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Mit Hilfe eines Fluoreszenz-PCR-Kapillar-Gel-Elektrophorese-Technik CRISPR zum Genotyp / Cas9 vermittelte Knock-out Mutanten in einem Hochdurchsatz-Format
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JoVE Journal Genetics
Using a Fluorescent PCR-capillary Gel Electrophoresis Technique to Genotype CRISPR/Cas9-mediated Knockout Mutants in a High-throughput Format
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Mit Hilfe eines Fluoreszenz-PCR-Kapillar-Gel-Elektrophorese-Technik CRISPR zum Genotyp / Cas9 vermittelte Knock-out Mutanten in einem Hochdurchsatz-Format

DOI:
10.3791/55586-v

•

08:25 min

•

April 08, 2017

•

, , ,
1Cancer & Stem Cell Biology Programme,Duke-NUS Medical School

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:55Sample Preparation and Amplification of CRISPER/Cas9 Regions with Fluorescent PCR
  • 04:32Capillary Gel Electrophoresis and Electropherogram Analysis
  • 06:25Results: Genotyping HEPG2 Targeted with CRISPER/Cas9 Construct Against NAP1L1
  • 07:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Die Genotypisierung hier beschriebene Technik, die Paare fluoreszierende Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Gelelektrophorese Kapillare ermöglicht eine Hochdurchsatz-Genotypisierung von Nuklease-vermittelte knockout-Klone. Es umgeht die von anderen Genotypisierung Techniken konfrontiert Einschränkungen und kostengünstiger als Sequenzierungsverfahren ist.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Knockout MutantsGenotypingFluorescent PCRCapillary Gel ElectrophoresisHigh-throughputCell CultureCloningCell LysisPCR

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