맥 cannulation 및 압력 기록 위한 동맥 cannulation 시스템의 설정을 포함합니다. 표면 심전도 기록 절차 포함 됩니다. 우리는 또한 normotensive 및 고혈압 쥐에서 혈압 녹음의 예를 제시. 이 의정서는 동시 심전도와 조직 혈압의 믿을 수 있는 직접 녹음을 허용 한다.

Introduction

혈압 (BP)과 심전도 (ECG) 심장 혈관 생리학과 의학에 대 한 기본 매개 변수가 있습니다. 실험 동물 모델 널리 고혈압 심장 마비1 등 다양 한 심혈 관 질환에 대 한 생물 의학 연구 및 ECG 기록 절차에 적용 된 고 실험 쥐에서 혈압 측정을 수행할 수 있습니다.

쥐에서 혈압 측정을 위한 3 개의 방법이 있다: 간 동맥 cannulation (침략)2, 꼬리 팔목 plethysmography (비 침 투)3및 라디오 원격 (침략). 꼬리 팔목 plethysmography 혈압 측정의 신뢰성은 녹음 하는 동안 처리 하는 동물에 의해 달라질 수 있습니다. 예를 들어 꼬리 팔목 지지대 및 측정 단계4동안 동시에 발생 하는 코어 혈압 변화 underestimates. 무선 원격 모니터링 혈압과 심장 박동에 깨어 자유롭게 이동 하는 동물5최고의 "금 표준" 기술 이라고 여겨진다. 그러나, 이후 라디오 원격 하드웨어 및 소프트웨어 비용이 많이 드는, 내부 동맥 cannulation 경제적인 대안으로도 널리 사용 됩니다.

간 동맥 cannulation 상당한 microsurgical 기술이 필요로 하지만 동맥 압력의 실제 파형을 생성 합니다. 혈압은 염 분 가득한 카 테 터, 대 퇴, 요 골 또는 상 완 동맥에 삽입을 통해 기록할 수 있습니다. 직접 침 습 혈압 측정의이 방법을 사용 하려면 미리 수술 동물 준비, 마 취, immobilization 실험실 동물의 조직 해 부 동맥 cannulation 및 측정을 취득 하기 전에 적절 한 교정 수술 기술 .

설치류 표면 ECG 인간의 ECG와 비슷합니다. 쥐 ECG P 파, QRS 복합물, T 파, 및 QT 간격6순서 있다. P 파, PR 간격, 복잡 한 QRS 및 T 파 심 도발은, AV 노드, 심 실 도발은 및 repolarization, 임펄스 전도 심에서 각각 반영합니다. QT 간격 그것 iso 전기 기준1돌아갑니다 T 파의 끝점에서 Q 파의 개시 기간으로 정의 됩니다.

ECG 나타냅니다 심장 systole 및 심장 단계; 따라서, 표면 ECG의 동시 녹음 침략 혈압 측정으로 상관 한다. 방법론의 조합을 사용 하 여 심장 혈관 의학에서 치료 또는 질병 모델 또는 약물의 약리 효과 병 태 생리 변화를 명료 하 게 가능 하다.

자연 고혈압 쥐 (SHR) 스트레인 일본에서 높은 혈압과 Wistar 쥐의 근 친 결혼에 의해 취득 되었다 했다. 혈압의 나이 10 주 5에서 상승 하 고 35 주 나이7의 30에서 고정 된다. 교토 Wistar 쥐 (WKY) 수축 기 혈압 130 mmHg7 에 대 한 있고 normo 집중 제어 일반적으로 사용 됩니다. 우리 사용 SHR WKY intraarterial cannulation 혈압과 심전도 기록의 결과 보여 줍니다.

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Protocol

설명 하는 모든 동물 실험 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 가오슝 의학 대학에 의해 승인 되었다.

1. 동물 보호

  1. 작은 동맥 크기 때문에 어려운 cannulation를 방지 하려면 몸 무게 200g 이상으로 쥐를 사용 합니다.
  2. 감 금 소 및 빠른 쥐에서 하룻밤 차를 제거 합니다.
  3. 특별 한 실험 설계는 물 광고 libidum를 제공 합니다.

