בלוק תא הכנה מן הדגימה ציטולוגיה עם דומיננטיות של תאים פזורים בנפרד

Published 7/21/2009
15 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology
 

Summary

Shidham של שיטה להכנת קוביות תא עם סמן-AV מתוך דגימות ציטולוגיה המכיל תאים מפוזרים באופן פרטני ובקבוצות תאים קטנים.

Cite this Article

Copy Citation

Varsegi, G. M., Shidham, V. Cell Block Preparation from Cytology Specimen with Predominance of Individually Scattered Cells. J. Vis. Exp. (29), e1316, doi:10.3791/1316 (2009).

Please note that all translations are automatically generated through Google Translate.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

וידאו זה מדגים שיטה של ​​Shidham להכנת קוביות התא מבוסס דגימות נוזל המכיל תאים ציטולוגיה cervicovaginal מפוזרים באופן פרטני ובקבוצות תאים קטנים. טכניקה זו משתמשת HistoGel (Thermo Scientific) עם ציוד מעבדה קונבנציונאלי.

השימוש בסעיפים לחסום התא הוא כלי עזר רב ערך לצורך הערכה של אי - גניקולוגיים ציטולוגיה. הם מאפשרים cytopathologist ללמוד הדגימה נוספים פרט מורפולוגיים כולל הארכיטקטורה של הנגע. והכי חשוב, הם מאפשרים הערכה של מחקרים נלווים כגון immunocytochemistry, ב-situ הכלאה בדיקות (דגים / CISH) ו-situ שרשרת פולימראז התגובה (PCR). מסורתית לחסום תא טכניקות הכנה יש בעיקר הוחל הלא גניקולוגיים דגימות ציטולוגיה, בדרך כלל נוזל השתפכויות הגוף בסדר השאיפה ביופסיות מחט.

דגימות נוזל cervicovaginal מבוססות יחסית הסלולר פחות מאשר עמיתיהם הלא גניקולוגיים שלהם עם הרבה תאים מפוזרים בודדים. בגלל זה, תאיות הולם בתוך התא לחסום חלקים קשה להשיג. בנוסף, histotechnologist חתך את גוש לא יכול לדמיין את הרמה שבה התאים הם בריכוז הגבוה ביותר. לכן, קשה לפקח על רמת המתאים שבו ניתן לזהות קטעים נבחרים שיועברו השקופיות זכוכית לבדיקה. כתוצאה מכך, באזור גוש תא עם התאים של עניין עלול לפספס, או על ידי חיתוך בעבר או לא לחתוך עמוק מספיק. פרוטוקול נוכחי השיטה של ​​Shidham כתובות בנושאים אלה. אף על פי פרוטוקול זה טופל ודווח על גניקולוגיים דגימות נוזלי המבוסס ציטולוגיה, זה יכול להיות מיושם גם לא גניקולוגיים דגימות כגון נוזלים תפליט, FNA, כמברשות, תוכן וכו 'ציסטה עבור שיפור איכות החומר אבחון בסעיפים לחסום התא.

Protocol

מבוא:

זהו וידאו המתאר שיטה של ​​Shidham להכנת תא לחסום מנוזל הדגימה מבוסס (LBC) ציטולוגיה באמצעות HistoGelTM (Thermo Scientific) (ג'). בהשוואה לגישות אחרות אקראי, להלן שתי תכונות קריטיות של פרוטוקול זה להכנת קוביות התא דגימות hypocellular יחסית רופף עם תאים מפוזרים ביחידות (1-5).

