Summary
Bu protokolde, engraftman sırasında veno-venöz bypass kullanılmadan donör organların 20 saat boyunca statik soğuk depolanmasından sonra domuz ortopik karaciğer transplantasyonu modeli tanımlanmıştır. Bu yaklaşım, anhepatik fazın en aza indirilmesi ve sofistike hacim ve vazopresör yönetimi ile basitleştirilmiş bir cerrahi teknik kullanmaktadır.
Abstract
Karaciğer nakli, çeşitli ölümcül karaciğer hastalıklarının tedavisinde altın standart olarak kabul edilmektedir. Bununla birlikte, kronik greft yetmezliği, devam eden organ bağışçısı kıtlığı ve marjinal greftlerin artan kullanımı ile ilgili çözülmemiş sorunlar, organ makinesi perfüzyonunun uygulanması gibi mevcut kavramların iyileştirilmesini gerektirmektedir. Greft yenileme ve modülasyonunun yeni yöntemlerini değerlendirmek için translasyonel modellere ihtiyaç vardır. İnsanlarla anatomik ve fizyolojik benzerlikler ve ksenotransplantasyon alanındaki son gelişmeler göz önüne alındığında, domuzlar transplantasyon modellerinde kullanılan başlıca büyük hayvan türleri haline gelmiştir. 1965 yılında Garnier ve ark. tarafından domuz ortotopik karaciğer nakli modelinin ilk kez tanıtılmasından sonra, son 60 yılda çeşitli değişiklikler yayınlanmıştır.
Spesifik anatomik özellikler nedeniyle, anhepatik faz sırasında veno-venöz bypass, hemodinamik instabilite ve perioperatif mortalite ile sonuçlanan bağırsak tıkanıklığını ve iskemiyi azaltmak için bir gereklilik olarak kabul edilir. Bununla birlikte, bir baypasın uygulanması, prosedürün teknik ve lojistik karmaşıklığını arttırır. Ayrıca, hava embolisi, kanama ve eşzamanlı splenektomi ihtiyacı gibi ilişkili komplikasyonlar daha önce bildirilmiştir.
Bu protokolde, veno-venöz bypass kullanılmadan domuz ortotopik karaciğer transplantasyonu modelini tanımladık. Donör karaciğerlerin 20 saatlik statik soğuk hava deposundan sonra engraftasyonu - genişletilmiş kriterli donör koşullarını simüle ederek - bu basitleştirilmiş yaklaşımın önemli hemodinamik değişiklikler veya intraoperatif mortalite olmadan ve karaciğer fonksiyonunun düzenli alımı ile (safra üretimi ve karaciğere özgü CYP1A2 metabolizması ile tanımlandığı gibi) gerçekleştirilebileceğini göstermektedir. Bu yaklaşımın başarısı, optimize edilmiş bir cerrahi teknik, sofistike bir anesteziyolojik hacim ve vazopressör yönetimi ile sağlanmaktadır.
Bu model, acil postoperatif seyir, iskemi-reperfüzyon hasarı, ilişkili immünolojik mekanizmalar ve genişletilmiş kriterli donör organların yenilenmesine odaklanan çalışma grupları için özel bir ilgi alanı olmalıdır.
Introduction
Karaciğer transplantasyonu, akut veya kronik karaciğer yetmezliğine yol açan çeşitli farklı hastalıklarda hayatta kalmak için tek şans olmaya devam etmektedir. 1963 yılında Thomas E. Starzl tarafından insanlıkta ilk başarılı uygulamasından bu yana, karaciğer nakli kavramı, esas olarak bağışıklık sisteminin anlaşılmasındaki ilerlemeler, modern immünsüpresyonun geliştirilmesi ve perioperatif bakım ve cerrahi tekniklerin optimizasyonu sonucunda dünya çapında uygulanan güvenilir bir tedavi seçeneğine dönüşmüştür 1,2 . Bununla birlikte, yaşlanan popülasyonlar ve organlara olan talebin artması, genişletilmiş kriterli donörlerden marjinal greftlerin kullanımının artması ve son yıllarda yeni zorlukların ortaya çıkmasıyla donör sıkıntısına neden olmuştur. Organ makinesi perfüzyonunun tanıtılması ve yaygın olarak uygulanmasının, greft yenileme ve modülasyonu ile ilgili bir dizi olasılık açtığına ve organ kıtlığını azaltmaya ve bekleme listesi mortalitesini azaltmaya yardımcı olduğuna inanılmaktadır 3,4,5,6.
Bu kavramları ve etkilerini in vivo olarak değerlendirmek için translasyonel transplantasyon modellerigereklidir 7. 1983 yılında, Kamada ve ark. sıçanlarda etkili bir ortotopik karaciğer nakli modeli sundular ve o zamandan beri dünya çapında çalışma grupları tarafından kapsamlı bir şekilde değiştirilmiş ve uygulanmış 8,9,10,11. Farelerde ortotopik karaciğer nakli modeli teknik olarak daha zorlayıcıdır, ancak aynı zamanda immünolojik aktarılabilirlik açısından daha değerlidir ve ilk olarak 1991 yılında Qian ve ark.12 tarafından bildirilmiştir. Kullanılabilirlik, hayvan refahı ve maliyetlerle ilgili avantajlara rağmen, kemirgen modelleri klinik ortamlarda uygulanabilirliklerinde sınırlıdır7. Bu nedenle, büyük hayvan modelleri gereklidir.
Son yıllarda domuzlar, insanlarla anatomik ve fizyolojik benzerlikleri nedeniyle translasyonel araştırmalar için kullanılan başlıca hayvan türleri haline gelmiştir. Ayrıca, ksenotransplantasyon alanındaki mevcut ilerleme, domuzların araştırma konusu olarak önemini daha da artırabilir13,14.
Garnier ve ark., domuzlarda karaciğer nakli modelini 1965 gibi erken bir tarihte tanımladılar15. 1967'de Calne ve ark. ve 1971'de Chalstrey ve ark. da dahil olmak üzere birçok yazar, daha sonra modifikasyonlar bildirmiş ve sonuçta 16,17,18,19,20,21'i takip edecek on yıllarda deneysel domuz karaciğeri naklinin güvenli ve uygulanabilir bir kavramına yol açmıştır.
Daha yakın zamanlarda, farklı çalışma grupları, domuz ortotopik karaciğer nakli tekniğini kullanarak, neredeyse her zaman aktif veya pasif bir veno-venöz, yani porto-caval, bypass19,22 dahil olmak üzere karaciğer transplantasyonundaki güncel konularla ilgili veriler sağlamıştır. Bunun nedeni, nispeten daha kalın bir bağırsak ve daha az porto-kaval veya kavo-kaval şant (örneğin, vena azigo eksikliği) nedeniyle anhepatik faz sırasında vena kava inferior ve portal venin kelepçelenmesine karşı türe özgü bir hoşgörüsüzlüktür, bu da perioperatif morbidite ve mortalitenin artmasına neden olur23. Alternatif olarak insan alıcılarda uygulanan Vena kava inferior koruyucu nakil teknikleri, domuz vena kava inferior karaciğer dokusu ile kaplandığı için uygulanabilir değildir23.