2. 실험 준비

  1. 다음의 자료를 얻기: 치아 (그림 1A), 수술가 위 (그림 1B), 좋은 팁 (그림 1C, 1d), 직각 팁 (그림 1E), 집게 집게 집게 불독 혈관 클램프 (그림 1 층 ), 길이 (그림 1G), 마이크로 위 (그림 1 H), 간 동맥 정 맥에서 실크 문자열 약 20 c m, 0.5 m m, 0.9 m m, 길이에 25-30 cm의 외부 직경의 내부 직경을 가진 멸 균 폴 리 에틸렌 (PE) 관 연결 26 G x 1/2 ' 바늘 (그림 1I), 간 동맥 정 맥 및 압력 트랜스듀서 (그림 1 K), 그리고 1 mL 주사기를 연결 하기 위한 두 개의 3-방법 stopcocks (그림 1J) heparinized 염 (100 IU/mL)으로 가득입니다.
  2. 동물 준비
    1. Isoflurane (25 cm x 25 cm x 14 cm 유도 챔버와 3% isoflurane nosecone 사용 하 여 다음 4 %isoflurane 포화에 쥐를 배치)의 흡입에 의해 쥐를 anesthetize.
      참고: 동물 충분히 anesthetized 하지 경우 isoflurane의 흐름 속도를 설정 합니다.
    2. 발가락을 곤란 하 게 하 여 통증 반사를 테스트 합니다.
    3. 미리 잘라 스티로폼 보드 (또는 두꺼운 판지)에서 부정사 위치에 쥐를 놓습니다. 몸 (그림 2A) 고정을 고무 밴드와 함께 4 개의 다리를 수정 합니다.
      참고: ECG 기록 동안 잠재적인 소음을 방지 하려면 배치 표면 전도성 되지 않아야 합니다.
  3. 혈압과 심전도 기록 장치를 준비 합니다. 아날로그 입력된 장치 신호, 호환 허브 압력 트랜스듀서, 3 바이 폴라 바늘 밀고 심전도 리드와 적당 한 소프트웨어와 컴퓨터를 포함 합니다.

3. 압력 변환기 교정

  1. 혈압 기록의 개시 전에 표준 수은 혈압 계 (그림 1 L)와 보정.
  2. 혈압에서 압력 커 프를 제거 하 고 데이터 수집 시스템의 압력 트랜스듀서 (그림 1 K)를 연결 하는 인플레이션 튜브에 3 방향 자 지.
  3. 스크류 공기 방출 밸브를 시계 방향 으로입니다. 계기에 눈을 유지 하 고 인플레이션 전구 펌핑 유지. 100 mmHg를 표시 하는 게이지 압력 트랜스듀서에 연결 하는 3 방향 자 지를 전환 합니다. 보정에 대 한 100 mmHg 압력을 사용 합니다. 혈압을 계산에 대 한 변환 인수는 자동으로 결정 됩니다.
  4. 속이 고 공기 릴리스 밸브 시계 반대 방향으로 혈압의 압력은 다시 0으로 될 때까지 압력을 분리 하십시오.
  5. 3.2 200 mmHg의 압력으로 단계를 반복 합니다.
  6. 수은 혈압 계에서 압력 변형기를 분리 합니다.
  7. PE 테 (그림 1I)의 3 방향 자 지에 압력 트랜스듀서를 연결 합니다.