  1. פרוטוקול זה כולל צעדים כדי לרכז את התאים במישור המקביל לפני החנית של לחסום את התא.
  2. זה כולל גם הכללת מגדלור כמו האפל של AV-הסמן (איור 1b), אשר משרתת שתי המטרות הבאות:
    1. כדי להמחיש את הרמה שבה התאים מרוכזים. שטח לחסום את התא עם התאים של עניין עכשיו יכול להיות דמיינו ידי histotechnologist כאשר המשואה כהה נחשף במהלך החיתוך. זו היכולת לפקח שימנע אחד מן חיתוך דרך ברמה עם רוב התאים, או לא גזירה שטחית מדי את רמת עם הריכוז הגבוה ביותר של תאים המדגם.
    2. כדי לשמש כנקודת התייחסות לאיתור בסעיף לחסום סדרתי תא בשקופיות שונים. זו נקודת ייחוס מעשים כמו מגדלור כדי לאתר תאים מסוימים או קבוצות של תאים להערכת דפוס immunoreactivity לתאם עם הגישה SCIP (6,7).

Protocol (איור 2)

הכנת המדגם.

  1. מעבירים את הדגימה שיורית LBC צוואר הרחם ציטולוגיה אל צינור זכוכית שטוחה בתחתית (בקוטר 15mm x 45mm) (איור 2.1 עד 2.4). מניחים את שפופרת זכוכית לתוך צינור פלסטיק גדול המוביל (28 x 85mm) ו צנטריפוגות. הסר את הצינור התחתון זכוכית מהצינור המוביל ויוצקים את supernatant
  2. צינור הזכוכית הוא הכתיר אז (כדי למנוע דליפה של מים לחימום בשלב הבא) והניח פנימה הספק גדול יותר שטוח הצינור התחתון מפלסטיק
  3. פלסטיק המוביל צינור המכיל את שפופרת זכוכית הוא הכתיר אז, להציב צנטריפוגה (מסתובב עם כוסות ולא כוסות זווית קבועה כך התאים ליפול בניצב לתחתית שטוחה של צינור זכוכית), וסובב ב 1805 G (3000 rpms, רדיוס-17cm הרוטור) במשך חמש דקות (איור 2.5).
  4. צינורות יוסרו אז אנכית צנטריפוגה ואת שפופרת זכוכית קטנה יוסר עם מלקחיים של צינור פלסטיק גדול המוביל מבלי להפריע גלולה משקעים עם תאים.
  5. שפופרת זכוכית עם הדגימה הוא הסיר את המיכסה ואת supernatant היא ניגרה נזהרת שלא להפריע שכבה שטוחה של תאים משקעים בתחתית (איור 2.6).

הכללה של לתאם התייחסות AV-סמן והוספת ג'ל

  1. מגדלור כהה AV-הסמן (כ 2 מ"מ x 2 גודל מ"מ, על פני השטח שטוח, שבר של חומר אפל, בצבע sectionable) (איור 3) מתווסף כמו תמרור על צינור זכוכית (איור 2.7).
  2. לנזל aliquot של HG על ידי המסת אותו במיקרוגל למשך 10 שניות בהספק בינוני.
  3. הוסף 0.5 מ"ל של HG מותכת לערבב את הצינור, עם המשקע במהירות, לסכם אותו (איור 2.8) (המשך לשלב הבא מהר מבלי לאפשר HG להתחיל לחיזוק).
  4. הוסף על 2.5 מ"ל של חמה (45 ° C) מים בצינור פלסטיק המוביל (איור 2.9).
  5. שפופרת זכוכית קטנה כתרים ממוקם בתוך צינור פלסטיק עם מים חמים. (שלב זה הוא הכרחי כדי לשמור על HG מן לחיזוק במהלך הצעדים הבאים) (איור 2.9).
  6. צינור הפלסטיק המוביל ממוקם בצנטריפוגה (עם כוסות מסתובב ולא כוסות זווית קבועה כך התאים ליפול בניצב לתחתית שטוחה של צינור זכוכית), וסובב ב 1805 G (3000 rpms, רדיוס-17cm הרוטור) במשך חמש דקות. מטרת צעד זה צנטריפוגה היא לדחוף את הסמן AV-ולרכז את התאים בשכבה קרוב לפני השטח חיתוך של בלוק התא הסופי מוטבע פרפין (איור 1d).
  7. צינורות יוסרו ואז בעדינות אנכית בצנטריפוגה נזהרת שלא להפריע שכבה דקה משקעים עם תאים מדגם בתחתית.
  8. צינור פלסטיק גדול הוא הסיר את המיכסה ואת שפופרת זכוכית קטנה מוסר אנכית מבלי להפריע את שכבת משקעים של תאים הדגימה על ידי מלקחיים.
  9. שפופרת זכוכית קטנה בקירור במצב אנכי למשך 15 דקות להתקרר לחזק את HG (איור 2.11).

