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Cancer Research

उत्पादन और पीईटी/सीटी इमेजिंग के लिए एक व्यावहारिक गाइड ६८GA-DOTATATE न्यूरोएंडोक्राइन के लिए दैनिक नैदानिक अभ्यास में ट्यूमर

Published: April 17, 2019 doi: 10.3791/59358
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1
1Department of Nuclear Medicine, Netherlands Cancer Institute

Summary

सुविभेदित न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर, सोमेटोस्टेटीनो रिसेप्टर्स का उपयोग करते हैं, जो रेडियोलाबद्ध सोमेटोस्टेटइन एनालॉग ६८GA-DOTATATE के साथ नैदानिक इमेजिंग के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इस प्रोटोकॉल विवरण ६८GA-DOTATATE, गुणवत्ता नियंत्रण, रोगी की तैयारी के radiolabeling, और बाद पीईटी/ विकिरण सुरक्षा और ६८Ga के कम आधे जीवन के कारण समय संकीर्णन ध्यान में रखा जाता है ।

Abstract

न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर कैंसर का एक दुर्लभ रूप है जो न्यूरोएंडोक्राइन कोशिकाओं से उठता है और पूरे शरीर में लगभग किसी भी स्थान पर मौजूद हो सकता है । हालांकि इन ट्यूमर के बीच एक आम भाजक प्रस्तुति में, सोमेटोस्टेटिन रिसेप्टर्स की overexpression है । ६८ Ga-dotatate एक सोमेटोस्टेटिन अनुरूप है पोजीट्रान उत्सर्जक गैलियम-६८ (६८Ga) के साथ लेबल । अच्छी तरह से विभेदित न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर के लिए, ६८Ga-dotatate पोजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी)/गणना टोमोग्राफी (सीटी) इमेजिंग निदान, रोग बोझ का निर्धारण, और चिकित्सा चयन के लिए प्रयोग किया जाता है ।

इस प्रोटोकॉल विवरण ६८GA-DOTATATE, गुणवत्ता नियंत्रण, रोगी की तैयारी के radiolabeling, और बाद पीईटी/ ६८GA-DOTATATE के radiolabeling एक पूरी तरह से स्वचालित लेबलिंग एक जर्मेनियम-६८ (६८जीई)/६८Ga जनरेटर को युग्मित मॉड्यूल के साथ किया जाता है । अंतिम उत्पाद की गुणवत्ता नियंत्रण तत्काल पतली परत क्रोमेटोग्राफी और ठोस चरण क्रोमेटोग्राफी, और रोगी इंजेक्शन से पहले पीएच के साथ रेडियोकेमिकल शुद्धता का मूल्यांकन करता है । आवधिक गुणवत्ता नियंत्रण ६८जीई निर्णायक, बंध्यता, और (4-(2-hydroxyethyl) 1-piperazineethanesulfonic एसिड (hepes) सामग्री का निर्धारण करने के लिए किया जाता है । रोगी की तैयारी रोगी निर्देश, सोमेटोस्टेटिन analogs के साथ उपचार के दौरान ६८Ga-dotatate के लिए एक प्रोटोकॉल, और radiopharmaceutical की नसों में प्रशासन भी शामिल है । पीईटी/सीटी इमेजिंग के लिए, अधिग्रहण और पुनर्निर्माण सेटिंग्स का वर्णन कर रहे हैं । प्रत्येक चरण के लिए, विकिरण सुरक्षा पर प्रकाश डाला जाएगा, साथ ही समय constrictions के कारण कम आधा ६८Ga के जीवन ।

पूरी तरह से स्वचालित में घर का उत्पादन और गुणवत्ता नियंत्रण के ६८GA-DOTATATE बहुत उच्च सफलता दर की ओर जाता है (९५%) और दो से चार बैच प्रति रोगी dosages, जनरेटर की उपज पर निर्भर करता है । अंत में, ६८Ga-dotatate पीईटी/सीटी इमेजिंग न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर (जाल) के ट्यूमर बोझ के बारे में जानकारी प्रदान करने का एक noninvasive और तेजी से विधि है, जबकि भी निदान और चिकित्सा चयन में सहायता ।

Introduction

नेट्स ट्यूमर का एक विषमांगी समूह है जो न्यूरोएंडोक्राइन कोशिकाओं से उत्पन्न होता है । वे शरीर में लगभग किसी भी स्थान पर हो सकता है, लेकिन जठरांत्र संबंधी मार्ग में सबसे आम हैं, अग्ंयाशय, और फेफड़ों1। हालांकि नेट एक दुर्लभ बीमारी है, संयुक्त राज्य अमेरिका में उनकी घटना १००,०००2में १९७३ से ६.९८ प्रति २०१२ लोगों में १.०९ प्रति १००,००० लोगों से बढ़ी है । शुद्ध, ६८GA-DOTATATE पीईटी/सीटी के एक सटीक निदान और मंचन के लिए देखभाल का मानक है । इस प्रोटोकॉल का उत्पादन और गुणवत्ता नियंत्रण का वर्णन ६८GA-DOTATATE, साथ ही साथ रोगी तैयारी और पीईटी/

