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Um método eficiente em Vitro transposição por um sistema de beleza dormindo Transcriptionally regulado empacotado em um vetor de Lentivirus defeituoso de integração
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An Efficient In Vitro Transposition Method by a Transcriptionally Regulated Sleeping Beauty System Packaged into an Integration Defective Lentiviral Vector

Um método eficiente em Vitro transposição por um sistema de beleza dormindo Transcriptionally regulado empacotado em um vetor de Lentivirus defeituoso de integração

DOI:
10.3791/56742-v

•

10:13 min

•

January 12, 2018

•

, ,
1Centre for Regenerative Medicine, Department of Life Sciences,University of Modena and Reggio Emilia

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:51Transduction of Human Primary Keratinocytes
  • 04:31Cytofluorimetric Analysis of Transduced Primary Keratinocytes
  • 06:24Quantitative RT-PCR (qRT-PCR)
  • 07:24Results: Sleeping Beauty System Achieves Stable Integration of a GOI in the Human Genome
  • 08:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este protocolo descreve um método para alcançar a integração estável de um gene de interesse no genoma humano pelo sistema transcriptionally regulado de Bela adormecida . Preparação da integração dos vetores de Lentivirus defeituosos, a transdução em vitro de células humanas e o ensaio molecular em células transduzidas são relatados.

Tags

Sleeping Beauty SystemIntegration Defective Lentiviral VectorGene TherapyPrimary CellsTranscriptionally RegulatedTransposition MethodIn VitroHyperactive SB100X TransposaseGene Of InterestTetracycline-regulatedPolybrene

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