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Structure-fonction des études chez la souris à l'aide de cellules souches embryonnaires recombinase médiation cassette d'échange
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange
DOI:

15:13 min

April 27, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11The RMCE Principle
  • 02:15Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells
  • 05:22Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells
  • 07:29Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning
  • 09:25RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies
  • 12:41Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Les protéines contiennent souvent plusieurs domaines qui peuvent exercer différentes fonctions cellulaires. knock-out gène (KO) ne considèrent pas cette diversité fonctionnelle. Nous rapportons ici un échange de cassette à médiation recombinaison (CREM) approche structure-fonction dans les cellules à base de souches embryonnaires KO qui permet la dissection moléculaire de différents domaines fonctionnels ou variants d'une protéine.

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