Bununla birlikte, bir veno-venöz baypasın kullanımı, zaten zorlu bir cerrahi prosedürde teknik ve lojistik karmaşıklığı daha da artırmakta, bu nedenle çalışma gruplarının modelin tamamen uygulanmasına teşebbüs etmesini engellemektedir. Bir bypassın doğrudan fizyolojik ve immünolojik etkilerinin yanı sıra, bazı yazarlar şant yerleştirme sırasında kan kaybı veya hava embolisi gibi önemli morbiditeye ve engraftma sonrası kısa ve uzun vadeli sonuçları potansiyel olarak etkileyen eşzamanlı splenektomi ihtiyacına dikkat çekmişlerdir24,25.
Aşağıdaki protokol, donör organların 20 saat boyunca statik soğuk depolanmasından sonra, donör karaciğer tedariği, sırt üstü hazırlığı, alıcı hepatektomi ve anesteziyolojik preoperatif ve intraoperatif yönetim dahil olmak üzere engraftman sırasında veno-venöz bypass kullanılmadan genişletilmiş kriterli donör koşullarını temsil eden basit bir domuz ortopik karaciğer nakli tekniğini tanımlamaktadır.
Bu model, acil postoperatif seyir, iskemi-reperfüzyon hasarı, genişletilmiş kriterli donör organların yenilenmesi ve ilişkili immünolojik mekanizmalara odaklanan cerrahi çalışma grupları için özel bir ilgi alanı olmalıdır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bu çalışma, Aşağı Saksonya tüketici koruma ve gıda güvenliği bölgesel otoritesi (Niedersächsisches Landesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit [LAVES]; 19/3146) tarafından onaylandıktan sonra Hannover Tıp Fakültesi Hayvan Bilimi Laboratuvarı'nda gerçekleştirilmiştir.
1. Donör karaciğer temini
NOT: Karaciğer donörleri, 4-5 aylık ve ortalama vücut ağırlığı yaklaşık 50 kg olan, ameliyattan en az 10 gün önce hayvan araştırma tesisinde karantinada olan dişi evcil domuzlardı (Sus scrofa domesticus).
- Kas içi atropin (0.04-0.08 mg / kg vücut ağırlığı), zolazepam (5 mg / kg vücut ağırlığı) ve tiletamin (5 mg / kg vücut ağırlığı) enjeksiyonu ile ön tedavi uygulayın. İntravenöz erişim sağlandıktan sonra (örneğin, kulak damarı), bir propofol enjeksiyonu (1.5 - 2.5 mg / kg vücut ağırlığı) ile anesteziyi indükleyin.
- Hayvan büyüklüğüne ve anatomisine bağlı olarak 8.0-8.5 mm'lik bir endotrakeal tüp ile entübasyon yapın. Elektrokardiyografinin izlenmesi, solunum gazlarının ve periferik oksijen satürasyonunun ölçülmesi ve non-invaziv kan basıncı ölçümünün yapılması.
- Donör karaciğer temini sırasında domuzlarda izofluran (% 0.8-1.5 vol) solunması ve intravenöz fentanil uygulaması (0.003-0.007 mg / kg vücut ağırlığı) yoluyla anesteziyi sürdürün. İşlem boyunca hacim kontrollü ventilasyon gerçekleştirin.
- Donör domuzun sırtüstü pozisyona yerleştirilmesinden ve uzuvların ameliyat masasının tabanına elastik bantlarla sabitlenmesinden sonra, cildi antiseptik ajanla, örneğin povidon-iyot veya izopropil alkolle ovalayın ve hayvanı steril örtülerle örtün.
- Ayak parmağı sıkışmasına karşı geri çekilme yanıtını kaybederek yeterli bir anestezi derinliğini onaylayın. Monopolar koter kullanarak ksifoid işlemden başlayarak orta hat laparotomi yapın. Bir abdominal retraktör yerleştirin ve bağırsağı donörün sağına doğru harekete geçirin.
- Splenokolik ligament, gastrosplenik ligament ve frenikosplenik ligamentin diseksiyonu ile splenektomi yapın. Dalak damarını ve dalak hilumunun yakınındaki dalak arterini Overholt kelepçesi ile kelepçeleyin ve damarları kestikten sonra ligatürleri (3-0 polifilament sütür) yerleştirin. Ek (daha küçük) damarları bipolar forseps veya ligasyon ile ayırın.
NOT: Donör karaciğer temini sırasında splenektomi zorunlu değildir, ancak perfüzyon sırasında ve sonrasında kanın dökülmesini azaltır. - Bağırsağı donörün sol tarafına doğru harekete geçirin ve makas ve bipolar koter kullanarak falsiform ligamenti ve üçgen bağları kesin.
- Karaciğerin yeterli diseksiyonundan sonra, inen aortun torasik segmentini bulmak için makas kullanarak diyaframın sol kısmını 5-10 cm'lik bir mesafeden kesin. Sıkmadan bir bağı (3-0 polifilament sütür) çevreleyin ve yerleştirin.
- Makas kullanarak diyaframın sağ kısmını 5-10 cm'lik bir mesafeden kesin ve suprahepatik vena kava inferioru tanımlayın.
- Bağırsağı donörün sol üst köşesine yerleştirin ve makas kullanarak periton 5-10 cm mesafeden transvers kesi ile retroperitoneal boşluğa girin.
- Abdominal aort ve inferior vena kavayı iliak bifurkasyonun hemen üzerine yerleştirin ve her iki damarı da yaklaşık 6 cm uzunluğunda ayırın. Abdominal aortun etrafına iki adet 3-0 polifilament ligatür yerleştirin: biri iliak bifurkasyonun kraniyal ve diğeri sıkmadan kraniyal olarak yaklaşık 3 cm. İntrahepatik vena kava inferior etrafına sıkmadan başka bir bağ yerleştirin.
- İntravenöz olarak heparin enjekte edilir (25.000 I.E.). Uygun bir kanül seçin ve damlama hattını soğutulmuş koruma çözeltisi ile havalandırın.
- Abdominal aort çevresinde kaudal olarak yerleştirilmiş ilk ligatürü sıkın. İkinci ligatürün abdominal aortunu kraniyal olarak tıkadıktan sonra (manuel olarak veya atravmatik bir vasküler kelepçe yerleştirerek), makas kullanarak her iki ligatür arasında enine bir kesi yapın.
- Kanülü kesiye yerleştirin ve kalan ligatür ile sabitleyin. Suprahepatik inferior vena kavayı makas kullanarak kraniyal olarak (sağ atriyuma yakın) ayırın.
- Yaklaşık 1.500-2.000 mL'lik kan kaybından sonra, ligatürü bağlayarak inen aortun torasik segmentini çapraz kelepçeleyin ve antegrad perfüzyona başlayın.
NOT: Engraftman sırasında veya normotermik makine perfüzyonu sırasında olası kan (transfüzyon) ihtiyacı için, sitrat bazlı antikoagülan içeren bir kap kullanılarak tam kan (yaklaşık 1.500 mL) toplanabilir. - İnfrahepatik vena kava inferior etrafına yerleştirilen bağı sıkın, damarı ligatür kraniyal olarak kesin ve cerrahi bir aspiratör yerleştirin. Ölümcül bir pentobarbital sodyum dozu (5.000 mg) enjekte edin. Ezilmiş steril buzu, karaciğer dokusundan ödün vermeden göğüs ve karın boşluğuna yerleştirin.
