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Protocolli di selezione mutagenesi e funzionale per l'evoluzione Regia di proteine ​​in E. coli</em
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli
DOI:

09:01 min

March 16, 2011

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:38Creation of a Mutant Library: Mutagenesis
  • 03:23Creation of a Mutant Library: Readout
  • 04:03Mutant Identification and Characterization: Construction of Gradient
  • 05:06Mutant Identification and Characterization: Stamp Transfer of Bacteria
  • 06:27Mutagenesis and Functional Selection Protocols: Representative Results
  • 08:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

Qui mostriamo un semplice protocollo per creare una libreria casuale mutante per una sequenza bersaglio determinato. Mostriamo come questo metodo, che viene eseguita in vivo in Escherichia coli, possono essere accoppiati con selezioni funzionali ad evolvere nuove attività enzimatiche.

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