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Quantitative RT-PCR mit hohem Durchsatz in Einzel- und Bulk-C. elegans Proben mit Nanofluidic-Technologie
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High-Throughput Quantitative RT-PCR in Single and Bulk C. elegans Samples Using Nanofluidic Technology
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Quantitative RT-PCR mit hohem Durchsatz in Einzel- und Bulk-C. elegans Proben mit Nanofluidic-Technologie

DOI:
10.3791/61132-v

•

08:19 min

•

May 28, 2020

•

, , , , , , ,
1Babraham Institute, 2Gurdon Institute,University of Cambridge, 3Department of Genetics,University of Cambridge, 4Wellcome Trust Genome Campus,Wellcome Trust Sanger Institute, 5Laboratory of Virology and Infectious Disease,The Rockefeller University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Worm-to-CT Worm Lysis
  • 02:08Reverse Transcription (RT) for Bulk Samples
  • 02:38Target Specific Preamplification
  • 03:19Exonuclease I Treatment
  • 03:53Sample Mix Preparation
  • 04:48Nanofluidic Chip Priming and Loading
  • 06:00Results: Representative Worm-to-CT Analysis
  • 07:45Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

In diesem Artikel wird ein Hochdurchsatzprotokoll zur schnellen und zuverlässigen Bestimmung der Genexpressionsniveaus in einzelnen oder massenhaften C. elegans Proben beschrieben. Dieses Protokoll erfordert keine RNA-Isolierung und erzeugt cDNA direkt aus Proben. Es kann zusammen mit hochdurchsatzigen multiplexed nanofluidischen Echtzeit-qPCR-Plattformen verwendet werden.

Tags

Keywords: RT-qPCRC. ElegansNanofluidic TechnologyHigh-throughputSingle-sampleBulk-sampleRNA IsolationLysis BufferReverse TranscriptionPre-amplificationGene ExpressionInterindividual Variability

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