- Yaklaşık 10-15 dakikalık bir süre boyunca 3.500 mL koruma çözeltisi ile perfüzyondan sonra, kesilmiş suprahepatik vena kava inferioru kesin. İnfrahepatik vena kava inferiorunu sol böbrek damarı seviyesinde ayırın.
- Safra dökülmesini önlemek için pankreas dokusunun safra kanalı kraniyalini iki ligatür (3-0 polifilament) arasında ayırın. Pankreasın portal ven kraniyalini kesin.
- Künt preparattan sonra çölyak arterini bulun ve abdominal aortu dorsal olarak takip edin. Daha sonraki engraftment için bir yama oluşturmak üzere ilgili aort segmentini tüketin.
- Suprahepatik vena kava inferior etrafındaki diyaframı tüketin ve makas kullanarak kalan yapışıklıkları kesin. Karaciğeri çıkarın.
- Bir kolesistektomi yapın veya kistik kanalın etrafındaki bir ligattürü sıkın ve ortak safra kanalını en az 20 mL koruma çözeltisi ile yıkayın. Perfüzyon kanülünü portal venin içine yerleştirin ve grefti 500 mL'lik bir koruma solüsyonu ile yıkayın. Grefti buz üzerine yerleştirilmiş steril bir kaba yerleştirin.
NOT: Bilimsel amaca bağlı olarak, organ hemen engraftment için hazırlanabilir veya arka masa hazırlığına ve engraftmentine başlamadan önce belirsiz bir süre (bu protokolde 20 saat) buz üzerinde tutulabilir.
2. Karaciğerin arka masa hazırlığı
- Aort segmentinden başlayan lenfatik dokuyu çıkarın ve böylece arteriyel yan dalları ve lenfatik damarları klipsler, ligatürler (4-0 polifilament) veya dikişlerle (5-0 monofilament) tanımlayın ve tıkayın; Şekil 1A). Aynı şekilde, portal ven çevresindeki lenfatik dokuyu çıkarın ve yan dalları dikişlerle (5-0 monofilament) tıkayın.
- Suprahepatik vena kava inferiorunu tanımlayın ve çevreleyen diyafragma dokusunu çıkardıktan sonra her iki diyafragmatik venin (5-0 monofilament) etrafına dikişler yerleştirin. Kalan sızıntıları tespit etmek için tüm kapları soğuk salin veya koruma solüsyonu ile yıkayın. Damarların kısaltılmasını ve aort yamasının hazırlanmasını, bireysel anatomik koşulları dikkate almak için sadece engraftasyon üzerine yapın.
3. Alıcı hepatektomi, donör karaciğer engraftmanı ve perioperatif yönetim
NOT: Karaciğer alıcıları olarak, 4-5 aylık ve ortalama vücut ağırlığı yaklaşık 50 kg olan dişi evcil domuzlar (Sus scrofa domesticus) kullanılmıştır. Karaciğer bağışçılarına benzer şekilde, alıcılar nakilden en az 10 gün önce hayvan araştırma tesisinde karantinada kalmışlardı.
- Anestezi ve perioperatif yönetim
- Kas içi atropin (0.04-0.08 mg / kg vücut ağırlığı), zolazepam (5 mg / kg vücut ağırlığı) ve tiletamin (5 mg / kg vücut ağırlığı) enjeksiyonu ile ön tedavi uygulayın. İntravenöz erişim (örneğin, kulak damarı) oluşturduktan sonra, bir propofol enjeksiyonu (1.5-2.5 mg / kg vücut ağırlığı) ile anesteziyi indükleyin.
- Hayvan büyüklüğüne ve anatomisine bağlı olarak 8.0-8.5 mm'lik bir endotrakeal tüp ile entübasyon yapın. Elektrokardiyografinin izlenmesi, solunum gazlarının ve periferik oksijen satürasyonunun ölçülmesi ve non-invaziv kan basıncı ölçümünün yapılması. Kronik bir model durumunda, cerrahi müdahaleden sonra kuruluğu önlemek için göz merhemi uygulayın.
- Alıcı hayvanı sırtüstü pozisyonda bir ısıtma tabanına yerleştirin ve uzuvları ameliyat masasının tabanına elastik bantlarla sabitleyin.
- Genişletilmiş izleme için, ultrason rehberliğinde, iç juguler ven içine üç lümenli bir merkezi venöz kateter ve büyük delikli bir venöz kateter (7 Fr.) ve hacim tedavisi için büyük delikli bir venöz kateter (7 Fr.) yerleştirin. Ek olarak, invaziv kan basıncı ölçümü için ultrason kontrolü altında internal karotis / servikal artere bir arteriyel kateter yerleştirin (Şekil 1B).
- İzofluran (% 0.8-1.5 vol) solunması ve intravenöz fentanil uygulaması (0.003-0.007 mg / kg vücut ağırlığı) yoluyla organ alımı sırasında anesteziyi sürdürün. İşlem boyunca hacim kontrollü ventilasyon gerçekleştirin. Perioperatif antibiyoz için 2.000 mg sultamisilin ve intravenöz olarak 250 mg metilprednizolon uygulayın.
- Hedef ortalama arteriyel basıncı 60 mmHg'ye ulaşmak için norepinefrin gibi bir vazopressörü intravenöz olarak uygulayın. Ek olarak, gerekirse Ringer'ın laktat çözeltisi gibi kristalloid çözeltileri veya sıvı jelatinleri gibi kolloid çözeltileri uygulayın.
- Her 30 dakikada bir elde edilen kan gazı analizlerine göre kalsiyum glukonat (% 10) ve sodyum bikarbonat (% 8.4), glikoz (% 40) veya potasyum klorür (% 7.45) intravenöz olarak uygulayın.
- Alıcı hepatektomi
- Cildi antiseptik ajanla, örneğin povidon-iyot veya izopropil alkolle ovalayın ve hayvanı steril örtülerle örtün.
- Ayak parmağı sıkışmasına karşı geri çekilme yanıtını kaybederek yeterli bir anestezi derinliğini onaylayın. Monopolar koter kullanarak ksifoid işlemden başlayarak orta hat laparotomi yapın. Bir abdominal retraktör yerleştirin ve bağırsağı donörün soluna doğru harekete geçirin. Bağırsağı nemlendirilmiş bir bezle örtün.
- İntraoperatif volüm yönetiminin optimizasyonu için bir suprapubik üriner kateter yerleştirin.
- Makas ve bipolar koter kullanarak falsiform ligamenti ve üçgen bağları ayırın. Karaciğerin yeterli diseksiyonundan sonra, karaciğer parankimine yakın hem suprahepatik hem de infrahepatik vena kava inferiorunu çevreleyin.
- İki ligatür (3-0 polifilament) arasındaki kistik kanalın birleşme noktasının altındaki ortak safra kanalını disseke edin ve ayırın.
- Hepatoduodenal ligamenti kaplayan yüzeysel periton tabakasını kesin ve karaciğer parankimine girmeden kısa bir süre önce hepatik arterleri tanımlayın. Bipolar koter veya klipslerin, ligatürlerin veya dikişlerin yerleştirilmesi kullanılarak diseksiyon.
- Abdominal aortu sağ ve sol diyafragma kaslarının orta hattında (avasküler tabaka) kesi ile diseke edin. Çevreleyen dokunun çıkarılmasıyla aort anastomozu için aortu hazırlayın.
