心臓解剖:ゼブラフィッシュ心臓の発達を観察する方法

- ゼブラフィッシュの心臓は、4つのチャンバー、静脈内静脈、静脈、および心房、心室、球根動脈硬化症.胸管ひれを支える骨格系の一部であるオペルキュラムと胸部ガードルの間の腹側に前立たんで位置する。

目とエラの間に鉗子で魚の頭を保持します。 マイクロシザーを使用して、エラを横切り、前腹を横切り、最初の2つの切開部を垂直に接続します。鋭いツイーザーで胸ひれと下側の胸棒を取り除き、心臓を覆う膜である銀心膜を明らかにします。

次に、心房の下に鉗子を置き、心臓を体腔からすくい取り出し、心臓を鉗子で持ち、心臓の外に存在する不要な組織を別の鉗子を使って取り除きます。

- 個々の魚と後で分析するために、結果として得られた解剖された心臓を追跡できるように、各魚に数字と文字の組み合わせを割り当てます。すべての測定値を含むすべてのデータをスプレッドシートに入力し、これらのラベルに基づいて整理します。解剖の前に、追跡番号が割り当てられたPCRチューブストリップにラベルを付け、PBTまたはさらなる分析に適した他の溶液でチューブを充填します。ピンホルダーは、心臓を明らかにするために体から胸筋とひれを取り除きます。

- 解剖中の鉗子の一定の動きは、魚を動かすPBTの電流を引き起こす可能性があります。これは小さな魚にとって特に問題です。

-鉗子を使って心房の下から心臓を優しくすくい取り出す。魚に蛍光心臓マーカーが含まれている場合は、蛍光灯の蛍光スコープを使用し、蛍光による心臓の除去を確認する。

標準長の12ミリメートルより長い魚の場合、春取り扱いのマイクロシザーを使って、3つの切開を行い、まず、エラを横切りする。第二に、前腹で別の横断カットを行い、3つ目は、両方の横切り切れを結ぶ側側の矢状切りを行う。

この心膜組織を取り除いて、心臓が見えるようになる。心臓より上にある球根動脈に接続された動脈を切るミクロハサミを使って。 この動脈を切断したら、鉗子の先端をアトリウムの下に置き、鉗子を使って心臓を空洞からすくい取ります。心臓に付属する余分な組織がある場合は、後で取り除くことができるので、大丈夫です。

- 代替技術を使用すると心房の位置に注意してください。心臓に付属する余分な組織があれば、これは問題なく、後にクリアすることができます。

- 心臓が空洞から取り除かれたら、2つの鉗子を使用して心臓を保持し、余分な組織または1組の鉗子を取り除いて心臓を保持し、マイクロニードルを使用して余分な非心臓組織を取り除く。