4. 대 퇴 동맥의 Cannulation 미니 수술

  1. 표면 랜드마크 식별 및 스킨 (그림 2)의 절단
    1. 사 타 구니 주름 (복 부와 허벅지 사이의 교차점에서 들여쓰기)의 위치를 식별 ( 그림 2A에서 라인을 점선).
    2. 사 타 구니 주름의 센터에서 피부 전체 레이어를 대 타. 모피 면도 또는 전기 또는 절 개 전에 depilatory 크림을 사용 하 여 절 개 사이트에서 제거 될 수 있습니다.
    3. 피부를 들어올린 잘라 오리엔테이션에서 수술가 위 약 동측 허벅지 (그림 2B)에 병렬. 대 퇴 신경 및 혈관 노출된 피하 조직 (그림 2C) 아래 있습니다.
  2. 대 퇴 동맥을 노출 조직의 해 부
    1. 좋은 팁, 레이어 레이어 집게를 사용 하 여 조직 해 부. 대 퇴 혈관의 수준에서 해 부를 중지 합니다. 해 부 아래 혈관을 부상 하지는 다는 것을 확인 하십시오.
    2. 신중 하 게 집게그림 1C ( 1 D) 대 퇴 신경 및 혈관을 따라 부드러운 조직에 밖으로 취소 좋은 관찰을 얻기 위해 사용 합니다. 신경은 섬유 같은 질감에. 정 맥은 짙은 보라색 이며 동맥 타악기 (그림 3A).
    3. 각된 팁 (그림 1E) 집게를 사용 하 여 대 퇴 동맥과 정 맥 (그림 3B)의 노출된 길이 연장.
  3. 대 퇴 동맥 (그림 3)의 cannulation
    1. 집게를 사용 하 여 대 퇴 정 맥 동맥에서 분리 하 여 대 퇴 동맥에 불독 클램프 (그림 3C) 가능한 cranially 적용.
    2. (그림 3D) 노출된 대 퇴 동맥의 꼬리 터미널에서 두 실크 문자열, 불독 클램프 및 다른 바로 아래 1의 느슨한 넥타이 확인 합니다.
    3. 대 퇴 동맥의 복 부 측에 작은 구멍을 만들기 (그림 3E) 마이크로 위 (그림 1 H)를 사용 하 여.
    4. 작은 구멍을 통해 PE 카 테 터의 끝을 삽입 하 고 cranially 카 테 터를 사전.
      참고: 비틀림 PE 카 테 터를 전진 하는 동안 적용 되지 않습니다. 비틀림 힘 대 퇴 동맥을 트위스트 하 고 luminal 협 착 증에서 발생할 수 있습니다.
    5. PE 카 테 터는 안전 하 게 대 퇴 동맥 루멘으로 전진 후 불독 클램프를 제거 합니다.
      참고: 대 퇴 동맥에서 불독 클램프를 제거 하면서 PE 테에 눈을 유지. 펄스에 대 한 관찰과 관련 된 PE 테에 혈액의 backflush의 관측 동맥 루멘에의 위치를 확인 합니다.
    6. PE 카 테 터의 위치를 확보 하기 위해 위 실크 문자열을 조입니다.
      참고: 어떤 실수로 끌어오기 또는 PE 카 테 터의 전위 주요 출혈이 발생할 수 있습니다.
    7. 대 퇴 동맥의 꼬리 쪽에서 출혈을 방지 하기 위해 낮은 실크 문자열을 조입니다.
  4. 대 퇴 동맥 cannulation의 성공의 확인
    1. 1 mL 주사기를 사용 하 여 주사 0.1-0.2 mL 대 퇴 동맥으로 heparinized 염 분의. 사소한 주입에 저항 해야 합니다. 주입 시 어떤 명백한 저항 주의 경우 전체 cannulation 다시 확인 합니다.
      참고: 3 방향 stopcocks 어떤 부정적인 압력 또는 대 퇴 동맥 정 맥으로 식 염 수 주입을 적용 하기 전에 적절 하 게 전환 되는 것을 확인 하십시오. 이 시간 지점에서 모든 사출 압력 트랜스듀서에 재 교정 필요 합니다.
    2. 어떤 cannulation 사이트 돌아다니며 있는지 확인 하십시오. 그렇지 않은 경우에 젖은 면봉으로 수술 사이트를 커버.

5. 혈압의 기록

  1. PE 테에 대 한 부드러운 플러시 후 PE 테 3 방향 자 지 압력 트랜스듀서 (그림 4)에 연결 합니다.
  2. Cannulation 시스템에 없는 기포는 다는 것을 확인 하십시오. 또한 3 방향 자 지의 연결 접속을 확인 합니다.
  3. 시작 데이터 샘플링 주파수 1000 Hz의 BP. 동맥 압력 파가 될 것입니다 기록 수집 시스템 시연 (그림 6).
  4. 적어도 3-5 분 동안 안정화를 전체 설치를 허용 합니다. 불안 정한 신호 경우, 안정화 시간 15 분을 확장할 수 있습니다.
  5. 주기적으로 확인 없이 출혈 cannulation 사이트를 확인 하십시오.
    참고: 압력 변환기에서 데이터를 취득 하는 경우 그것은 동물의 심 혼의 수준에서 변환기를 배치 하는 것이 중요.