NOT: Bu adım sadece aort anastomozu yapılırsa gereklidir. Aksi takdirde, donör ve alıcı hepatik arterler arasında geleneksel bir uçtan uca anastomoza hazırlanmak için hepatik arteri / hiler bölgeyi daha da diseke edin. - Portal ven üzerine atravmatik bir vasküler kelepçe yerleştirerek alıcı hepatektomi yapın, ardından suprahepatik vena kava inferior (karaciğeri kaudal olarak geri çekerken çevreleyen diyafram dahil) ve infrahepatik vena kava inferior üzerine atravmatik vasküler kelepçeler yerleştirin.
- Karaciğer parankimine yakın üç damarı da kesin. Alıcı karaciğeri karın boşluğundan çıkarın.
NOT: Damarların kenetlenmesi anhepatik fazın başlangıcını işaret eder. Anhepatik faz sırasında, domuzlar hemodinamik olarak kararsızdır ve ilgili miktarlarda vazopressör/katekolamin gerektirir. Anestezi uzmanı norepinefrin ve epinefrin uygulamak için hazırlanmalıdır. Karaciğerin reperfüzyonuna kadar fazı mümkün olduğunca kısa tutun. Anestezi uzmanı ile iyi iletişim kurun.
- Donör karaciğer engraftmanı
- Donör karaciğerini karın boşluğuna yerleştirin. Donör ve/veya alıcı suprahepatik vena kavayı yeterli uzunluktan daha düşük bir uzunlukta kısaltırken, anastomozda kıvrılmayı veya çok fazla gerginliği önleyin.
- Donör ve alıcı suprahepatik vena kava inferiorunun sağ köşesini uyarlayan bir destek ipliği (5-0 monofilament) olarak tek bir dikiş yerleştirin. Anastomozun dorsal tarafını damarın sol köşesinden çalışan bir dikişle (5-0 monofilament, çift kollu) başlatın.
- Sağ köşeye ulaşırken, destek ipliğini çıkarın, akan sütürü bir kelepçe ile sabitleyin ve yine damar (lar) ın sol köşesinden başlayarak anastomozun ventral tarafı ile devam edin. Darlığı önlemek için damar çapını daraltmadan dikişi birden fazla düğümle sıkın.
- Donör ve/veya alıcı portal venini yeterli uzunlukta kısaltırken anastomozda kıvrılmayı veya çok fazla gerginliği önleyin.
- Donör ve alıcı portal venin vasküler anastomozunu, 6-0 monofilament, çift kollu bir sütür kullanarak 3.3.2-3.3 adımlarına benzer şekilde gerçekleştirin.
- Vasküler kelepçeyi çıkararak, alıcı portal veni tıkayarak porto-venöz reperfüzyonu gerçekleştirin ve yaklaşık 200-400 mL kan boşalttıktan sonra donör infrahepatik vena kava inferiorunu vasküler bir kelepçe ile tıkayın. Alıcı suprahepatik vena kava inferioru tıkayan vasküler kelepçeyi yavaşça çıkarın ve aktif kanamayı arayın.
NOT: Her iki kelepçenin çıkarılması anhepatik fazın sonunu işaret eder. Gerekli katekolamin miktarı kısa bir süre sonra önemli ölçüde azalmalıdır. - Donör ve/veya alıcı infrahepatik vena kava inferiorunu kısaltın. Donör ve alıcı infrahepatik vena kava inferiorunun vasküler anastomozunu, 5-0 monofilament, çift kollu bir sütür kullanarak 3.3.2-3.3.3 adımlarına benzer şekilde gerçekleştirin. Donör ve alıcı infrahepatik vena kava inferioru tıkayan kelepçeleri çıkarın.
- Makas kullanarak, anatomik koşullara bağlı olarak yaklaşık 1-1.5 cm çapında bir eliptik aort yaması (Havuç yaması) hazırlayın. Abdominal aortu atravmatik bir Cooley vasküler kelepçesi ile kelepçeleyin ve neşter kullanarak bir kesi yapın. Yamaya uyacak şekilde makas kullanarak insizyonu büyütün.
- Aort anastomozuna, insizyonun/yamanın kraniyal köşesinde bir koşu sütürü (6-0 monofilament, çift kollu) ile başlayın. Kaudal köşeye ulaşırken, koşu dikişini bir kelepçe ile sabitleyin ve kraniyal köşeden başlayarak anastomozu tekrar tamamlayın. Dikişi birden fazla düğümle sıkın ve vasküler kelepçeyi yavaşça çıkarın.
NOT: Abdominal aortun kelepçelenmesi, domuzun kan basıncını önemli ölçüde etkileyecektir. Anestezi uzmanı ile iyi iletişim kurun. - Arteriyel anastomozun etrafına hemostatik bir gazlı bez yerleştirin. Ortak safra kanalına bir kateter yerleştirin ve tek bir ligatür ile sabitleyin. Kateterin çapını tıkamadığınızdan emin olun.
- Kas fasyasını ve cildi akan bir dikişle uyarlayarak karnı geçici olarak kapatın ve termal kaybı önlemek için karnı sarılma filmi ve / veya perdelerle örtün.
NOT: Bilimsel hedefler kronik bir model gerektiriyorsa, donör ve alıcı safra kanalı arasında uçtan uca bir anastomoz yapın, karnı periton ve kas fasyası için ayrı koşu dikişleriyle kapatın ve cildi tek dikişlerle kapatın. - Takip sonunda, intraoperatif ötenazi için ölümcül bir doz 5.000 mg pentobarbital sodyum enjekte edin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Bu protokolde sunulan teknik, işlem boyunca hemodinamik stabilite ve hayvan sağkalımının yanı sıra postoperatif seyirde greft fonksiyonu açısından güvenilir ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlamıştır.
Son zamanlarda, iskemi-reperfüzyon hasarının incelenmesi ve postoperatif dönemde zararlı etkileri azaltan terapötik müdahalelerin incelenmesi için bu modeli uyguladık. Geri alma ve 20 saat statik soğuk hava deposu üzerine, karaciğer greftleri (ortalama ağırlığı 983.38 g olan) tarif edilen şekilde implante edildi. Deneyler portal-venöz reperfüzyon ve kan ve safra ile karaciğer ve safra kanalı dokusunun belirli aralıklarla örneklenmesinden 6 saat sonra sonlandırıldı. Tüm alıcılar engraftmandan ve ardından gelen 6 saatlik takipten genel anestezi altında ötenaziye kadar sağ kurtuldular.
Bu protokolün odak noktası, veno-venöz bypass kullanılmadan domuz ortopik karaciğer nakli modelinin fizibilitesinde yattığından, burada sunulan sonuçlar intraoperatif vital parametreler ve vazopresörlerin uygulanması (Şekil 2) ile sınırlıdır. aspartat transaminaz (AST), alanin transaminaz (ALT) ve glutamat dehidrogenaz (GLDH), safra üretimi (Tablo 1) ve daha önce domuz karaciğeri rezeksiyonu modelinde açıklandığı gibi karaciğer maksimum fonksiyon kapasitesi (LiMAx) testi (Şekil 3)26. LiMAx testi, karaciğere özgü CYP1A2 sistemi tarafından intravenöz olarak enjekte edilen 13C-metasetinin gerçek zamanlı metabolizmasına dayanmaktadır. Enjeksiyondan önce ve sonra, solunan havadaki 13CO2 12CO2 oranı, bireysel hepatik fonksiyon27'yi ölçmek için belirlenir.
