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Chapters
- 00:05Title
- 01:37Preparation of Cell Cytosol Containing Functional Glucocorticoid Receptor
- 03:04Immunoabsorption of GR from the Cytosol and Dissociation of hsp90
- 05:16Reconstitution of GR-hsp90 Heterocomplex using Molecular Chaperones, Cofactors, and ATP
- 06:17Analysis of Reconstituted Protein Complexes and Ligand Binding Activity
- 08:26Representative GR-hsp90 Heterocomplex Formation and Steroid Binding Activity
- 10:04Conclusion
Un<em> In vitro</emMétodo> para la preparación funcional del receptor de glucocorticoides (GR) • hsp90 complejos de proteínas de las proteínas purificadas y lisados celulares se describe. El método utiliza inmunoadsorción de GR recombinante seguido por la sal-stripping y la reconstitución de proteínas complejas. La importancia de los cofactores y las condiciones de amortiguación se discuten, como lo son las posibles aplicaciones del método.
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