הסרת לחסום את התא כלחצן של ג'ל עם הדגימה לעיבוד הסופי

  1. הדיסק HG הקרושה, עם שכבה של הדגימה מרוכז / משקעים בתחתית הוא סולק מן הצינור התחתון שטוח זכוכית על ידי התזת 10% פורמלין באמצעות מחט מד 23 עם מזרק (איור 2.12).
  2. המחט מוחדרת בצד של הצינור בשולי הדיסק HG הקרושה עם הדגימה (איור 2.12).
  3. Needlדואר הוא הסתובב לצד של הצינור תוך פורמלין הוא דחף לאט דרך המזרק. התוצאה היא הפרדה של הלחצן HG יחד עם משואה כהה AV-סמן את הדגימה מרוכז בו מלמטה השטוח של צינור זכוכית (איור 2.12).
  4. גוש תאים (כפתור ג'ל עם תאים הדגימה) ממוקם אז קלטת שכותרתו הגיש עבור עיבוד רקמות להכין מוטבע פרפין תא אבני (איור 2.13).

הטבעה חיתוך של הדגימה

  1. הדיסק מוטבע פרפין עם הצד האפל סמן המשואה למטה כמו משטח חיתוך (איור 1).
  2. הבלוק מחולק עד הסמן-AV בצבע כהה כמו מגדלור הוא חשוף לעין.
  3. שלושה עד ארבעה מקטעים מיקרון נחתכים מרמה זו אשר צריכה להכיל רוב של תאים מפוזרים ביחידות מן הדגימה.
  4. סעיפים נאספים בשקופית זכוכית מכתים נוספת, מכתים immunohistochemical, או בדיקות אחרות כפי שצוין. הפרוטוקולים של בדיקות אלה לרבות סוג של שקופיות לשימוש הגובר בסעיפים עשוי להשתנות. בדרך כלל עבור immunostaining, מגלשות מצופה משמשים כדי למנוע הצפה ואובדן חלקים מן השקופיות במהלך השלבים immunostaining

קיצורים המשמשים (לפי סדר אלפביתי): CISH, chromogenic ב-situ הכלאה בדיקות, דגים, פלורסנט ב-situ הכלאה בדיקות; FFPE, פורמלין, קבוע פרפין, מוטבע, FNA, השאיפה מחט דקה, HG, HistoGel ™ (Thermo Scientific); LBC, ציטולוגיה המבוססת נוזלי; PCR תגובת שרשרת פולימרז;

דמות 1
באיור 1. מבנה התא לחסום שהוכן על ידי פרוטוקול של Shidham.

דמות 2
איור 2. סיכום של צעדים שונים להכנת לחסום התא הדגימה LBC על ידי פרוטוקול של Shidham.

דמות 3
איור 3. הכנת סמן-AV מן קליפות בננה.

דמות 4
איור 4. השוואה של בלוקים של תאים חלקים עם או בלי AV-הסמן.

דמות 5
איור 5. השוואה בין תאיות סעיפים של גוש תאים עם ובלי סמן-AV.

