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Purificazione della tubulina con modifiche e isotipi posttraslazionali controllati da fonti limitate mediante cicli di polimerizzazione-depolimerizzazione
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Chapters
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Questo protocollo descrive la purificazione della tubulina da fonti di piccole/medie dimensioni come cellule coltivate o cervelli di topo singolo, utilizzando cicli di polimerizzazione e depolimerizzazione. La tubulina purificata è arricchita in specifici isotipi o ha specifiche modifiche posttraslazionali e può essere utilizzata in saggi di ricostituzione in vitro per studiare la dinamica e le interazioni dei microtubuli.