अच्छी तरह से विभेदित जाल सोमेटोस्टेटिन रिसेप्टर्स की एक overexpression द्वारा विशेषता रहे हैं1. Somatostatin अनुरूप है कि इस रिसेप्टर के साथ बाइंड एक रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किया जा सकता है के लिए अनुमति देने के लिए परमाणु चिकित्सा इमेजिंग. पहले, आयोडीन-१२३ गामा कैमरा इमेजिंग के साथ प्रयोग किया जाता था, जो जल्द ही indium द्वारा प्रतिस्थापित किया गया था-१११ (१११में)3,4। १११ में-octreotide सिन्टीग्राफी एक दशक से अधिक के लिए परमाणु चिकित्सा नेट इमेजिंग के लिए गोल्डन मानक था5। इस बीच, तकनीकी अग्रिमों पीईटी, जो गामा कैमरा इमेजिंग से एक उच्च संवेदनशीलता और संकल्प है में किए गए थे । नेट के लिए, सोमेटोस्टेटिन अनुरूप पोजीट्रान उत्सर्जक के लिए युग्मित ६८ga, जैसे ६८ga-dotatate,6विकसित किए गए थे ।

६८ जी-सोमैटोस्टेटी रिसेप्टर (६८GA-एसआरएस) पीईटी/CT सुविभेदकारी जालों के न्यूक्लियर मेडिसिन इमेजिंग में पसंद की वर्तमान रीति है । ६८Ga-SRS पीईटी/सीटी की श्रेष्ठता १११में-octreotide कई अध्ययनों में प्रदर्शन किया गया है7,8। रिपोर्ट संवेदनशीलता और विशिष्टता 90%-९५% और 85%-१००%, क्रमशः9,10के आसपास झूठ । एक मेटा-विश्लेषण से पता चला है कि ६८Ga-एसआरएस पीईटी/CT मामलों के ४४% में प्रबंधन में परिवर्तन की ओर जाता है, भले ही पहले १११में octreotide सिन्टीग्राफी11। दिशा-निर्देशों में, ६८जीए-एसआरएस पीईटी/CT को अब नेट इमेजिंग के लिए १११से अधिक की सिफारिश की गई है, और इसे खाद्य एवं औषध प्रशासन तथा यूरोपियन मेडिसिंस एजेंसी द्वारा भी अनुमोदित किया गया है। ६८Ga-संयुग्मित पेप्टाइड्स के साथ ट्यूमर इमेजिंग के लिए एक दिशानिर्देश भी उपलब्ध है13।

इस प्रोटोकॉल विवरण ६८GA-DOTATATE के radiolabeling (यूरोपीय फार्माकोपिया14की गुणवत्ता नियंत्रण आवश्यकताओं के अनुरूप), रोगी तैयारी, और बाद पीईटी/सीटी इमेजिंग । विकिरण सुरक्षा और ६८Ga के कम आधे जीवन के कारण समय संकीर्णन ध्यान में रखा जाता है ।

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Protocol

1. जनरल विकिरण और radiopharmaceutical सुरक्षा

  1. सुनिश्चित करें कि रेडियोधर्मी सामग्री केवल साथ काम कर रहे है और प्रशिक्षित कर्मियों द्वारा संभाला । अस्पताल के कर्मचारियों के लिए खुराक, रोगियों, और बाकी सब हमेशा के रूप में यथोचित प्राप्त (ALARA) के रूप में कम रखा जाना चाहिए ।
  2. विकिरणभेषज तैयार करने के संबंध में, राष्ट्रीय कानूनों, विनियमों और दिशा-निर्देशों का पालन करना, जैसे कि उत्तम विनिर्माण पद्धति (जीएमपी) ।
    चेतावनी: निम्नलिखित प्रोटोकॉल केवल वयस्कों के ६८GA-DOTATATE पालतू/सीटी इमेजिंग के लिए है और बच्चों या गर्भवती महिलाओं के लिए उपयुक्त नहीं है.

2. तैयारी ६८GA-DOTATATE की लेबलिंग से पहले आवश्यक

  1. Elute ६८जीई/६८ga जनरेटर के साथ हाइड्रोक्लोरिक एसिड (एचसीएल) निर्माता के विनिर्देशों के अनुसार, के बीच 4 और 24 एच ६८Ga-dotatate लेबलिंग के शुरू करने से पहले ।

3. ६८GA-DOTATATE की लेबलिंग

नोट: के लिए तैयार करने और ६८GA-DOTATATE के लेबल ९० मिनट लगते है और 2 रोगी प्रशासन से पहले एच शुरू किया जाना चाहिए, गुणवत्ता नियंत्रण के लिए अनुमति देने के लिए । लेबलिंग मॉड्यूल का नेतृत्व परिरक्षण में रखा जाना चाहिए जिसे कामकों के विकिरण संरक्षण को सुनिश्चित करने के लिए लेबलिंग प्रक्रिया के दौरान बंद किया जा सकता है । यदि एक पंजीकृत किट का प्रयोग किया जाता है, तो उत्पाद विशेषताओं के सारांश (SMPC) का पालन किया जाना चाहिए या प्रस्तुत प्रोटोकॉल के साथ स्थानीय रूप से क्रॉस-वैधीकृत ।