6입니다. 표면 ECG

  1. 3 바이 폴라 ECG의 긍정, 부정, 있는지 확인 하 고 참조 백 금 전극은 그대로 확인 합니다.
  2. 왼쪽된 앞, 오른쪽 앞, 오른쪽 hindleg (그림 5)에서 피하는 지도 삽입 합니다.
  3. 녹음 하는 동안 사용자 심전도 증폭기 3-500 Hz. 계속 ECG 리드 정상의 1000 Hz 및 필터 주파수의 샘플링 주파수와 전극 허브 연결 합니다. ECG 리드의 모션 불안정 기준선 및 아티팩트를 생성할 수 있습니다.

7. 동물 안락사는 실험의 완료 후

  1. 혈압과 심전도 기록의 완료 후 수집 시스템을 중지 합니다. 전극을 제거 합니다. 바로 PE 테 철수 후 이전 배치 실크 문자열을 강화 하 여 대 퇴 동맥을 선.
  2. 장소 표시 안락사 챔버에 개별적으로 쥐에 연결 된 압축 이산화탄소 (CO2) 가스 실린더. 안전 하 게 정상 인감.
  3. 채우기 속도 약 10% ~ 30% 분당 챔버 볼륨의 100% CO2 를 소개 합니다.
  4. 쥐;에 당신의 눈을 유지 호흡과 어두운된 눈 색깔의 부족은 2−3 분 이내 표시 되어야 합니다.
    참고: 호흡 운동의 정지 3 분 후 발생 하지 않으면, 시스템 챔버 채우기 비율, CO2 공급, 또는 누출 시험 되어야 한다.
  5. 호흡 후 1 더 많은 분의 챔버를 유지 CO2 흐름은 정지 한다.
  6. 심장 및 호흡기 체포를 확인 하 고 고정 및 확대 학생 죽음 확인을 합니다.
    참고: CO2 마 취 법에만 쥐 죽은 경우 양자 thoracotomy 같은 안락사의 보조 메서드를 사용 합니다.

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Representative Results

우리 SHR 및 normotensive Wistar 교토 WKY 쥐 국립 실험실 동물 센터 (타이페이, 대만)에서 구입. 모든 동물에 12 h 명암 주기는 온도 제어 시설 (20−22 ° C) 물 및 표준 차에에서 보관 되어 있었다.

우리 6 47 주 된 쥐를 사용 하 고 그들은 혈압과 심전도 측정 하기 전에 무게 했다. 심전도 SHR에 WKY BP의 동시 녹음에서 대표적인 경시는 그림 6에 나와 있습니다. 표 1 은 혈압과 심장 박동에 대 한 매개 변수를 보여줍니다. 통계 (t) 테스트 공개 상당히 높은 수축 기 혈압 및 SHR (124.5 mmHg ± 15.1 mmHg 및 84.3 mmHg ± 5.0 mmHg)에서 평균 혈압 보다 WKY (90.0 mmHg ± 7.5 mmHg와 67.5 mmHg ± 5.0 mmHg) (P < 0.05) (표 1).

ECG 기록 (표 2)에서 P 파, PR 간격, QRS 폭, 및 QT 간격의 매개 변수를 측정할 수 있습니다. 선택 (오른쪽 뒷 다리)에서 ECG 전극 배치에 관하여 왼쪽된 대 퇴 cannulation 대 오른쪽의 혈압 또는 ECG 신호에 영향을 미치지 않았다.

