Journal
/
Biology
/
Mutagenes och Funktionell Val Protokoll för riktad evolution av proteiner i E. coli</em
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Mutagenes och Funktionell Val Protokoll för riktad evolution av proteiner i E. coli</em

DOI:
10.3791/2505-v

•

09:01 min

•

March 16, 2011

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:38Creation of a Mutant Library: Mutagenesis
  • 03:23Creation of a Mutant Library: Readout
  • 04:03Mutant Identification and Characterization: Construction of Gradient
  • 05:06Mutant Identification and Characterization: Stamp Transfer of Bacteria
  • 06:27Mutagenesis and Functional Selection Protocols: Representative Results
  • 08:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här visar vi ett enkelt protokoll för att skapa en slumpmässig mutant bibliotek för ett givet mål sekvens. Vi visar hur denna metod, som sker in vivo i Escherichia coli, kan kopplas till funktionella val att utveckla nya enzymaktiviteten.

Tags

MutagenesisFunctional SelectionDirected EvolutionProteinsE. ColiMutant LibrariesColE1 PlasmidDNA Polymerase IMutator StrainSolid MediaMutation FrequencyLabelingPCRCloningSequence Space ExplorationBiochemical Activities

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Omvandling av Plasmid DNA i E. coli med metoden Heat Shock

Homemade Site Riktad mutagenes av Whole Plasmids

Kristalliserande Membrane proteiner för strukturbestämning med Lipidic Mesophases

Mutagenes och funktionsanalys av jonkanaler Uttryckt Heterologously i däggdjursceller

Undersöka Conformational Dynamics av ​​membranproteiner På plats Med Site riktad Fluorescens märkning

Användning av en robot för hög kapacitet Kristallisering av membranproteiner i lipidisk mesofaser

Hög genomströmning Kvantitativ Expression Screening och rening Tillämpat på rekombinant Disulfide rika Venom proteiner som produceras i<em> E. coli</em

Grönt fluorescerande protein-baserad expressions Screening av membranproteiner i<em> Escherichia coli</em

Funktionell beredning och Kanalaktivitets Mätningar av renat Vildtyps och Mutant CFTR Protein

Riktad evolution Method in<em> Saccharomyces cerevisiae</em>: Mutant bibliotek Skapande och screening

Read Article