  1. निर्माता के विनिर्देशों के अनुसार लेबलिंग मॉड्यूल पर ६८Ga लेबलिंग किट रखें । तीन गुना इसी मॉड्यूल इकाइयों पर प्लेस । ६८Ga लेबलिंग किट में दिए गए समाधानों को मैनीसिलवटों में अटैच करें ।
  2. एक बाँझ वातावरण में अंतिम शीशी, इस तरह के एक downflow इकाई या स्तरीय प्रवाह कैबिनेट के रूप में तैयार करते हैं ।
  3. एक वेंटेड ०.२२ μm फिल्टर के नीचे एक नॉनवेंटेड ०.२२ μm फिल्टर प्लेस और एक बाँझ सुई (20 ग्राम) के लिए nonvented फिल्टर देते हैं । एक 30 मिलीलीटर बाँझ शीशी में संलग्न दो फिल्टर के साथ सुई रखें । कदम ३.२ प्रति के रूप में एक ही शीशी में एक सुई (22 ग्राम) के साथ एक वेंटेड ०.२ μm तुला फिल्टर रखें ।
  4. लेबलिंग मॉड्यूल के उत्पादन के लिए nonvented फिल्टर के साथ बाँझ शीशी देते हैं और पॉजिट्रॉन emitters के लिए पर्याप्त परिरक्षण नेतृत्व में शीशी जगह है ।
  5. ६८Ga/६८जीई जनरेटर के उत्पादन लेबलिंग मॉड्यूल के इनपुट के लिए देते हैं ।
  6. ५० माइक्रोग्राम के एचए-dotatate भंग (dota-3-iodo-Tyr3-octreotate) या dotatate के 20 माइक्रोग्राम (dota-0-Tyr3-octreotate) पेप्टाइड १.५ मीटर hepes बफर समाधान के १.५ मिलीलीटर में किट में प्रदान की और यह प्रतिक्रिया की शीशी में जगह है ।
  7. लेबलिंग मॉड्यूल के चारों ओर लीड परिरक्षण बंद करें और लेबलिंग मॉड्यूल से संलग्न टैबलेट कंप्यूटर के माध्यम से ६८GA-DOTATATE का उत्पादन शुरू करें ।
  8. ६८GA-DOTATATE के संश्लेषण तक रुको (~ ३६ मिनट) समाप्त हो गया है ।
  9. लेबलिंग के बाद, कांच की शीशी से फिल्टर के साथ सुई निकालें और शीशी के आसपास के नेतृत्व परिरक्षण बंद ।
  10. इस रूप में nonvented ०.२२ μm फ़िल्टर की अक्षतता का परीक्षण करें ।
    1. हवा के साथ एक सिरिंज (10 मिलीलीटर) भरें और फिल्टर के शीर्ष पर सिरिंज जगह है । फिल्टर से जुड़ी सुई को पानी से भरी एक नली में रखें ।
    2. फिल्टर और सुई के माध्यम से हवा बल और निर्धारित करते हैं जब बुलबुले के रूप में शुरू करते हैं । हवा मूल मात्रा का < 20% करने के लिए संकुचित किया जाना चाहिए ।
  11. ६८GA-DOTATATE की गतिविधि को मापने के एक खुराक अंशदाता में शीशी रखकर उत्पादित और गतिविधि संदर्भ समय (कला) ध्यान दें ।
  12. एक बाँझ वातावरण में ऐसे एक स्तरीय प्रवाह कैबिनेट के रूप में, ०.५ मिलीग्राम ६८Ga-dotatate की शीशी से गुणवत्ता नियंत्रण के लिए निकालें और रोगी प्रशासन के लिए सिरिंज तैयार करते हैं ।
    नोट: नेतृत्व परिरक्षण में ६८GA-DOTATATE साथ समाधान रखें. इस प्रोटोकॉल में, पतला समाधान गतिविधि के कम स्तर और कम जोखिम समय के कारण परिरक्षित होने की नहीं है । तथापि, एक विकिरण जोखिम मूल्यांकन ६८GA-DOTATATE की गुणवत्ता नियंत्रण प्रदर्शन करने से पहले किया जाना चाहिए ।

4. रोगी प्रशासन से पहले ६८GA-DOTATATE की गुणवत्ता नियंत्रण

नोट: ६८GA-DOTATATE की गुणवत्ता नियंत्रण 30 मिनट लगते है और रोगी प्रशासन से पहले 30 मिनट शुरू किया जाना चाहिए । स्टॉक समाधान के लिए वर्णित dilutions मापन उपकरण में 5% मृत समय < के लिए सीसा । यह विभिंन उपकरणों के बीच भिंन हो सकते है और ६८GA-DOTATATE की गुणवत्ता नियंत्रण प्रदर्शन करने से पहले परीक्षण किया जाना चाहिए । यूरोपीय फार्माकोपिया निम्नलिखित रिलीज मापदंड पर आधारित गैलियम edotreotide इंजेक्शन की गुणवत्ता नियंत्रण का वर्णन करता है: प्रकटन = स्पष्ट और बेरंग; pH = 4.0 – 8.0; बंध्यता endotoxins प्रति प्रशासित मात्रा 175 IU <; इथेनॉल < 10% v/ रेडियोन्यूक्लाइड शुद्धता > कुल गतिविधि का 99.9%; रेडियोरासायनिक शुद्धता कुल गतिविधि का 91% >; अन्य अशुद्धियों का अभाव; Hepes प्रशासित मात्रा14प्रति 200 माइक्रोग्राम < । सभी परीक्षणों की तैयारी विधि के सत्यापन के दौरान मूल्यांकन किया गया है । नेमी गुणवत्ता नियंत्रण के लिए, परीक्षणों का एक चयनित सबसेट (रुझान निगरानी पर आधारित) किया जाता है और नीचे वर्णित है । इस प्रोटोकॉल में ठोस-चरण निष्कर्षण के साथ क्रॉस-वैधीकरण किया गया है और यूरोपीय फार्माकोपिया में वर्णित उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमेटोग्राफी विधि के रूप में एक ही परिणाम प्राप्त करता है । यह प्रदर्शन जीएमपी के आधार पर किया गया ।