Figure 1
그림 1: 자료. 치아, (B) 수술가 위, (C) 조직 겸 자, 좋은 팁, (E) 각 팁 겸 자, (F) 불독 혈관 클램프, (G) 실크 문자열, (H) 마이크로으로 (D) 조직 겸 겸 자 (A) 가 위, (내가) 폴 리 에틸렌 카 테 테 르 바늘과는 3 방향 자 지 (J), (K)와 26 G x 1/2' 연결 압력 변환기 3 방향 자 지, 자 지 ((L) 수은 혈압 계 연결 녹색 화살표)와 인플레이션 전구 공기 누설 밸브 (흰색 화살표). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2: 대 퇴 동맥 해 부에 대 한 표면 랜드마크. (A) 왼쪽된 사 타 구니 주름 파선 강조와 부정사 쥐. (B) 사 타 구니의 피부 수술가 위에 의해 잘릴 수 치아와 함께 집게로 집어. (C) 대 퇴 동맥 해 부의 외과 영역. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3: 조직의 해 부 및 대 퇴 동맥의 cannulation. (A) 조직 절 개 후 대 퇴 신경 (노란색 화살표), 대 퇴 정 맥 (파란색 화살표), 그리고 대 퇴 동맥 (빨간색 화살표)을 노출. (B) 대 퇴 정 맥 그리고 동맥 신경 절단 후. 해 부 대 퇴 동맥의 두개골 터미널에 불독 혈관 클램프의 (C) 응용 프로그램. 불독 클램프와 느슨한 관계와 함께 두 개의 실크 문자열의 (D) 대 퇴 동맥 (E) A 대 퇴 동맥, 마이크로 위를 사용 하 여 만든의 복 부 측에 작은 구멍. 대 퇴 동맥으로 폴 리 에틸렌 테의 (F) 삽입 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4: 대 퇴 동맥 cannulation 압력 기록. (녹색 파선으로 강조) 내 동맥 정 맥 주사기 heparinized 염 분 가득한 두 3-방법 stopcocks (파란색 화살표)와 연결 된다. 압력 변환기 (빨간색 화살표) 3 방향 stopcocks 통해 cannulation에 연결 된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 5
그림 5: 침략 적 대 퇴 동맥 압력 및 심전도 대 한 전체 실험 설정. 3 electrocardiographic 피하 양측 앞에 삽입 하는 백 금 바늘 전극 (빨간색 화살표) 리드 다리와 오른쪽 다리 (노란색 화살표). Cannulation (파란색 화살표)와 오른쪽 대 퇴 동맥 노출된 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 6
그림 6: 대표 경시. 심전도 및 혈압 WKY (왼쪽)와 심전도 (위), 그리고 동맥 압력 파 (하단)에 대 한 (오른쪽) SHR의 동시 기록. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

WKY SHR P 값
(n = 3) (n = 3)
무게, g 407.7 ± 6.4 353.7 ± 10.3 < 0.01
심장 박동, /min 241.3 ± 15.0 262.0 ± 15.7 0.18
수축 기 혈압, mmHg 90.0 ± 7.5 124.5 ± 15.1 < 0.05
확장기 혈압, mmHg 56.3 ± 4.0 64.2 ± 0.6 0.08
BP, mmHg를 의미 67.5 ± 5.0 84.3 ± 5.0 < 0.05
MmHg, 맥 박 압력 33.6 ± 4.4 60.4 ± 15.1 0.08

표 1: 혈압 수준 측정 침략 대 퇴 동맥 cannulation. 데이터는 평균 ± 표준 편차;로 표시 됩니다. SHR = 자발적으로 고혈압 인 쥐; WKY = 교토 Wistar 쥐; 혈압 = 혈액 압력.

WKY SHR P 값
(n = 3) (n = 3)
심장 박동, /min 241.3 ± 15.0 262.0 ± 15.7 0.18
P 파, 밀리초 38.7 ± 9.3 43.0 ± 4.6 0.52
PR 간격, 밀리초 59.0 ± 7.8 61.3 ± 4.7 0.69
QRS 폭, 밀리초 43.0 ± 11.3 50.0 ± 2.6 0.4
QT 간격, 밀리초 112.0 ± 12.8 116.7 ± 9.5 0.15

표 2: electrocardiographic 매개 변수 측정. 데이터는 평균 ± 표준 편차;로 표시 됩니다. SHR = 자발적으로 고혈압 인 쥐; WKY = 교토 Wistar 쥐.

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Discussion

침략 적 동맥 cannulation 혈압의 정확한 측정을 허용 한다. 그것은 PE 튜브와 비싼 카 테 터를 필요로 하지 않고 수행할 수 있습니다. 침략 적 혈압 측정도 표면 ECG의 녹화와 동시에 수행할 수 있습니다.

이 방법에 대 한 주요 학습 곡선은 작은 혈관을 cannulate 하는 데 필요한 실험 기술 이다. 경험 있는 손에서 대 퇴 동맥 cannulation 위한 성공적인 속도 100% 접근할 수 있습니다. 연습 실제 실험을 수행 하기 전에 것이 좋습니다. 절차 동안 몇 가지 주목할 만한 포인트: (1) 확인 있는지 동물 완전히 수술;를 시작 하기 전에 마 취 (2)를 사용 하 여 불독 클램프 노출된 동맥의 높은 위치에서 동맥 벽 절단 하기 전에 광범위 한 출혈;을 방지합니다 (3) 절 개 동맥의 복 부 벽에만 고 지 벽; 손상을 방지합니다 (4) cannulation 시스템 및 electrocardiographic 리드의 꾸준한 배치 기록 하는 동안 모션 아티팩트를 방지할 수.