Beklendiği gibi, alıcılar ortalama arteriyel basıncı (MAD) ≥60 mmHg'de stabilize etmek için anhepatik fazdan hemen önce ve boyunca artan norepinefrin konsantrasyonlarına ihtiyaç duymuşlardır. Düşük epinefrin konsantrasyonları, bu hassas zaman diliminde kalp debisini ek olarak arttırmak için aynı anda kullanılmıştır. Portal-venöz reperfüzyon üzerine, vazopressörlere olan ihtiyaç hızla azaldı ve hatta aort anastomozunun tamamlanması için abdominal aortun geçici olarak sıkıştırılması sırasında daha da azaldı. Engraftmadan sonra, MAD ve gerekli dozlarda vazopressörler stabil kaldı.
Deri insizyonundan tüm vasküler anastomoz ve reperfüzyonun tamamlanmasına kadar geçen süre olarak tanımlanan ortalama ameliyat süresi, ortalama anhepatik faz 27.13 dakika olmak üzere 103.50 dakika idi. Not olarak, sadece iki alıcı 30 dakikadan fazla bir anhepatik faz geçirdi. Tüm alıcılar portal-venöz reperfüzyondan 4 saat sonra laktat serum konsantrasyonlarının azaldığını gösterdi ve portal-venöz reperfüzyondan 6 saat sonra elde edilen LiMAx değerleri, bir alıcı hariç tüm alıcılarda organ alımından önce karaciğer donörlerinde ölçülen değerlerle karşılaştırılabilir (34 dakikalık anhepatik faz).
Şekil 1: Greft ve alıcı hazırlığı. (A) Şekil, çölyak ekseninin ve aort segmentinin arka masa hazırlığını göstermektedir. (B) Bu şekil, alıcıyı, sol internal juguler vende merkezi venöz kateter (mavi) ve sağ internal karotis / servikal arterde bir arteriyel kateter (kırmızı) dahil olmak üzere genişletilmiş izleme ile sırtüstü pozisyonda göstermektedir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Engraftman sırasında gerekli olan ortalama arteriyel basınç ve vazopressör konsantrasyonları. Şekil, ölçülen ortalama arteriyel basıncı (mmHg cinsinden MAD) ve sekiz alıcının hepsinde prosedür boyunca tanımlanmış zaman periyotlarında norepinefrin ve epinefrin konsantrasyonlarını (μg / kg / s cinsinden) göstermektedir. Değerler SEM ± ortalama olarak sunulmaktadır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Karaciğer alımından önce donörlerden ve engraftmadan 6 saat sonra alıcılardan alınan karaciğer maksimum fonksiyon kapasitesi (LiMAx) testinin değerleri. Şekil, karaciğer tedarikinden önce donörlerden ve engraftmandan 6 saat sonra alıcılardan alınan karaciğer maksimum fonksiyon kapasitesi (LiMAx) testinden (ortalamanın ortalama ve standart hatası) kutu grafiği verilerini (ortalamanın ortalama ve standart hatası) göstermektedir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Deney | Greft ağırlığı | Alıcı ağırlığı | cesaret | Çalışma süresi | Anhepatik faz | Laktat (mmol/L) | Tepe AST | Tepe ALT | Tepe GLDH | Safra hacmi | ||
| Hayır. | (g) | (kg) | (%) | (dk) | (dk) | 2 saat | 4 saat | 6 saat | (U/L) | (U/L) | (U/L) | (mL) |
| 1 | 1082 | 48.8 | 2.22 | 115 | 25 | 5.8 | 4.7 | 3.7 | 677 | 122 | 39 | 48 |
| 2 | 946 | 51.4 | 1.84 | 125 | 34 | 6.6 | 5.9 | 5.2 | 1207 | 109 | 268 | 15 |
| 3 | 957 | 57.6 | 1.66 | 110 | 30 | 8.3 | 5.8 | 8.1 | 742 | 125 | 143 | 73 |
| 4 | 825 | 49.2 | 1.68 | 87 | 22 | 7.6 | 6.7 | 6.5 | 675 | 99 | 113 | 35 |
| 5 | 1045 | 53.4 | 1.96 | 101 | 25 | 7.9 | 6.8 | 5.6 | 919 | 86 | 129 | 25 |
| 6 | 924 | 45.2 | 2.04 | 105 | 32 | 6.7 | 4.6 | 3.7 | 414 | 90 | 114 | 75 |
| 7 | 785 | 48.2 | 1.63 | 95 | 24 | 6.8 | 4.8 | 4.1 | 557 | 70 | 110 | 1.5 |
| 8 | 1303 | 54.6 | 2.39 | 90 | 25 | 12.7 | 12.2 | 9.8 | 1011 | 87 | 94 | 10 |
| DEMEK | 983.38 | 51.05 | 1.93 | 103.50 | 27.13 | 7.80 | 6.44 | 5.84 | 775.25 | 98.50 | 126.25 | 35.31 |
| SEM | 57.59 | 1.41 | 0.10 | 4.57 | 1.52 | 0.76 | 0.88 | 0.78 | 90.79 | 6.73 | 23.00 | 9.87 |
Tablo 1: Perioperatif greft ve alıcı değişkenleri. Tablo, greft ve alıcı ağırlığının yanı sıra greft-alıcı ağırlık oranı (GRWR) ve operasyonun uzunluğunu (tüm vasküler anastomoz ve reperfüzyonun tamamlanmasına kadar cilt insizyonu) ve anhepatik fazı özetlemektedir. Gerçekleştirilen sekiz transplantasyonun her biri için konvansiyonel laboratuvar parametreleri, yani serum laktat, aspartat transaminaz (AST), alanin transaminaz (ALT) ve glutamat dehidrogenaz (GLDH) konsantrasyonları ve safra üretimi gibi greft fonksiyonunu gösteren değişkenler sağlanmaktadır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Makine perfüzyonunun tanıtılması gibi son teknik gelişmeler, karaciğer nakli alanında devrim yaratma potansiyeline sahiptir. Greft yenileme veya modifikasyon kavramlarını klinik ortamlara çevirmek için, büyük hayvanlarda tekrarlanabilir nakil modelleri kaçınılmazdır.
Domuz ortotopik karaciğer transplantasyonunun ilk tanıtımından sonra, birkaç yazar son elli yılda bu tekniklerin geliştirilmesi üzerinde çalışmıştır. Bildirilen cerrahi yaklaşımlardaki farklılıklar genellikle minördür ve vasküler ve biliyer anastomozlar, anestezi ve perioperatif tedavi ile ilgilidir. Bununla birlikte, veno-venöz bypass kullanımının hala yaygın olduğu, ancak isteğe bağlı 28 olduğu klinik karaciğer transplantasyonundaki mevcut durumun aksine, domuzlarda anhepatik faz sırasında aktif veya pasif bir porto-kaval bypass, bağırsak tıkanıklığını ve dolayısıyla hemodinamik instabilite ve perioperatif mortalite ile birlikte intestinal iskemiyi azaltmak için bir gereklilik olarak kabul edilmektedir. Esmaeilzadeh ve ark.25 tarafından iyi hazırlanmış bir çalışmada açıklandığı gibi.
