A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Title
- 00:31Introduction
- 01:05Preparing the pPICZaA Construct
- 02:18Preparation of Electrocompetent Yeast Cells
- 04:04Transformation by Electroporation
- 06:06Protein Expression in Pichia pastoris
- 08:42Results of Recombinant Protein Expression
- 09:02Conclusion
הפרוטוקול מתאר ביטוי חלבון באמצעות שמרים methylotrophic<em> Pichia pastoris</em>. הכנת תאים שמרים electrocompetent, טרנספורמציה של וקטור עם הגן של עניין אל<em> פ ' pastoris</em> ו-DNA טיהור שמרים מבוצעות גם. ניתוח המערבי כתם וטיהור חלבונים בונים את הצעדים האחרונים בפרוטוקול זה ביטוי חלבון.
Tags
Recombinant ProteinsPichia PastorisProtein ExpressionMethylotrophic YeastExpression SystemPost-translational ModificationsProtein FoldingProteolytic ProcessingDisulfide Bond FormationGlycosylationMethanol MetabolismAlcohol Oxidase PromoterMethanol InductionSecretion Of Recombinant ProteinSignal SequenceHeterologous ProteinProtein PurificationVector
