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Monitoraggio Cell-autonome Ritmi orologio circadiano di espressione genica mediante bioluminescenza Reporter luciferasi
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Monitoring Cell-autonomous Circadian Clock Rhythms of Gene Expression Using Luciferase Bioluminescence Reporters
DOI:

10:38 min

September 27, 2012

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:01Construction of Lentiviral Luciferase Reporters
  • 02:28Production of Lentiviral Particles: Seed Cells (Day 1)
  • 03:05Transient Transfection: CaPO4/DNA Precipitation (Day 2)
  • 04:23Harvest Viral Particles (Days 3-4)
  • 05:02Infection of 3T3 Cells (Day 3 Onward)
  • 06:12Synchronization and Change to Recording Medium
  • 07:02Bioluminescence Recording of Reporter Cells
  • 07:26Data Analysis and Presentation
  • 08:12Results: Phase-specific Circadian Reporters
  • 09:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

Orologi circadiani funzionare all'interno di singole celle, cioè, sono cellule autonome. Qui, descriviamo i metodi per la generazione di cellule autonome modelli di orologio con tecniche non invasive, luciferasi a base di tecnologia in tempo reale bioluminescenza. Cellule Reporter fornire trattabili, sistemi modello per lo studio della biologia funzionale circadiano.

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