Kateterler, pompa cihazı, ek antikoagülasyon ihtiyacı ve hava embolisi veya kanama gibi potansiyel komplikasyonlar gibi veno-venöz baypasın içerdiği ek maliyetler ve teknik zorlukların yanı sıra ve seçilen yaklaşıma bağlı olarak, eşzamanlı splenektomi ihtiyacı, grupları veno-venöz bypass olmadan modifiye teknikleri tanımlamaya teşvik etmiştir25,29, 30.
Torres ve ark.31, pasif porto-kaval şantı olan alıcılara kıyasla veno-venöz bypass kullanılmadan engraftasyon uygulanan hayvanlarda ciddi hemodinamik instabilite gözlemlemiş ve bu nedenle, bu hayvanlarda süfraklazyak aortun geçici olarak kelepçelenmesini gerçekleştirmiştir; bu, domuz karaciğeri oto-/allo-transplantasyon modellerinde başkaları tarafından da tanımlanmıştır23,31,32 . Bununla birlikte, alıcı aortun çapraz kelepçelenmesi yoluyla sıcak iskeminin indüklenmesi, reperfüzyon üzerine pro-inflamatuar moleküllerin ve doku hasarının ilgili salınımı riskini taşır ve bu nedenle, özellikle iskemi-reperfüzyon hasarını değerlendirirken, güvenilir bilimsel sonuçlar üretmek için ne pahasına olursa olsun kaçınılmalıdır. Ayrıca, bu yaklaşım insanlarda klinik uygulamaya benzemez, bu nedenle bu modellerde elde edilen sonuçların çevirisini sınırlar.
Bu tür zararlı destekleyici önlemlerden kaçınmak için, iki noktanın çok önemli olduğuna inanıyoruz. (1) Anhepatik faz, Battersby ve ark.33 tarafından domuz karaciğeri transplantasyonunun erken evrelerinde daha önce gösterildiği gibi, mutlak minimumda, yani 30 dakikanın altında tutulmalıdır. Koşu dikişlerinin (çift kollu) ve maksimum bir destek ipliğinin hem suprahepatik vena kava inferior hem de portal ven için basit ve güvenli bir anastomoz oluşturmak için yeterli olduğuna inanıyoruz. Açıkçası, portal-venöz reperfüzyon, infrahepatik vena kava inferioru anastomoz etmeden önce başlamalıdır. (2) Anestezik yönetim, ideal olarak karaciğer cerrahisi veya insan hastalarda transplantasyona aşina olan deneyimli bir anestezi uzmanı tarafından yapılmalıdır34. Basitleştirilmiş bir cerrahi teknikle birlikte vazopresörler, yani norepinefrin ve epinefrin ile sofistike hacim yönetimi ve tedavisi, bu modelin başarılı bir şekilde uygulanmasının temelidir.
İlginçtir ki, sadece az sayıda cerrahi grup, veno-venöz bypass ve eşlik eden süfraselyak aort klempleme olmaksızın başarılı domuz ortopik karaciğer transplantasyonu hakkında veri sağlamıştır. Bildiğimiz kadarıyla Oike ve ark., Heuer ve ark. ve en son Fondevila ve ark., (umut verici) sonuçlarını bildiren tek gruplardı ve sağkalım oranları sırasıyla% 87,% 80 ve% 100,sırasıyla 35,36,37. Kohortumuzdaki medyan anhepatik süre 25 dakikaydı ve bu nedenle Heuer ve ark.36 tarafından sunulan verilerle aynıydı. Anhepatik faz sırasında, Oike ve ark.35, bu kohortta yapılan gözlemlere benzer şekilde, arteriyel kan basıncında% 50-60'lık bir azalma olduğunu bildirmiş ve MAD'de 60 mmHg'nin altında bir azalmayı önlemek için artan dozlarda vazopresörlere yol açmıştır. Heuer ve ark.36, yayınlarında katekolamin tedavisinin kullanımından bahsetmemiş, ancak hemodinamik stabiliteyi iyileştirmek için tam kan transfüzyonundan özel olarak bahsetmemişlerdir. İkincisi bu modelde gerekli değildi. Ortalama anhepatik süresi 20 dakikadan az olan Fondevila ve ark., yalnızca kristalloid çözeltilerin uygulanmasına güvenmiş ve engraftma sırasında vazoaktif maddeler uygulamamıştır37.
Not olarak, donörden alıcı hepatik arter19,22'ye uçtan uca anastomoz uygulayan son yayınların aksine, bu model, alıcının süpraselyak aortuna anastomoz edilen donör aortun bir Carrel yaması ile uçtan uca bir anastomoz içerir. Özellikle deneysel ortamlar için, uzatılmış donör kriterlerini karşılayan organların kullanılmasıyla, örneğin uzun süreli soğuk iskemik zaman, greftin arteriyel perfüzyonu ile ilgili herhangi bir sorunu dışlamak uygun olabilir. Bir Karel yamasının uygulanması, reperfüzyon sonrası sıklıkla gözlenen eşlik eden periferik vazospazmlar durumunda fonksiyonel olarak ilgili olabilecek arteriyel anastomoz darlığının önlenmesine yardımcı olacaktır. Bununla birlikte, bu yaklaşım, aortun daha ayrıntılı erişimi nedeniyle geleneksel uçtan uca anastomozdan daha fazla zaman alacaktır.
Temsili deneylerimiz hemen postoperatif faz ve iskemi-reperfüzyon hasarına odaklandığından, alıcılar anestezi altında tutuldu ve reperfüzyondan 6 saat sonra ötenazi yapıldı. Hayvan refahı açısından yararlı olmasına rağmen, bu, greft ve alıcı sağkalımı ile ilgili tekniğimizin doğrulanmasında önemli bir sınırlama oluşturmaktadır. Bununla birlikte, hayati parametreler, hemodinamik, laktat klirensi, safra üretimi ve özellikle takip boyunca gözlemlenen gerçek zamanlı karaciğere özgü CYP1A2 metabolizması (LiMAx testi) temelinde, modelimizin uzun vadeli uygulamasının, özellikle deneylerde kullanılan greftlerin 20 saat önceki engraftma için statik soğuk hava deposuna tabi tutulmasının mümkün olması gerektiğine inanıyoruz. karşılaştırılabilir nakil modellerinin başkaları tarafından başarılı bir şekilde uygulanmasının aksine,35, 36,37. Ayrıca, söz konusu önceki raporlar, Oike ve ark.35 tarafından yapılan çalışmada, ameliyat sonrası ilk günde pulmoner emboliden ölen bir alıcı hariç, perioperatif mortalitenin sadece ameliyat sırasında ve sonrasında 6 saate kadar gözlendiğini göstermiştir.
Bu çalışmada, engraftman sırasında veno-venöz bypass kullanılmadan domuz ortopik karaciğer transplantasyonuna basitleştirilmiş bir yaklaşımın, donör organın uzun süreli statik soğuk depolanmasından sonra bile önemli hemodinamik değişiklikler veya intraoperatif mortalite olmaksızın güvenli bir şekilde gerçekleştirilebileceğini ve daha uygun maliyetli olduğunu gösterdik. Böyle bir model, acil postoperatif seyir, iskemi-reperfüzyon hasarı, genişletilmiş kriterli donör organların yenilenmesi ve ilişkili immünolojik mekanizmalara odaklanan (cerrahi) çalışma grupları için özel ilgi çekici olmalıdır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.