  1. निंनलिखित समाधानों को पहले से तैयार करें ।
    1. एक 1 एम अमोनियम एसीटेट घोल तैयार ५० मिलीलीटर पानी में ३.९ ग्राम अमोनियम एसीटेट भंग द्वारा । समाधान 2 सप्ताह तक के लिए कमरे के तापमान पर संग्रहित किया जा सकता है ।
    2. ५० मिलीलीटर पानी में ०.१ ग्राम इडटा को घोलकर 5 मिमी एथीलेन्डिमनेटेटऐसीटिक अम्ल (ईडटा) तैयार कीजिए । घोल को कमरे के तापमान पर 1 साल तक स्टोर किया जा सकता है ।
    3. 50:50 मेथनॉल तैयार करें: 1 एम अमोनियम एसीटेट । समाधान 24 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर संग्रहित किया जा सकता है ।
  2. नेत्रहीन अंतिम ६८GA-DOTATATE उत्पाद का निरीक्षण करने के लिए सुनिश्चित करें कि यह किसी भी कणों के बिना एक रंगहीन तरल है ।
  3. एक पीएच संकेतक पट्टी के साथ ६८GA-DOTATATE समाधान के पीएच उपाय । पीएच ६.५ और ७.५ के बीच झूठ बोलना चाहिए ।
  4. मापने के लिए तत्काल पतली परत क्रोमेटोग्राफी (itlc) के माध्यम से ६८Ga कोलॉइड ।
    1. पानी की ५०० μl जोड़ें और ६८ga-dotatate की 20 μl को ध्यान से शीशी मिलाते हुए एक शेयर समाधान और homogenize (६८ga कोलॉइड [जीसी]) तैयार करते हैं ।
    2. ITLC-सिलिका जेल (एसजी) ग्लास फाइबर कागज की एक पट्टी में कटौती 7 सेमी लंबी और 1 सेमी चौड़ा ।
      नोट: केवल नुकसान के बिना स्वच्छ ITLC-एसजी कागज का उपयोग करें । कागज क्षतिग्रस्त है, तो विलायक के साथ यात्रा घटक रुकावट हो सकता है और परिणाम गलत हो जाएगा ।
    3. GC १.५ सेमी के 5 μL जोड़ें ITLC के नीचे से-एसजी कागज और एक ट्यूब में यह जगह 2 मिलीलीटर की 50:50 मेथनॉल: 1 एम अमोनियम एसीटेट । सुनिश्चित करें कि ६८GA-DOTATATE तरल के साथ संपर्क में नहीं आता है । वाष्पीकरण को रोकने के लिए ट्यूबों बंद करें ।
    4. कई मिनट रुको जब तक विलायक कूच किया है ऊपर से कम 5 सेमी जहां ६८GA-DOTATATE लागू किया गया था । पेपर को आधे में काटें और नीचे और ऊपरी हिस्सों को अलग ट्यूब (BH1 and UH1) में रखें ।
    5. एक अच्छी तरह से काउंटर में UH1 और BH1 ट्यूबों प्लेस और 400 में प्रत्येक शीशी में गिनती की संख्या का निर्धारण-600 कीव ऊर्जा खिड़की के लिए 30 एस, कोलॉइड प्रतिशत निर्धारित करने के लिए (कदम 4.4.7-4.4.9) में गणना देखें ।
    6. दोहराएं कदम 4.4.2-4.4.5 BH2 और UH2 प्राप्त करने के लिए. ।
    7. एक खाली अच्छी तरह से काउंटर की एक पृष्ठभूमि माप प्रदर्शन और 30 एस के लिए 400-600 कीव ऊर्जा खिड़की में गिनती की संख्या निर्धारित करते हैं ।
    8. UH1, UH2, BH1 और BH2 में क्षय और पृष्ठभूमि (चरण 4.4.7 में निर्धारित) UH1cor, UH2cor, BH1cor, BH2cor प्राप्त करने के लिए गणना सही । Δt मिनट में नमूना और कला (चरण ३.११ में निर्धारित) के मापन के बीच समय अंतर है ।
      Equation 1
    9. निम्न सूत्र के साथ ६८Ga कोलॉइड की संख्या की गणना; ध्यान दें कि यह 3% से कम होना चाहिए । UH1cor, UH2cor, BH1cor, BH2cor चरण 4.4.8 में प्राप्त किए गए सही मान हैं ।
      Equation 2
  5. ६८Ga आयनों स्तंभ जुदाई के माध्यम से निर्धारित करें ।
    1. 5 मिमी EDTA के 1 मिलीलीटर में ६८GA-DOTATATE के 20 μl कमजोर द्वारा एक स्टॉक समाधान बनाओ ।
    2. एक सी-18 कारतूस धीरे से १००% इथेनॉल के 1 मिलीलीटर, इसके बाद बाँझ पानी की 1 मिलीलीटर के साथ निस्तब्धता द्वारा तैयार ।
    3. बाँझ पानी के 1 मिलीलीटर में स्टॉक समाधान के 10 μL को कमजोर करके एक नमूना (एस) तैयार है, यह एक अच्छी तरह से काउंटर में रखने, और 400-600 कीव ऊर्जा विंडो में गिनती की संख्या निर्धारित करने के लिए 30 एस.
    4. एक सिरिंज के साथ सी-18 कारतूस के माध्यम से नमूना धीरे से फ्लश (5-10 मिलीलीटर/ पानी की 1 मिलीलीटर के साथ नमूना ट्यूब कुल्ला और संग्रह ट्यूब में स्तंभ के माध्यम से इस फ्लश ।
    5. संग्रह ट्यूब प्लेस (सी), खाली नमूना ट्यूब (ई), और एक अच्छी तरह से काउंटर में सिरिंज (Sy) और उनमें से प्रत्येक में गिनती की संख्या का निर्धारण 400 – 600 कीव ऊर्जा खिड़की के लिए 30 एस. आयन प्रतिशत का अनुमान करने के लिए इस का उपयोग करें (चरणों में गणना देखें 4.5.7 और ४.५ .8) ।
    6. दोहराएँ चरण 4.5.2 \ u 20124.5.5.
    7. सही क्षय और पृष्ठभूमि के लिए मायने रखता है (चरण 4.4.7 में निर्धारित) सी, एस, ई, और Sy में सी ', एस ', ई ' और sy ' निर्धारित करने के लिए, निंनलिखित सूत्र के साथ कला में गिनती की संख्या निर्धारित करने के लिए, जिसमें Δt समय मापा नमूना और कला के बीच में अंतर है एम inutes ।
      Equation 3
    8. निम्न सूत्र के साथ ६८Ga आयन प्रतिशत की गणना; ध्यान दें कि यह 2% से कम होना चाहिए ।
      Equation 4
  6. निंन सूत्र के साथ ६८GA-DOTATATE की कुल राशि की गणना द्वारा radiopharmaceutical शुद्धता का निर्धारण, जो कम से ९१% होना चाहिए ।
    Equation 5