이 절차와 잠재적인 합병증 출혈에서 수술 절 개를 포함합니다. 동맥의 성공적이 고 부드러운 cannulation에 출혈은 매우 사소한. 주요 출혈 조직 해 부 중 대 퇴 동맥 또는 정 맥 또는 주요 지점에 사고 손상에 의해 발생할 수 있습니다. 출혈 분명 목화 공을 초점 압축에 의해 중지 될 수 있습니다. 주요 출혈의 또 다른 원인은 대 퇴 cannulation의 전위 이다. 이 경우에, 혈액 손실이입니다 일반적으로 조직 혈압에 상당한 드롭에서 결과. 이 시점에서, BP 녹음 일찍 종료 될 수 있습니다.

Telemeter 주입은 또한 침략 혈압 기록8설립된 기술입니다. 원격의 장점은 동물 구속 또는 마 취의 제한 없이 자유롭게 이동 하는 의식에서 비교적 오랜 기간 동안 높은 충실도 연속 녹음을 얻을 수 있습니다. 직접 혈압 녹음 라디오 송신기와 경 동맥 cannulation9의 성공적인 피하 이식으로 할 수 있습니다. 그러나, 고 telemeter 성공적으로 이식 하 도전적 일 수 있다 되며 하드웨어 및 소프트웨어 라디오 원격에 대 한 비용이 많이 드는.

대 퇴 동맥 cannulation에 의해 침략 혈압 측정에 대 한 몇 가지 제한이 있습니다. 첫째, 그것은 억제 하 고 의식 쥐에서 수행할 수 없습니다. 둘째, 대 퇴 동맥에 혈압 이상 또는 중앙 대동맥의 혈압 보다 낮을 수 있습니다. 셋째, 동맥 cannulation 어려울 수 있습니다 작은 설치류에 대 한 어디 대 퇴 동맥 PE 튜브를 삽입 하는 너무 작은 수 있습니다. 넷째, 뒷 다리 허 혈 귀 착될 것 이다 혈압 기록 및 대 퇴 동맥의 결 찰 완료 후 cannulated 동맥 출혈 한다. 이 제한으로 인해 동물 침입 혈압 기록에 따라 일반적으로 안락사는.

침략 적 대 퇴 동맥 cannulation 억제 하 고 동물, 마비는 잠재적으로 스트레스를 소개 하 고 혈압과 심전도 데이터10영향 필요 합니다. 스트레스는 적절 한 마 취에 의해 완화 될 수 있습니다. 마 취 주입 또는 흡입 프로토콜을 포함합니다. 우리의 과거의 경험에 높은 상승 된 혈압 I.P. 취 WKY 쥐 동물 들 여전히 스트레스 또는 고통에 나왔다. 의식이 WKY 쥐에 정상 혈압은 130/80 mmHg; 이 우리의 흡입 마 취 WKY 쥐 (표 1)에 100 mmHg 아래에 떨어졌다. Inhalational 마 취 (isoflurane) 에이전트에 몇몇 이점이 있다: 빠른 발병, 최소한의 동물 처리, 제어의 용이성, 제어 마약, 그리고 빠른 복구. 불리는 장비, 작업 환경에 실질적인 가스 누출의 경우에 인간 노출의 위험 비용 및 BP. Isoflurane 유도 혈압 감소에 중요 한 진압 효과 선택할 때 고려해 야 합니다 마 취 정권입니다.

추가 응용 프로그램은 침략 적 혈압 측정 가능. 펄스 파 속도 (PWV)에 대 한 유체 역학 원리에 따라 엄격한 동맥 펄스 웨이브 빠른11전파합니다. 신청 시 더블 cannulations 경 동맥과 대 퇴 동맥, 대동맥 PWV는 확인할 수 있습니다. 대동맥 펄스 전파의 길이에서 (근) 경 정 맥의 끝 사이 거리가 측정 될 수 있다 고 원심 (대 퇴) 동맥. 된 PWV 대동맥 길이 인접 하 고 말 초 동맥 펄스12의 최소한의 가치에 시간 차이 사이의 비율입니다.