Acknowledgments
Yazarlar Britta Trautewig, Corinna Löbbert, Astrid Dinkel ve Ingrid Meder'e gayretleri ve bağlılıkları için teşekkür eder. Ayrıca, yazarlar Tom Figiel'e resim malzemesini ürettiği için teşekkür eder.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Abdominal retractor | No Company Name available | No Catalog Number available | |
| Aortic clamp, straight | Firma Martin | No Catalog Number available | |
| Arterial Blood Sampler Aspirator (safePICOAspirator) 1.5 mL | Radiometer Medical ApS | 956-622 | |
| Atropine (Atropinsulfat 0.5 mg/1 mL) | B.Braun | 648037 | |
| Backhaus clamp | Bernshausen | BF432 | |
| Bipolar forceps, 23 cm | SUTTER | 780222 SG | |
| Bowl 5 L, 6 L, 9 L | Chiru-Instrumente | 35-114327 | |
| Braunol Braunoderm | B.Braun | 3881059 | |
| Bulldog clamp | Aesculap | No Catalog Number available | |
| Button canula | Krauth + Timmermann GmbH | 1464LL1B | |
| Calcium gluconate (2.25 mmol/10 mL (10%)) | B.Braun | 2353745 | |
| Cell Saver (Autotransfusion Reservoir) | Fresenius Kabi AG | 9108471 | |
| Central venous catheter 7Fr., 3 Lumina, 30 cm 0.81 mm | Arrow | AD-24703 | |
| Clamp | INOX | B-17845 / BH110 / B-481 | |
| Clamp | Aesculap | AN909R | |
| Clamp, 260 mm | Fehling Instruments GMbH &Co.KG | ZAU-2 | |
| Clip Forceps, medium | Ethicon | LC207 | |
| Clip forceps, small | Ethicon | LC107 | |
| CPDA-1 solution | Fresenius Kabi AG | 41SD09AA00 | |
| Custodiol (Histidin-Tryptophan-Ketogluterat-Solution) | Dr.Franz Köhler Chemie GmbH | 2125921 | |
| Dissecting scissors | LAWTON 05-0641 | No Catalog Number available | |
| Dissecting scissors, 180 mm | Metzenbaum | BC606R | |
| Endotracheal tube 8.0 mm | Covetrus | 800764 | |
| Epinephrine (Adrenalin 1:1000) | InfectoPharm | 9508734 | |
| Falcon Tubes 50ml | Greiner | 227 261 L | |
| Femoralis clamp | Ulrich | No Catalog Number available | |
| Fentanyl 0.1mg | PanPharma | 00483 | |
| Forceps, anatomical | Martin | 12-100-20 | |
| Forceps, anatomical, 250 mm | Aesculap | BD052R | |
| Forceps, anatomical, 250 mm | Aesculap | BD032R | |
| Forceps, anatomical, 250 mm | Aesculap | BD240R | |
| Forceps, surgical | Bernshausen | BD 671 | |
| Forceps, surgical | INOX | B-1357 | |
| G40 solution | Serag Wiessner | 10755AAF | |
| Gelafundin ISO solution 40 mg/mL | B. Braun | 210257641 | |
| Guidewire with marker | Arrow | 14F21E0236 | |
| Haemostatic gauze ("Tabotamp" 5 x 7.5 cm) | Ethicon | 474273 | |
| Heparin sodium 25,000IE | Ratiopharm | W08208A | |
| Hico-Aquatherm 60 | Hospitalwerk | No Catalog Number available | |
| Infusion Set Intrafix | B.Braun | 4062981 L | |
| Intrafix SafeSet 180 cm | B.Braun | 4063000 | |
| Introcan Safety, 18 G | B.Braun | 4251679-01 | |
| Isofluran CP | CP-Pharma | No Catalog Number available | |
| Large-bore venous catheter, 7Fr. | Edwards Lifesciences | I301F7 | |
| Ligaclip, medium | Ethicon | LT200 | |
| Ligaclip, small | Ethicon | LT100 | |
| Material scissors | Martin | 11-285-23 | |
| Methylprednisolone (Urbason solubile forte 250 mg) | Sanofi | 7823704 | |
| Monopolar ERBE ICC 300 | Fa. Erbe | No Catalog Number available | |
| NaCl solution (0.9%) | Baxter | 1533 | |
| Needle holder | Aesculap | BM36 | |
| Needle holder | Aesculap | BM035R | |
| Needle holder | Aesculap | BM 67 | |
| Neutral electrode | Erbe Elektromedizin GmbH Tübingen | 21191 - 060 | |
| Norepinephrine (Sinora) | Sintetica GmbH | 04150124745717 | |
| Omniflush Sterile Filed 10 mL | B.Braun | 3133335 | |
| Original Perfusorline 300 cm | B.Braun | 21E26E8SM3 | |
| Overhold clamp | INOX | BH 959 | |
| Overhold clamp | Ulrich | CL 2911 | |
| Pentobarbital sodium(Release 500 mg/mL) | WDT, Garbsen | 21217 | |
| Perfusers | B.Braun | 49-020-031 | |
| Perfusor Syringe 50 mL | B.Braun | 8728810F | |
| Petri dishes 92 x 17 mm | Nunc | 150350 | |
| Poole Suction Instrument Argyle flexibel | Covidien, Mansfield USA | 20C150FHX | |
| Potassium chloride (7.45%) | B.Braun | 4030539078276 | |
| Pressure measurement set | Codan pvb Medical GmbH | 957179 | |
| Propofol (1%) | CP-Pharma | No Catalog Number available | |
| S-Monovette 2.6 mL K3E | Sarstedt | 04.1901 | |
| S-Monovette 2.9 mL 9NC | Sarstedt | 04.1902 | |
| S-Monovette 7.5 mL Z-Gel | Sarstedt | 11602 | |
| Sartinski clamp | Aesculap | No Catalog Number available | |
| Scalpel No.11 | Feather Safety Razor Co.LTD | 02.001.40.011 | |
| Scissors | INOX | BC 746 | |
| Seldinger Arterial catheter | Arrow | SAC-00520 | |
| Sodium bicarbonate (8.4%) | B.Braun | 212768082 | |
| Sterilization Set ("ProSet Preparation Kit CVC") | B.Braun | 4899719 | |
| Sterofundin ISO solution | B.Braun | No Catalog Number available | |
| Suction | Dahlhausen | 07.068.25.301 | |
| Suction Aesculap Securat 80 | Aesculap | No Catalog Number available | |
| Suction catheter | ConvaTec | 5365049 | |
| Sultamicillin (Unacid: 2000 mg Ampicillin/1000 mg Sulbactam) | Pfizer | DL253102 | |
| Suprapubic urinary catheter, "bronchialis", 50 cm | ConvaTec | UK 1F02772 | |
| Suprasorb ("Toptex lite RK") | Lohmann & Rauscher | 31654 | |
| Suture Vicryl 3-0 | Ethicon | VCP 1218 H | |
| Suture Vicryl 4-0 | Ethicon | V392H | |
| Suture, Prolene 4-0 | Ethicon | 7588 H | |
| Suture, Prolene 5-0, double armed | Ethicon | 8890 H | |
| Suture, Prolene 5-0, single armed | Ethicon | 8720 H | |
| Suture, Prolene 6-0, double armed | Ethicon | 7230 H | |
| Suture, Prolene 6-0, single armed | Ethicon | EH 7406 H | |
| Suture, Prolene: blau 3-0 | Ethicon | EH 7499H | |
| Suture, Safil 2/0 | Aesculap | C 1038446 | |
| Suture, Terylene 0 | Serag Wiessner | 353784 | |
| Syringe 2 mL, 5 mL, 10 mL, 20 mL | B.Braun | 4606027V | |
| TransferSet "1D/X-double" steril 330 cm | Fresenius Kabi AG | 2877101 | |
| Ultrasound Butterfly IQ+ | Butterfly Network Inc. | 850-20014 | |
| Ventilator "Oxylog Dräger Fl" | Dräger Medical AG | No Catalog Number available | |
| Yankauer Suction | Medline | RA19GMD | |
| Zoletil 100 mg/mL (50 mg Zolazepam, 50 mg tiletamin) | Virbac | 794-861794861 |
References
- Zarrinpar, A., Busuttil, R. W. Liver transplantation: Past, present and future. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology. 10 (7), 434-440 (2013).
