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Un ensayo cuantitativo para estudiar proteínas: DNA Interacciones, reguladores Descubra transcripcional de la expresión génica, e identificar agentes antitumoral
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JoVE Journal Biology
A Quantitative Assay to Study Protein:DNA Interactions, Discover Transcriptional Regulators of Gene Expression, and Identify Novel Anti-tumor Agents
DOI:

06:43 min

August 31, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
  • 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
  • 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
  • 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
  • 06:22Conclusion

Summary

Automatic Translation

Desarrollamos una unión a ADN, ensayo basado en ELISA cuantitativo para medir las interacciones de los factores de transcripción con el ADN. Alta especificidad para la proteína RUNX2 se logró con un oligonucleótido de ADN consenso de reconocimiento y el anticuerpo monoclonal específico. Detección colorimétrica con una reacción anticuerpo-enzima-sustrato acoplado se monitorizó en tiempo real.

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