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Purification de la tubuline avec modifications posttranslationnelles contrôlées et isotypes à partir de sources limitées par des cycles de polymérisation et de dépolymérisation
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Chapters
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Ce protocole décrit la purification de la tubuline à partir de sources à petite ou moyenne échelle telles que les cellules de culture ou les cerveaux d’une seule souris, à l’aide de cycles de polymérisation et de dpolymérisation. La tubuline purifiée est enrichie en isotypes spécifiques ou a des modifications posttranslationnelles spécifiques et peut être utilisée dans des tests de reconstitution in vitro pour étudier la dynamique et les interactions des microtubules.