- Song, A. T., et al. Liver transplantation: Fifty years of experience. World Journal of Gastroenterology. 20 (18), 5363-5374 (2014).
- Jakubauskas, M., et al. Machine perfusion in liver transplantation: A systematic review and meta-analysis. Visceral Medicine. , (2021).
- Serifis, N., et al. Machine perfusion of the liver: A review of clinical trials. Frontiers in Surgery. 8, 625394 (2021).
- Ceresa, C. D. L., Nasralla, D., Pollok, J. -M., Friend, P. J. Machine perfusion of the liver: Applications in transplantation and beyond. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology. 19 (3), 199-209 (2022).
- Schlegel, A., Muller, X., Dutkowski, P. Machine perfusion strategies in liver transplantation. Hepatobiliary Surgery and Nutrition. 8 (5), 490-501 (2019).
- Wenzel, N., Blasczyk, R., Figueiredo, C. Animal models in allogenic solid organ transplantation. Transplantology. 2 (4), 412-424 (2021).
- Kamada, N., Calne, R. Y. A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat. Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of Visualized Experiments. (65), e4143 (2012).
- Yang, L., et al. A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction. Journal of Visualized Experiments. (133), e56933 (2018).
- Chen, X. -C., et al. Reduced complications after arterial reconnection in a rat model of orthotopic liver transplantation. Journal of Visualized Experiments. (165), e60628 (2020).
- Qian, S. G., Fung, J. J., Demetris, A. V., Ildstad, S. T., Starzl, T. E. Orthotopic liver transplantation in the mouse. Transplantation. 52 (3), 562-564 (1991).
- Li, X., Wang, Y., Yang, H., Dai, Y. Liver and hepatocyte transplantation: What can pigs contribute. Frontiers in Immunology. 12, 802692 (2022).
- Reardon, S. First pig-to-human heart transplant: what can scientists learn. Nature. 601 (7893), 305-306 (2022).
- Garnier, H., et al. Liver transplantation in the pig: Surgical approach. Comptes Rendus Hebdomadaires des Seances de l'Academie des Sciences. Serie d: Sciences Naturelles. 260 (21), 5621-5623 (1965).
- Calne, R. Y., et al. Observations of orthotopic liver transplantation in the pig. British Medical Journal. 2 (5550), 478-480 (1967).
- Chalstrey, L. J., et al. Technique of orthotopic liver transplantation in the pig. The British Journal of Surgery. 58 (8), 585-588 (1971).
- Filipponi, F., Falcini, F., Benassai, C., Martini, E. Orthotopic liver transplant in pigs: Several variations of the surgical technic. Il Giornale di Chirurgia. 10 (7-8), 374-378 (1989).
- Spetzler, V. N., et al. Technique of porcine liver procurement and orthotopic transplantation using an active porto-caval shunt. Journal of Visualized Experiments. (99), e52055 (2015).
- Oldhafer, K. J., Hauss, J., Gubernatis, G., Pichlmayr, R., Spiegel, H. U. Liver transplantation in pigs: A model for studying reperfusion injury. Journal of Investigative Surgery. 6 (5), 439-450 (1993).
- Oldhafer, K. J., et al. Analysis of liver hemodynamics in severe ischemia and reperfusion injury after liver transplantation. Zentralblatt fur Chirurgie. 119 (5), 317-321 (1994).
- Vogel, T., et al. Successful transplantation of porcine liver grafts following 48-hour normothermic preservation. PLoS One. 12 (11), 0188494 (2017).
- Leal, A. J., et al. A simplified experimental model of large-for-size liver transplantation in pigs. Clinics. 68 (8), 1152-1156 (2013).
- Schiefer, J., et al. Regulation of histamine and diamine oxidase in patients undergoing orthotopic liver transplantation. Scientific Reports. 10 (1), 822 (2020).
- Esmaeilzadeh, M., et al. Technical guidelines for porcine liver allo-transplantation: A review of literature. Annals of Transplantation. 17 (2), 101-110 (2012).
- Oldhafer, F., et al. Supportive hepatocyte transplantation after partial hepatectomy enhances liver regeneration in a preclinical pig model. European Surgical Research. 62 (4), 238-247 (2021).
- Stockmann, M., et al. The LiMAx test: A new liver function test for predicting postoperative outcome in liver surgery. HPB. 12 (2), 139-146 (2010).
- Lapisatepun, W., Lapisatepun, W., Agopian, V., Xia, V. W. Venovenous bypass during liver transplantation: A new look at an old technique. Transplantation Proceedings. 52 (3), 905-909 (2020).
- Falcini, F., et al. Veno-venous bypass in experimental liver transplantation: portal-jugular versus caval-portal-jugular. Il Giornale di Chirurgia. 11 (4), 206-210 (1990).
- Copca, N., et al. Experimental liver transplantation on pigs -- Technical considerations. Chirurgia. 108 (4), 542-546 (2013).
- Torres, O. J., et al. Hemodynamic alterations during orthotopic liver experimental transplantation in pigs. Acta Cirurgica Brasileria. 23 (2), 135-139 (2008).
- Canedo, B. F., et al. Liver autotransplantation in pigs without venovenous bypass: A simplified model using a supraceliac aorta cross-clamping maneuver. Annals of Transplantation. 20, 320-326 (2015).
- Battersby, C., Hickman, R., Saunders, S. J., Terblanche, J. Liver function in the pig. 1. The effects of 30 minutes' normothermic ischaemia. The British Journal of Surgery. 61 (1), 27-32 (1974).
- Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Frühauf, N. R., Kühne, C. A., Broelsch, C. E. General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs. Journal of Surgical Research. 130 (1), 73-79 (2006).
- Oike, F., et al. Simplified technique of orthotopic liver transplantation in pigs. Transplantation. 71 (2), 328-331 (2001).
- Heuer, M., et al. Liver transplantation in swine without venovenous bypass. European Surgical Research. 45 (1), 20-25 (2010).
- Fondevila, C., et al. Step-by-step guide for a simplified model of porcine orthotopic liver transplant. The Journal of Surgical Research. 167 (1), 39-45 (2011).
