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Une méthode de Transposition efficace In Vitro par un système de beauté dormir transcriptionnellement réglementé empaquetée dans un vecteur Lentiviral défectueux de l’intégration
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An Efficient In Vitro Transposition Method by a Transcriptionally Regulated Sleeping Beauty System Packaged into an Integration Defective Lentiviral Vector
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Une méthode de Transposition efficace In Vitro par un système de beauté dormir transcriptionnellement réglementé empaquetée dans un vecteur Lentiviral défectueux de l’intégration

DOI:
10.3791/56742-v

•

10:13 min

•

January 12, 2018

•

, ,
1Centre for Regenerative Medicine, Department of Life Sciences,University of Modena and Reggio Emilia

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:51Transduction of Human Primary Keratinocytes
  • 04:31Cytofluorimetric Analysis of Transduced Primary Keratinocytes
  • 06:24Quantitative RT-PCR (qRT-PCR)
  • 07:24Results: Sleeping Beauty System Achieves Stable Integration of a GOI in the Human Genome
  • 08:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ce protocole décrit une méthode pour réaliser l’intégration stable d’un gène d’intérêt dans le génome humain par le système transcriptionnellement réglementé de la Belle au bois dormant . Préparation de l’intégration des vecteurs LENTIVIRAUX défectueux, la transduction in vitro des cellules humaines et l’analyse moléculaire sur les cellules transduits sont signalés.

Tags

Sleeping Beauty SystemIntegration Defective Lentiviral VectorGene TherapyPrimary CellsTranscriptionally RegulatedTransposition MethodIn VitroHyperactive SB100X TransposaseGene Of InterestTetracycline-regulatedPolybrene

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