5. रोगी प्रशासन के बाद ६८GA-DOTATATE की आवधिक गुणवत्ता नियंत्रण

नोट: यह प्रदर्शन किया जाना चाहिए > 48 एच के लिए तैयार करने के बाद ६८GA-DOTATATE को ६८ga के क्षय के लिए अनुमति देते हैं ।

  1. निंनलिखित समाधानों को पहले से तैयार करें ।
    1. बाँझ पानी की ५० मिलीलीटर में 20 मिलीग्राम HEPES भंग द्वारा HEPES संदर्भ समाधान तैयार । समाधान 6 महीने के लिए कमरे के तापमान पर संग्रहित किया जा सकता है ।
      नोट: यह प्रशासित मात्रा प्रति २०० माइक्रोग्राम की अधिकतम अनुशंसित hepes खुराक पर आधारित है ।
    2. 25:75 v/वी पानी तैयार: एसीटोनिटरियल ।
  2. अंतिम उत्पाद में HEPES एकाग्रता निर्धारित (साप्ताहिक) ।
    1. 1 μL के चरण में ६८GA-DOTATATE समाधान के 3 μl स्थानांतरण के लिए एक ITLC-एसजी एफ२५४ कागज कम से 8 सेमी लंबाई । 1 μL अनुप्रयोगों के बीच में कागज सुखाने के लिए एक झटका ड्रायर का प्रयोग करें ।
    2. चरण 5.2.1 HEPES संदर्भ समाधान के साथ दोहराएं ।
    3. 25:75 पानी की एक विलायक में स्ट्रिप्स प्लेस: acetonitrile । सुनिश्चित करें कि लागू समाधान तरल के संपर्क में नहीं आते हैं ।
    4. कुछ मिनट रुको जब तक विलायक कागज लंबाई के कम से 2/3 के लिए कूच किया है ।
    5. आयोडीन क्रिस्टल के साथ एक बंद कक्ष में कम से कम 4 मिनट के लिए कागज का विकास ।
    6. नेत्रहीन परिणाम का आकलन; पीला धब्बा दिखना चाहिए । कागज पर ६८GA-DOTATATE के साथ हाजिर संदर्भ समाधान की तुलना में कम तीव्र होना चाहिए ।
  3. निर्धारित ६८जीई अंतिम उत्पाद में निर्णायक (मासिक) ।
    1. ६८GA-DOTATATE समाधान (G) के २०० μl के साथ एक नमूना तैयार करें । यह एक अच्छी तरह से काउंटर में प्लेस और प्रत्येक में गिनती की संख्या का निर्धारण 400-600 कीव ऊर्जा खिड़की के लिए 30 एस ।
    2. दोहराएं चरण 5.3.1 ।
    3. जी में गिनती सही जी क्षय के लिए निर्धारित करने के लिए, निंनलिखित सूत्र के साथ कला में गिनती की संख्या निर्धारित करते हैं, जिसमें Δt मिनट में मापा नमूना और कला के बीच समय अंतर है ।
      Equation 6
    4. ६८जीई निर्णायक (mbq/mbq), जो ०.००१% से कम होना चाहिए, निंन सूत्र के साथ परिकलित करें ।
      Equation 7
  4. अंतिम उत्पाद (मासिक) की बाँझपन निर्धारित करें ।
    1. शेष ६८GA-DOTATATE समाधान एक tryptic सोया शोरबा (tsb) माध्यम से जोड़ें । 30-35 ° c पर 14 d के लिए सेक्यूबेट ।
    2. जांच करें कि टीएसबी मीडियम ऊष्मायन अवधि के बाद एक स्पष्ट तरल है ।