설치는 동시 심전도 대 한 위에서 설명한 실험 쥐에서 간 동맥 혈압 기록 이며 생리 또는 약리학 연구 조사 병원 또는 치료에 대 한 저렴 하 고 매우 액세스할 수 있는 기술 심장 혈관 약에 기계 장치입니다.

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Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

이 연구는 과학의 대만 정부에 의해 지원 되었다 기술 가장 104-2314-B-037-080-MY3 부여 하 고 가장 107-2314-B-037-110 HCL 및 대만 국립 건강 연구 기관 부여 NHRI-EX107-10724SC.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene tube BECTON DICKINSON 427401 internal diameter of 0.5 mm, outer diameter of 0.9 mm
26 G x 1/2"" needle TERUMO 160426D
Adson Forceps TOP Line 12-540 12 cm (4.75") Long, Straight, 1 x 2 Teeth
Bulldog vascular clamp Teleflex 357581 8 mm
Computer  AUSUS X453M
Exernal analog signal recording device iWorx T5141538 This allows the recording of up to three channels of ECG, EMG or EEG as well as GSR (skin conductance) from a single iWire input on the recording Module.
Graefe Forceps AESCULAP Surgical Instruments BD312R MICRO DRESSING FORCEPS, CURVED, SERRATED, 105 mm, 4 1/8 
Mecury sphygmomanometer Spirit CK-101
Pressure transducer iWorx IworxBP100
Semken Forceps MEDE TECHNIK 10-104 100 mm
Software LabScribe3
Surgical scissors HEBU 1714 14.5 cm long
Syringe (1 mL) TERUMO 160426D
Three-way stopcocks Cole-Parmer EW-30600-23
Tipped forceps World Precision Instruments 504506 11 cm long, 0.1 x 0.06 mm Tips
Vannas Scissors World Precision Instruments 500086 8.5 cm long, Straight, 0.025 x 0.015 mm Tips, 7mm super fine Blades

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References

  1. Shiou, Y. -L., Huang, I. C., Lin, H. -T., Lee, H. -C. High fat diet aggravates atrial and ventricular remodeling of hypertensive heart disease in aging rats. Journal of the Formosan Medical Association. , (2017).
  2. Parasuraman, S., Raveendran, R. Measurement of invasive blood pressure in rats. Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 3 (2), 172-177 (2012).
  3. Fink, G. D. Does Tail-Cuff Plethysmography Provide a Reliable Estimate of Central Blood Pressure in Mice? Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), e006554 (2017).
  4. Wilde, E., et al. Tail-Cuff Technique and Its Influence on Central Blood Pressure in the Mouse. Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), (2017).
  5. Braga, V. A., Prabhakar, N. R. Refinement of Telemetry for Measuring Blood Pressure in Conscious Rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science : JAALAS. 48 (3), 268-271 (2009).
  6. Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: a matter of size. Frontiers in Physiology. 3 (345), (2012).
  7. Okamoto, K., Aoki, K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats. Japanese Circulation Journal. 27, 282-293 (1963).
  8. Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 44 (2), 361-373 (2000).
  9. Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry. Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).
  10. Irvine, R. J., White, J., Chan, R. The influence of restraint on blood pressure in the rat. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (3), 157-162 (1997).
  11. Nvd Vosse, F., Stergiopulos, N. Pulse Wave Propagation in the Arterial Tree. Annual Review of Fluid Mechanics. 43 (1), 467-499 (2011).
  12. Cosson, E., et al. Aortic stiffness and pulse pressure amplification in Wistar-Kyoto and spontaneously hypertensive rats. The American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 292 (5), H2506-H2512 (2007).

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의학 문제점 143 대 퇴 동맥 cannulation 간 동맥 혈압 고혈압 침략 심전도
동시 심전도 기록 및 침략 적 혈액 압력 측정 쥐에
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Lin, H. T., Shiou, Y. L., Jhuang, W. More

Lin, H. T., Shiou, Y. L., Jhuang, W. J., Lee, H. C. Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats. J. Vis. Exp. (143), e59115, doi:10.3791/59115 (2019).

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