Journal
/
Biology
/
Incorporation spécifiques résidus de noncanonical acides aminés en protéines de modèle à l'aide d'un<em> Escherichia coli</em> Système de transcription-traduction libre Cell-
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Residue-specific Incorporation of Noncanonical Amino Acids into Model Proteins Using an Escherichia coli Cell-free Transcription-translation System
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Incorporation spécifiques résidus de noncanonical acides aminés en protéines de modèle à l'aide d'un<em> Escherichia coli</em> Système de transcription-traduction libre Cell-

DOI:
10.3791/54273-v

•

11:47 min

•

August 01, 2016

•

, , , , , ,
1Department of Experimental Physics,Saarland University, 2Institute of Chemistry,Technische Universität Berlin, 3School of Physics and Astronomy,University of Minnesota

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:41Amino Acid Solution Preparation
  • 03:23Cell-free Reactions for Residue-specific Incorporation of ncAAs
  • 05:06SDS-PAGE of Cell-free Reactions
  • 06:57His-tagged Model Protein Purification from the Cell-free Reactions
  • 08:48Buffer Exchange for HPLC-ESI Mass Spectroscopy
  • 10:03Results: Successful Incorporation of ncAA in Target Protein
  • 11:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

An easy-to-use, cell-free expression protocol for the residue-specific incorporation of noncanonical amino acid analogs into proteins, including downstream analysis, is presented for medical, pharmaceutic, structural and functional studies.

Tags

Keywords: Noncanonical Amino AcidsCell-free ExpressionProtein StructureResidue-specific IncorporationAmino Acid Master MixCAANcAACell-free Transcription-translation System

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/54273?article_type=v

Transformation d'ADN plasmidique dans E. coli en utilisant la méthode du choc thermique
check_url/54273?article_type=v

Les études génétiques des protéines humaines réparation de l'ADN utilisant de la levure comme système modèle
check_url/54273?article_type=v

Une étape métabolomique: glucides, acides organiques et aminés quantifiés dans une procédure unique
check_url/54273?article_type=v

Un test pour mesurer l'activité des Escherichia coli Inductible Lysine Decarboxyase
check_url/54273?article_type=v

Criblage à haut débit activité endoglucanase fongique dans les Escherichia coli</em
check_url/54273?article_type=v

Confirmation des voies métaboliques et la découverte par 13 C-étiquetage des acides aminés protéinogènes
check_url/54273?article_type=v

La cartographie des réseaux fonctionnels bactériens et voies de<em> Escherichia Coli</em> En utilisant des tableaux synthétiques génétiques
check_url/54273?article_type=v

Protocoles pour la mise en œuvre d'un<em> Escherichia coli</em> Sur la base du système d'expression cellulaire gratuit TX-TL pour la biologie synthétique
check_url/54273?article_type=v

Purification non chromatographique de polypeptides recombinants élastine et de leurs fusions avec des peptides et des protéines<em> Escherichia coli</em
check_url/54273?article_type=v

Green Fluorescent Protein base Expression dépistage des protéines membranaires dans<em> Escherichia coli</em

Read Article