Journal
/
Immunology and Infection
/
Geração de células NK humana primárias e expandida de Knock-out usando ribonucleoproteínas Cas9
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

Geração de células NK humana primárias e expandida de Knock-out usando ribonucleoproteínas Cas9

DOI:
10.3791/58237-v

•

07:20 min

•

June 14, 2018

•

, , , , , , , , , , , ,
1Center for Childhood Cancer and Blood Disease,Nationwide Children’s Hospital, 2Nuffield Division of Clinical Laboratory Sciences, Radcliffe Department of Medicine,University of Oxford, 3Center for Clinical and Translational Research,Nationwide Children’s Hospital Research Institute

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:44Human Primary and Expanded Natural Killer (NK) Cell Transduction
  • 04:48Results: Representative Electroporation Efficiency
  • 06:13Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Aqui, apresentamos um protocolo para modificar geneticamente as células assassinas naturais humano primário ou expandido (NK) usando Cas9 ribonucleoproteínas (Cas9/RNPs). Usando este protocolo, geramos humanas células NK deficientes para transformar o receptor 2 do fator de crescimento – b (TGFBR2) e hipoxantina Fosforibosiltransferase 1 (HPRT1).

Tags

Cas9 RibonucleoproteinsNK CellsGene KnockoutPrimary NK CellsExpanded NK CellsCRISPR RNATracrRNAElectroporationTransductionImmunotherapySolid TumorsBrain TumorsTGF-beta

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Expansão, Purificação e Avaliação Funcional de Células NK do sangue periférico

Geração de Culturas Raft organotípicas de queratinócitos humanos primários

Geração de Células T reguladoras induzidas a partir de células T humanas primárias Naïve e Memória

piggyBac modificação do sistema Transposon de células T primárias Humanos

Geração de Células T humanas alo-específicos a partir de Sangue Periférico

Geração de IgG Humana Recombinante de Anticorpos Monoclonais As células seleccionadas a partir de B imortalizadas

Geração de células dendríticas derivadas de monócitos humanos a partir de sangue inteiro

Dextran aumenta a eficiência de Lentivirus transdução das células NK primário murino e humano

RNA pequeno Transfecção em células primárias Th17 humano por Next Generation electroporação

Um ensaio de citotoxicidade baseados em citometria de fluxo para a avaliação da atividade das células NK humana

Read Article