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Bromodeoxyuridine (BrdU) Labeling und anschließende Fluorescence Activated Cell Sorting für Kultur-unabhängige Identifizierung von gelöstem organischem Kohlenstoff abbauenden Bakterioplankton
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Bromodeoxyuridine (BrdU) Labeling and Subsequent Fluorescence Activated Cell Sorting for Culture-independent Identification of Dissolved Organic Carbon-degrading Bacterioplankton
DOI:

12:46 min

September 10, 2011

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:12Water Sample Processing
  • 03:28Microcosm Establishment and Incubation
  • 05:13In situ Immunodetection for BrdU Incorporation and FACS
  • 08:43Filter PCR Amplification of 16S rRNA Genes
  • 10:42Representative Results
  • 12:05Conclusion

Summary

Automatic Translation

Environmental Bakterioplankton sind mit einem Modell des gelösten organischen Kohlenstoffs (DOC)-Verbindung und einer DNA Markierungsreagens, Bromdesoxyuridin (BrdU) inkubiert. Anschließend werden DOC-abbauenden Zellen aus dem Bulk-Community auf ihre erhöhte BrdU-Einbaus mittels Fluoreszenz-activated cell sorting (FACS) basiert getrennt. Diese Zellen werden dann durch nachfolgende molekulare Analysen identifiziert.

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