6. रोगी तैयारी और प्रशासन के ६८GA-DOTATATE

नोट: इस प्रोटोकॉल में इंजेक्शन गतिविधि पीईटी/सीटी प्रणाली उपलब्ध है और इमेजिंग प्रोटोकॉल के रूप में धारा 7 में वर्णित के साथ अच्छी गुणवत्ता के चित्र प्रदान करता है । अंय इमेजिंग सिस्टम और प्रोटोकॉल के साथ, इंजेक्शन गतिविधि अनुकूलित किया जाना चाहिए ।

  1. अग्रिम में, के बारे में जानकारी के साथ नियुक्ति और रोगी फ़ोल्डर भेजें ६८GA-DOTATATE पीईटी/ प्रत्येक अपॉइंटमेंट की पुष्टि 1 दिन पहले टेलीफ़ोन द्वारा करें ।
  2. खाद्य और पेय पहले ६८GA-DOTATATE पीईटी/सीटी इमेजिंग से प्रतिबंधित नहीं हैं । रोगियों को सलाह के लिए 2 में पानी की एक अतिरिक्त 1 एल पी इमेजिंग से पहले । यह भी अनुशंसित रोगियों को उनके साथ बच्चों या गर्भवती महिलाओं को परमाणु चिकित्सा विभाग के लिए नहीं लाते हैं ।
  3. के दिन पर ६८GA-DOTATATE पीईटी/सीटी, रोगियों को परमाणु चिकित्सा के विभाग में जांच ६० मिनट इमेजिंग से पहले । एक छोटी चिकित्सा इतिहास ले लो ।
  4. अंतिम सोमेटोस्टेटिन एनालॉग प्रशासन की तारीख के बारे में पूछताछ. यह ६८Ga के लिए एक निषेध-DOTATATE पालतू/
  5. हाथ में एक अंतःशिरा प्रवेशनी प्लेस और यह नमकीन के साथ फ्लश करने के लिए प्रवेशनी की नियुक्ति की पुष्टि ।
  6. ६८Ga के १०० mbq सुई-DOTATATE ४५ मिनट पीईटी से पहले/

7. पीईटी/सीटी इमेजिंग

  1. पेट/सीटी स्कैनर पर उनके सिर के ऊपर हथियार के साथ रोगी रखें । मरीज को परीक्षा के दौरान भी बने रहने का निर्देश दें ।
  2. एक सर्वेक्षण छवि प्राप्त करने और पिट्यूटरी ग्रंथि से मध्य जांघ को स्कैन क्षेत्र का चयन करें, जब तक अन्यथा नैदानिक संकेत के कारण निर्दिष्ट.
  3. ४० mAs, १४० कीव, और क्षीणन सुधार और संरचनात्मक सहसंबंध के लिए 5 मिमी स्लाइसें के साथ एक कम खुराक सीटी स्कैन प्रदर्शन ।
  4. एक पालतू पशु स्कैन बिस्तर स्थिति प्रति १५० एस के साथ, रोगी के सिर पर शुरू करते हैं ।
  5. फ़िल्टर्ड वापस प्रक्षेपण और 5 मिमी स्लाइस के साथ सीटी छवियों को फिर से संगठित करें ।
  6. बूँद-ओएस-TF के साथ पीईटी छवियों का पुनर्निर्माण, तीन पुनरूक्तियां और 4 मिमी x 4 मिमी x 4 मिमी के एक voxel आकार के साथ ३३ सबसेट के साथ ।
  7. सभी छवियों को स्थानीय चित्र संग्रहण और संचार प्रणाली (पैक्स) पर भेजें ।

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Representative Results

एक स्वचालित लेबलिंग प्रणाली का उपयोग करते हुए, दिसंबर २०१४ और अक्टूबर २०१८ के बीच ६८GA-DOTATATE के ३५७ बैचों का उत्पादन किया गया । ३५७ का उत्पादन किया, 17 बैच विफल रहे और ३४० बैच जारी किए गए थे, ९५.२% की एक समग्र सफलता दर के लिए अग्रणी । विफल बैच के, 11 एक तकनीकी विफलता के कारण, छह मामलों में whilst थे, उत्पादित ६८GA-DOTATATE विनिर्देशों को पूरा नहीं किया । चित्रा 1 उत्पादित बैचों का एक प्रवाह चार्ट और उत्पादित रोगी dosages की संख्या से पता चलता है. का उत्पादन ६८GA-DOTATATE की औसत राशि ६१० ± १८० mbq (मतलब ± मानक विचलन के रूप में व्यक्त) था । ६८ Ga आयनों औसत पर है ०.६% ± ०.५७% और ६८ga कोलॉइड औसत पर है उत्पादन उत्पाद का १.३७% ± ०.६९% । रेडियोफेक्टिकल शुद्धता औसतन ९८.०२% ± १.०५% थी ।

चित्रा 2 पता चलता है एक ६८GA-dotatate पीईटी/ शरीरक्रियात्मक अपग्रहण को यकृत तथा प्लीहा में देखा जा सकता है । ६८ Ga-DOTATATE गुर्दे द्वारा उत्सर्जित है और इसलिए मूत्र पथ में दिखाई देता है । चित्रा 3 अग्ंयाशय में एक प्राथमिक ट्यूमर के साथ एक मरीज को दर्शाता है ।

