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Método de Implementação de Retroviral Bidirecional e Metodologia de PCR e Análise Quantitativa de Dados Workflow
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Bidirectional Retroviral Integration Site PCR Methodology and Quantitative Data Analysis Workflow
DOI:

12:53 min

June 14, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11LTR-specific Biotin-primer Extension
  • 02:53Rsal and CviQI Digestion and Blunt-ending
  • 04:12Straptavidin Bead Binding
  • 05:31Linker Ligation
  • 06:39Pre-amplification of Both Left and Right Junction DNA
  • 08:15Left- and Right-junction-specific Amplifications
  • 10:23Results: The IS Bidirectional Assay Improves Detection Rates and Sequence Quantification Accuracy
  • 12:09Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este manuscrito descreve o procedimento experimental e análise de software para um ensaio de site de integração bidirecional que pode simultaneamente analisar DNA de junção vetor-hospedeiro a montante e a jusante. Os produtos de PCR bidirecionais podem ser usados ​​para qualquer plataforma de seqüência a jusante. Os dados resultantes são úteis para uma comparação quantitativa de alto rendimento de alvos de DNA integrados.

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