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Sistema di integrazione bidirezionale retrovirale Metodo PCR e flusso di lavoro analitico dei dati quantitativi
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Bidirectional Retroviral Integration Site PCR Methodology and Quantitative Data Analysis Workflow
DOI:

12:53 min

June 14, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11LTR-specific Biotin-primer Extension
  • 02:53Rsal and CviQI Digestion and Blunt-ending
  • 04:12Straptavidin Bead Binding
  • 05:31Linker Ligation
  • 06:39Pre-amplification of Both Left and Right Junction DNA
  • 08:15Left- and Right-junction-specific Amplifications
  • 10:23Results: The IS Bidirectional Assay Improves Detection Rates and Sequence Quantification Accuracy
  • 12:09Conclusion

Summary

Automatic Translation

Questo manoscritto descrive la procedura sperimentale e l'analisi del software per un test di sito di integrazione bidirezionale che può contemporaneamente analizzare il DNA di giunzione vettoriale-host a monte ea valle. I prodotti bidirezionali di PCR possono essere usati per qualsiasi piattaforma di sequencing a valle. I dati risultanti sono utili per un confronto quantitativo e ad alto rendimento dei target integrati del DNA.

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