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1Greenebaum Cancer Center,University of Maryland School of Medicine, 2Program in Molecular Medicine,University of Maryland School of Medicine, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine, 4Department of Pharmacology & Experimental Therapeutics,University of Maryland School of Medicine, 5Department of Pathology and Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine
Chapters
- 00:05Title
- 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
- 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
- 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
- 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
- 06:22Conclusion
Desarrollamos una unión a ADN, ensayo basado en ELISA cuantitativo para medir las interacciones de los factores de transcripción con el ADN. Alta especificidad para la proteína RUNX2 se logró con un oligonucleótido de ADN consenso de reconocimiento y el anticuerpo monoclonal específico. Detección colorimétrica con una reacción anticuerpo-enzima-sustrato acoplado se monitorizó en tiempo real.
