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Purificazione e la ricostituzione di TRPV1 per analisi spettroscopiche
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Purification and Reconstitution of TRPV1 for Spectroscopic Analysis
DOI:

11:53 min

July 03, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:54TRPV1 Mutagenesis
  • 02:19Generating the Recombinant Bacmid and Baculovirus for Protein Expression
  • 05:14eTRPV1 and Single-cysteine Mutant Purification
  • 07:18eTRPV1 Single-cysteine Mutant Site-directed Spin Labeling
  • 08:12eTRPV1 Spin-labeled Single Cysteine Mutant Reconstitution
  • 09:30Results: Characterization of the Minimal Cysteine-less TRPV1 Construct and Single-cysteine Mutants used for Spectroscopic Analysis
  • 11:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Questo articolo descrive metodi specifici per ottenere biochimico quantità di detersivo-solubilizzato TRPV1 per analisi spettroscopica. I protocolli combinati forniscono strumenti biochimici e biofisici che possono essere adattati per facilitare studi strutturali e funzionali per canali ionici dei mammiferi in un ambiente controllato di membrana.

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