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Ingegneria fattori artificiali per manipolare in modo specifico l'alternanza di splicing nelle cellule umane
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Engineering Artificial Factors to Specifically Manipulate Alternative Splicing in Human Cells
DOI:

10:06 min

April 26, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:51Construction of the PUF RNA-binding Domain Scaffold with Customized RNA Binding Specificity by Overlapping PCR
  • 02:05Transfection of Engineered Splicing Factors (ESFs) for Modulation of Exon Inclusion and Alternative Splice-site Use
  • 03:43Cell Harvest and Identification of Spliced Isoforms
  • 06:24Modulation of Endogenous Bcl-x Splicing and Apoptosis by ESFs
  • 08:23Results: Subcellular Localization of ESFs in Transfected HeLa Cells
  • 09:30Conclusion

Summary

Automatic Translation

Questa relazione descrive un metodo bioingegneria per progettare e costruire nuovi fattori artificiali splicing (ASF) che specificamente modulano la giunzione di geni bersaglio in cellule di mammifero. Questo metodo può essere ulteriormente ampliata per progettare vari fattori artificiali di manipolare altri aspetti del metabolismo dell'RNA.

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