Discussion

בלוקים סלולריים הם כלי רב ערך לצורך הערכה של דגימות ציטולוגיה שונים (1). והכי חשוב, בנוסף את הפרטים האדריכליים של הדגימה, בלוקים תא לאפשר הערכה של מחקרים נלווים כגון immunocytochemistry, ניאון / chromogenic ב-situ הכלאה בדיקות (דגים / CISH) ו-situ PCR. מגוון שיטות להכנת לחסום התא מתוארים. עם זאת, רוב אלה מתאימים לא גניקולוגיים דגימות ציטולוגיה אשר מכילים תאים רבים יחסית עם microfragments רקמות כגון FNA aspirates וכמה נוזלים כגון השתפכויות הצפק (1,3,4,5).

מכיוון רחובות התא בעיקר לספק הזדמנות להערכה immunocytochemical, עיבוד שלהם רצוי להיות דומה לזה של פורמלין-קבוע פרפין, מוטבע (FFPE) ברקמות. בסופו של דבר התוצאות שהתקבלו לאחר הערכה immunocytochemical סעיפים לחסום סלולריים הם בהשוואה לאלו עם שפורסמו בספרות המדעית ובהם מבוצע בעיקר על קטעי רקמה FFPE. כל השינויים בפרוטוקול פוטנציאל פשרה לבטל את תוקפו של התוצאות שהושגו על בלוקים תא מעובד באמצעות fixatives שונים רצפים מגיב אחרת מזו המשמש FFPE שגרתית. כמה טכניקות מסחרי יכול להיות החיסרון של עיבוד באמצעות פרוטוקול החשיפה חשיפה מקבע, מגיב אחרת.

שיטות שונות של הכנה לחסום תא זמינים עבור דגימות עם כמות משמעותית של משקעים ושברי רקמות. בעיקר, במשקעים מרוכז נתמכים על ידי ג'ל חלק או עקרון קרישה. כפתור תמרון מוטבע אז לאחר עיבוד כמו דגימות לפתולוגיה / ביופסיה כירורגית פרפין.

ג'ל המשמש כוללים אגר ג'לטין, פיברינוגן / פלזמה תרומבין, וג'ל מסחריים אחרים כגון HG. שיטות ריכוז להשתנות pelleting פשוט המשקע על ידי צנטריפוגה ריכוז של תאים לאורך סוגים שונים של ממברנות. דוגמאות כוללות: Milipore, collodin (Celloidin) שקיות או מגרדים את התאים מן מריחות ציטולוגיה בשקופיות זכוכית (1). החוקרים העריכו גם מגוון רחב של ג'לים ידי מנסה שילובים שונים של אגר ואת הג'לטין. אף אחד השילובים להשיג את העקביות חברה מספיק כדי להשיג יכולת תמרון בקלות דיסק של ג'ל הקרושה עם תאים מוטבע מן הדגימה בחתיכה אחת. HG הראו עקביות המתאים בחוויה שלנו את התוצאות immunostaining על לחסום חלקים HG התא היה מעולה.

נוזלי מבוסס ציטולוגיה (LBC) דגימות עבור ציטולוגיה cervicovaginal הסלולר הם בדרך כלל פחות מאשר הלא גניקולוגיים דגימות כאמור לעיל. בנוסף, LBC דגימות גניקולוגיים בעיקר מכילים תאים בודדים פזורים שטחי מודבק מתוך רירית cervicovaginal. בגלל זה, תאיות המתאים בתוך התא לחסום חלקים לא ניתן להשיג ללא גישה מיוחדת. כמו אלה הפזורים ביחידות רכיבים סלולריים בבלוק לא ניתן לראות על ידי histotechnologist במהלך חיתוך קטע, ברמה שבה התאים יתחילו להופיע בחלקים לא יכול להיות מוערך ועלול לפספס, או על ידי חיתוך בעבר ברמה עם רוב התאים או לא חיתוך עמוק מספיק לתוך הרמה עם הריכוז הגבוה ביותר של תאים מדגם (איור 4). פרוטוקול של Shidham כתובות שתי בעיות אלה באמצעות HG כמו הטבעה ציוד מעבדה בינוני קונבנציונאלי (2) (איור 2).

