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Célula única quantificação das taxas de degradação de proteínas por microscopia de fluorescência de lapso de tempo em cultura de células aderentes
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JoVE Journal Developmental Biology
Single-Cell Quantification of Protein Degradation Rates by Time-Lapse Fluorescence Microscopy in Adherent Cell Culture

Célula única quantificação das taxas de degradação de proteínas por microscopia de fluorescência de lapso de tempo em cultura de células aderentes

DOI:
10.3791/56604-v

•

12:06 min

•

February 04, 2018

•

,
1UPSUTER, Institute of Bioengineering (IBI), School of Life Sciences,École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:42Cell seeding and pulse labeling of the SNAP-tag
  • 04:15Time-lapse microscopy
  • 05:23Image processing and analysis
  • 07:55Results
  • 10:13Conclusions

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este protocolo descreve um método para determinar a proteína meia-vida em vida única células aderentes, usando pulso rotulagem e imagem latente de lapso de tempo de fluorescência de proteínas da fusão SNAP-marca.

Tags

Protein DegradationSingle-cellTime-lapse Fluorescence MicroscopyAdherent Cell CultureSNAP-tagProtein Half-lifeFluorescence ImagingProtein TurnoverHeterogeneityEndogenous Protein TaggingOverexpressionDNA Repair EnzymeBenzylguanineFluorescent DyeExponential DecayEmbryonic Stem CellsMonolayerCell-cell InteractionsN-cadherin

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