A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Title
- 01:00Introduction
- 01:27Fixing and Dechorionating Embryos
- 03:10Permeabilizing the embryos
- 03:51Hybridization
- 05:37Antibody labeling
- 09:10Propidium iodide staining and detection
- 10:31Outcome and Results
- 11:41Conclusion
Hela montera in situ hybridisering är en av de mest använda teknikerna i utvecklingsbiologi. Här presenterar vi en högupplöst dubbel fluorescent in situ hybridisering protokollet för att analysera den exakta uttrycket mönster av en enda gen och för att bestämma överlappningen av uttrycket domäner två gener. Vi inkluderar en propidiumjodid kärnvapen mot-bets för att markera vävnad organisation.
Tags
ZebrafishWhole MountHigh-resolutionDouble FluorescentIn Situ HybridizationDevelopmental BiologyGene ExpressionGene OverlapAlkaline PhosphataseNBT/BCIPFast RedDigoxygeninFluorescein Labeled ProbesTyramide Signal Amplification (TSA)Nuclear StainsPropidium IodideFluorescence ImmunohistochemistryReactive Fluorescent SubstrateTyrosine ResiduesAntisense RiboprobeStaining PatternsLaser Scanning Confocal MicroscopyNascent TranscriptsChromosomal LociNuclear StainingCytoplasmic Staining