פרוטוקול זה כרוך הבאים שתי תכונות עיקריות (איור 1):

  1. ריכוז מערך של תאים מפוזרים ביחידות במטוס צר סמוך ובמקביל משטח חיתוך של גוש תא (איור 5).
  2. הכללה של סמן-AV מגדלור כמו כהה כמו תמרור. זה קריטי להשגת התכונות הבאות:
    1. זיהוי וניטור הרמה שבה התאים מרוכזים לחסום את התא. חשיפת שלט בצבע כהה מדגיש את הרמה שבה רוב התאים מפוזרים ביחידות בבלוק תא צפויים להיות ממוקם (איור 4). הדבר מונע overcutting (חיתוך בעבר ברמה עם רוב התאים) או undercutting (לא לחתוך עמוק מספיק לתוך הרמה עם הריכוז הגבוה ביותר של תאים לדוגמה) כדי לחסום את התא ולאפשר מבחר קטעים מן הרמה הממוצעת של לחסום את התא המתאים עם הריכוז הגבוה ביותר של תאים.
    2. תמרור כהה בחלקים משמש גם כנקודת התייחסות לסקר ולזהות בדיוק את אותם תאים בחלקים שונים של סידורי לחסום את התא על שקופיות שונות (איור 4). זה קריטי תוך פרשנות והערכה של מאפייני לתאם immunoprofile כזה של תאים מסוימים על ידי הגישה SCIP לעקוב אחר תאים אותו בחלקים שונים (6,7).

למרות our הוא פרוטוקול סטנדרטי דיווח על בסיס דגימות נוזל ציטולוגיה צוואר הרחם, הוא גם יכול לשמש כדי לשפר את התשואה של אבחון רבים שאינם גניקולוגיים דגימות אחרות כגון נוזלים תפליט, FNA, כמברשות, תוכן הציסטה וכו 'בנוסף את הסמן AV יקל משופרת היישום של הגישה SCIP במהלך הערכה immunohistochemical סעיפים בלוק של דגימות תאים אלה. המדיום הטבעה עשוי להיות מוחלף על ידי חומרים כימיים אחרים עם שינויים מתאימים בכל הצעדים הרלוונטיים. HG עשוי להיות מוחלף על ידי פלזמה (פיברינוגן) להיות בג'ל על ידי טרומבין בטמפרטורת החדר (1).

Acknowledgements

המחברים מודים כריס Chartrand, HT (ASCP) עבור הוכחת את סעיף החנית של לחסום את התא עם הסמן AV.

References

  1. Shidham, V. B., Epple, J. Chapter 14, Appendix I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. Elsevier. Forthcoming.
  2. Varsegi, G., D'Amore, K., Shidham, V. p16INK4a Immunocytochemistry as an Adjunct to Cervical Cytology - Potential Reflex Testing on Specially Prepared Cellblocks from Residual Liquid Based Cytology (LBC) Specimens. Modern Pathology 22: 98th Annual Meeting of United States and Canadian Academy of Pathology. 2009 Mar 7-13, Boston, Ma, Abstract 424 97a-97a (2009).
  3. Nigro, K., Tynski, Z., Wasman, J., Abdul-Karim, F., Wang, N. Comparison of cell block preparation methods for nongynecologic ThinPrep specimens. Diagn Cytopathol. 35, 640-643 (2007).
  4. Saleh, H. A., Hammoud, J., Zakaria, R., Khan, A. Z. Comparison of Thin-Prep and cell block preparation for the evaluation of Thyroid epithelial lesions on fine needle aspiration biopsy. CytoJournal. 5, 3-3 (2008).
  5. Kyroudi, A., Paefthimiou, M., Symiakaki, H., Mentzelopoulou, P., Voulgaris, Z., Karakitsos, P. Increasing diagnostic accuracy with a cell block preparation from thin-layer endometrial cytology: a feasibility study. Acta Cytol. 50, 63-69 (2006).
  6. Atkinson, B. F. Chapter 5: Immunocytochemistry of effusion fluids: introduction to SCIP approach (Chapter 5. Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. Elsevier. (2007).
  7. Shidham, V. B. Chapter 15, Appendix II: Immunocytochemistry of effusions processing and commonly used immunomarkers. Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. Elsevier. (2007).