सावधान तैयारी के बावजूद, नहीं सभी अधिग्रहीत पीईटी छवियां इष्टतम गुणवत्ता के थे, जिनमें से दो उदाहरण दिए गए हैं । चित्रा 4a ६८ga-dotatate के उत्पादन में देरी के कारण ६८ga-dotatate की एक कम खुराक के साथ एक मरीज का एक उदाहरण से पता चलता है, जो कम गतिविधि रोगी में मौजूद होने के लिए नेतृत्व किया । इसकी वजह से ज्यादा शोर-शराबा हुआ । चित्रा 4B एक प्रस्ताव विरूपण साक्ष्य के साथ एक छवि से पता चलता है ।

Figure 1
चित्र 1: उत्पादित, विफल, और रिलीज़ किए गए बैचेस का प्रवाह चार्ट । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: प्रतिनिधि ६८Ga-रोग का कोई सबूत के साथ एक मरीज के DOTATATE की अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण । ६८Ga-dotatate के उच्च शारीरिक तेज जिगर (पीला चित्रण), तिल्ली (गहरे नीले रंग का चित्रण), और अधिवृक्क ग्रंथि (हरी चित्रण) में देखा जाता है । गुर्दे में तेज (लाल चित्रण) दोनों शारीरिक तेज और उत्सर्जन के कारण है, जबकि मूत्राशय में तेज (हल्के नीले रंग) उत्सर्जन के कारण ही है । ६८Ga-dotatate के कम शारीरिक तेज करने के लिए उदारवादी पिट्यूटरी ग्रंथि (लाल तीर), थायरॉयड ग्रंथि (नीला तीर), और लार ग्रंथियों (हरे तीर) में देखा जाता है । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: ६८Ga-dotatate पालतू/एक प्राथमिक अग्नाशय न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर के साथ एक मरीज के सीटी । (क) में प्रयुक्त अक्षीय पीईटी/सीटी छवि प्राथमिक अग्नाशय नेट (हरा तीर) visualizing । (ख) अक्षीय पीईटी छवि प्राथमिक अग्नाशय नेट (लाल तीर) visualizing । (ग) प्राथमिक अग्नाशय नेट (लाल तीर) VISUALIZING पालतू की coronal अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4: सबऑप्टिमल ६८Ga-dotatate पालतू छवियों के उदाहरण । (क) एक रोगी जो ६८GA-dotatate के केवल ४२ mbq प्राप्त में एक ६८ga-dotatate पीईटी के coronal अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण । अधिक शोर छवि में देखा जा सकता है, विशेष रूप से जिगर में (लाल तीर). जिगर मेटास्टेसिस अभी भी दिखाई देता है (हरा तीर). (ख) गति विरूपण साक्ष्य के साथ एक ६८GA-dotatate पीईटी के coronal अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण । पालतू और सीटी अधिग्रहण के बीच सिर के आंदोलन के कारण, पालतू छवियों के पुनर्निर्माण इस विरूपण साक्ष्य की ओर जाता है । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

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Discussion

यह प्रोटोकॉल ६८GA-DOTATATE के उत्पादन और बाद में पीईटी/सीटी इमेजिंग का वर्णन करता है । ६८GA-DOTATATE के प्रत्येक उत्पादित बैच के कुशल उपयोग के लिए आदेश में, सख्त समय के साथ एक इष्टतम कार्यप्रवाह की आवश्यकता है । के बाद से आधा ६८Ga के जीवन ६८ मिनट है, 15 मिनट की एक अपेक्षाकृत छोटे समय देरी रेडियोधर्मिता के एक 15% नुकसान की ओर जाता है । यह उत्पादन सुविधा के बीच सक्रिय संचार की आवश्यकता है, रोगी के लिए खुराक प्रशासनिक कर्मियों, और पीईटी/ साथ ही मरीजों को हिदायत दी जानी चाहिए कि नियुक्ति समय से मिलना क्रिटिकल है । इसके अलावा, बैच प्रति रोगी dosages की संख्या ६८जीई/६८Ga है जनरेटर आकार और उंर पर निर्भर है और, इसलिए, समय के साथ कमी होगी । एक लागत लाभ विश्लेषण जब जनरेटर प्रतिस्थापित किया जाना चाहिए निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है ।

हालांकि संवेदनशीलता और न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर का पता लगाने के लिए ६८Ga-dotatate की विशिष्टता उच्च रहे हैं, कई सीमाओं पर विचार किया जाना चाहिए । सबसे पहले, जब एक शुद्ध dedifferentiates और अधिक आक्रामक हो जाता है (ग्रेड 3 नेट या न्यूरोएंडोक्राइन कार्सिनोमा), सोमेटोस्टेटिन रिसेप्टर अभिव्यक्ति अक्सर खो दिया है. ट्यूमर के घावों इसलिए ६८GA-DOTATATE पीईटी/ इन मामलों में, 18F-FDG पीईटी/सीटी, जो ग्लूकोज चयापचय visualizes, संकेत दिया है । दूसरा, ६८GA-DOTATATE जिगर में शारीरिक तेज दिखाता है, जो भी अंग है जिसमें जाल के मेटास्टेसिस सबसे आम हैं । जिगर तेज पेप्टाइड निर्भर है, लेकिन पेप्टाइड्स के बीच अंतर छोटे और नैदानिक प्रासंगिक नहीं है15,16। एक उदारवादी सोमेटोस्टेटिन रिसेप्टर अभिव्यक्ति के साथ छोटे जिगर घावों के दृश्य सभी मामलों में संभव नहीं होगा. जब यकृत घावों के एक नैदानिक संदेह पर नकारात्मक निष्कर्षों के साथ ६८GA-DOTATATE मौजूद है, सीटी समर्पित या जिगर की श्री इमेजिंग की सिफारिश की है । तीसरा, ६८ga-dotatate इमेजिंग पालतू प्रणाली है, जो 5 मिमी के आसपास है के संकल्प द्वारा सीमित है । 5 मिमी से छोटे घावों का पता तभी लगाया जा सकेगा जब ६८Ga-dotatate का एक उच्च तेज है ।