Comments

15 Comments

  1. This is a very interesting protocol and we would like to try it with tissue culture cells. Can the authors please share the vendor and product number for the flat bottom glass tubes and a protocol to make an AV marker? Thanks!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 2, 2010 - 6:16 PM
  2. Details on supplies as requested (April 16, ²011)-




    Flat bottom glass tubes with cap-

    Ordered from Fisher (about $ 60 for 144)

    Catalog # 03-339-²6B

    Vials, shell with seal closure (lead), unattached

    Size: 15 x 45 mm, 1 Dr.

    Qty: 144



    Dark colored AV marker

    Ordered from

    BioInnovation

    456²0 Elmwood Circle

    Canton, MI 48188

    (²6²) 797 03²3
    http://bioinnovationllc.com/uploads/Oreder_form_11-6-09N__PDF_.pdf

    Catalog # 09-991-AVM100

    Dark colored AV marker for cell block depth perception and SCIP mapping

    Qty: 100



    The flat bottom plastic tube could be any- we use plastic Slide container with slots similar to Coplin jar (can be reused) from Fisher-

    Fisher Scientific* PROTOCOL* Cytology Transport System
    http://www.fishersci.com/wps/portal/PRODUCTDETAIL?prodcutdetail='prod'&productId=649503&catalogId=²910²&matchedCatNo=²3034803&pos=13&catCode=SA_SC&endecaSearchQuery=%²3store%3DSafety%²3N%3D0%²3rpp%3D15&fromCat=yes&keepSessionSearchOutPut=true&fromSearch=Y&searchKey=container||slide||plastic&highlightProductsItemsFlag=Y



    Cat No. ²3-034803

    Case of 100 for $109.18

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    April 16, 2011 - 1:13 PM
  3. Although we would like to try it with cell lines, There are problems. Can the authors please share the vendor and product number for the flat bottom glass tubes and an AV marker? Thanks!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    March 30, 2011 - 3:31 AM
  4. Details on supplies (April 16, ²011)-

    Flat bottom glass tubes with cap-

    Ordered from Fisher (about $ 60 for 144)

    Catalog # 03-339-²6B

    Vials, shell with seal closure (lead), unattached

    Size: 15 x 45 mm, 1 Dr.

    Qty: 144



    Dark colored AV marker

    Ordered from

    BioInnovation

    456²0 Elmwood Circle

    Canton, MI 48188

    (²6²) 797 03²3
    http://bioinnovationllc.com/uploads/Oreder_form_11-6-09N__PDF_.pdf

    Catalog # 09-991-AVM100

    Dark colored AV marker for cell block depth perception and SCIP mapping

    Qty: 100



    The flat bottom plastic tube could be any- we use plastic Slide container with slots similar to Coplin jar (can be reused) from Fisher-

    Fisher Scientific* PROTOCOL* Cytology Transport System
    http://www.fishersci.com/wps/portal/PRODUCTDETAIL?prodcutdetail='prod'&productId=649503&catalogId=²910²&matchedCatNo=²3034803&pos=13&catCode=SA_SC&endecaSearchQuery=%²3store%3DSafety%²3N%3D0%²3rpp%3D15&fromCat=yes&keepSessionSearchOutPut=true&fromSearch=Y&searchKey=container||slide||plastic&highlightProductsItemsFlag=Y



    Cat No. ²3-034803

    Case of 100 for $109.18

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    April 16, 2011 - 1:15 PM
  5. What can be applications, limitations, sensitivity and specificity of a cell block?

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 14, 2011 - 1:33 AM
  6. This will be a long discussion. Some aspects are stated in the discussion of the article.
    About sensitivity and specificity- arbitrarily the method has high yield of diagnostic representative material if present in the specimen.