६८Ga-एसआरएस इमेजिंग करने से पहले लंबे समय से अभिनय सोमेटोस्टेटिन analogs का उपयोग विवादास्पद रहा है । वर्तमान दिशानिर्देश के विच्छेदन की सिफारिश की लंबे समय से अभिनय सोमेटोस्टेटिन analogs 4-6 सप्ताह ट्यूमर के घावों में कम तेज की चिंताओं के कारण इमेजिंग से पहले13. हालांकि, एक हाल ही में संभावित intrapatient तुलना प्रदर्शन किया है कि लंबे समय से अभिनय सोमेटोस्टेटिन एनालॉग lanreotide ६८Ga के ट्यूमर तेज-dotatate कम नहीं था, लेकिन ट्यूमर में एक मामूली वृद्धि करने वाली पृष्ठभूमि अनुपात17। धारावाहिक ६८Ga-एसआरएस पीईटी/सीटी इमेजिंग एक ही शर्तों के तहत किया, या तो साथ या बिना लंबे समय से अभिनय सोमेटोस्टेटिन analogs, सबसे अधिक स्थिर परिणाम का उत्पादन होगा.

६८ Ga-somatostatin रिसेप्टर इमेजिंग इस अखबार में वर्णित के रूप में ६८GA-DOTATATE के साथ किया जाता है, लेकिन अन्य पेप्टाइड, जैसे ६८GA-dotatate और ६८ga-dotatate, भी उपयुक्त हैं । तीन पेप्टाइड्स सोमेटोस्टेटिन रिसेप्टर के पांच अलग उपप्रकारों के लिए उनके संबंध में छोटे मतभेदों को दिखाने के लिए, लेकिन सभी उच्च विशिष्टता और जाल के लिए संवेदनशीलता है. पेप्टाइड का चुनाव विनियामक अनुमोदन, लागत और उपलब्धता के अनुसार किया जाना चाहिए ।

अंत में, ६८Ga-dotatate पीईटी/सीटी इमेजिंग न्यूरोएंडोक्राइन ट्यूमर की देखभाल के मानक बन गया है । इस प्रोटोकॉल उत्पादन, गुणवत्ता नियंत्रण, और ६८GA-DOTATATE के पीईटी/

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

लेखक नीदरलैंड कैंसर संस्थान में नाभिकीय चिकित्सा विभाग में ६८GA-DOTATATE पीईटी/सीटी इमेजिंग में शामिल सभी कर्मचारियों को स्वीकार करते हैं ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acetonitrile Biosolve 012007 > 99.9 %
Ammonium acetate Merck 101116 ≥ 98 %
Aqua / Water for injections Braun
Automated labeling system Scintomics GRP 3V
C-18 cartridge Waters WAT023501 Sep-Pak C18 Plus Light
Dose calibrator Veenstra Instruments VIK-202-5051
EDTA Merck 324503
Ethanol Sigma Aldrich 32221-M ≥ 99.8 %
Ga-68 labeling kit ABX SC-01
Ge-68/Ga-68 generator Eckert & Ziegler 1850 MBq
HA-DOTATATE Scintomics GRPC/R-000095
HCl 0.1M for elution ABX HCl-03
HEPES Sigma Aldrich H3375 ≥ 99.5 %
Iodine Sigma Aldrich 207772 ≥ 99.8 %, solid
ITLC-SG F254 plates Merck 105735 TLC Silica gel 60 F254
ITLC-SG paper Agilent SGI0001 Glass fiber
Methanol Sigma Aldrich 32213-M ≥ 99.8 %, Ph. Eur. 
Non-vented filter Merck SLMPL25SS Millex-MP filter 0.22 µm
PET/CT Philips Gemini TOF
pH indicator strips Merck 109584 MColorpHast (pH2.0-9.0)
Tryptic soy broth medium Biotrading K111F010QK
Vented filter Merck SLGV0250S  Cathivex GV 0.22 µm
Well counter Canberra (now Mirion) Osprey Digital Tube Base MCA
Detector 76 BP76/3M-X

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References

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Aalbersberg, E. A., Geluk-Jonker, M. … More

Aalbersberg, E. A., Geluk-Jonker, M. M., Young-Mylvaganan, T., de Wit-van der Veen, L. J., Stokkel, M. P. M. A Practical Guide for the Production and PET/CT Imaging of 68Ga-DOTATATE for Neuroendocrine Tumors in Daily Clinical Practice. J. Vis. Exp. (146), e59358, doi:10.3791/59358 (2019).

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