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    April 16, 2011 - 1:15 PM
  7. Is it necessary for your specimen to be totally fixed prior to actually making the gel-block. For example we have a 6 hour minimum fix time --is this done prior to making, or dŒs the NBF actually permeate the gel block> How will this type of material effect prognostic markers like Her ²? Thanks Deb

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 15, 2011 - 4:45 PM
  8. The specimen may be prefixed prior to embedding in Histogel or the cell block may be prepared from unfixed specimen to be postfixed after embedding in Histogel.
    The total fixation time will be same as any other protocol applicable for a particular immunomarker including Her².

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    April 16, 2011 - 1:11 PM
  9. what are the samples suitable for cell block?

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 19, 2011 - 4:48 AM
  10. Although this protocol is published with reference to cervical cytology specimens, we have used it for similar other comparable specimens with singly scattered cells and small groups/tissue fragments.

    In brief, this protocol may be applied to all cytology specimens or other specimens with dispersed isolated cells or small groups of cells. Some of the examples of the specimens in clinical practice include- cervical cytology, endocervical curretings, serous fluids and washings, various brushes & washings (e.g.- bronchial, biliary e.t.c.), urine, FNA needle rinses. This will also be an excellent method for preparing cell blocks from various tissue cultures.

    The current protocol is optimized for specimens with relatively low cellularity, due to this it should be adjusted appropriately for hypercellular specimens by adjusting the sample volume. For example, for some highly cellular serous fluids, the volume of sediments should be appropriately reduced.

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    April 19, 2011 - 11:22 AM
  11. Update on Dark colored AV marker

    BioInnovation LLC
    ²6²77 East River Road, Grosse Ile, MI 48138
    Phone: (²6²) 797 03²3

    Order from at:
    http://bioinnovationllc.com/uploads/01_Order_form__GI-MI_-_5-13-²01².pdf Catalog # 09-991-AVM100

    Dark colored AV marker for cell block depth perception and SCIP mapping

    Qty: 100

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    November 9, 2012 - 1:31 PM
  12. Hello,
    We are trying to use HistoGel to create cell blocks from cultured cells and we're having some trouble. We are considering using the suggested protocol, and so I have a few questions:
    1. Do you fix the cells prior to their inclusion in the HistoGel button? If so, how do you do it?
    2. Which protocol do you recommend for the paraffinization and embedding of the cell blocks?
    Thanks so much in advanced for your help,
    Bat S.

    Reply
    Posted by: Shachaf B.
    July 25, 2013 - 8:10 AM
  13. Responding to your questions (sorry for the delayed response):

    1. Do you fix the cells prior to their inclusion in the HistoGel button? If so, how do you do it?
    Response: No, there is no need to fix (rather if they are not fixed it is better). The final cell block as solidified Gel is then put in the fixative for suitable time (E.g. about 2-3 hours in 10% formalin).

    2. Which protocol do you recommend for the paraffinization and embedding of the cell blocks?
    Response: Any protocol suitable to your lab or the tissue processor in use is OK!

    ____________________________________________

    Additional Details on supplies provided previously are also updated below;
    (10-22-2014)

    Flat bottom glass tubes with cap-

    Ordered from Fisher

    Catalog # 03-339-26B

    Vials, shell with seal closure (lead), unattached

    Size: 15 x 45 mm, 1 Dr.
    Pack of 144 for $37.88
    http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/fsproductdetail?storeId=10652&productId=674157&catalogId=29103&matchedCatNo=0333926B&fromSearch=1&searchKey=26B||339||03&highlightProductsItemsFlag=Y&endecaSearchQuery=%23store%3DHealthcare%23nav%3D0%23rpp%3D25%23offSet%3D0%23keyWord%3D03-339-26B%23searchType%3DPROD%23SWKeyList%3D%5B%5D&xrefPartType=From&savings=0.0&xrefEvent=1413999575562_0&searchType=PROD&hasPromo=0
    ____________________________________________

    Dark colored AV marker

    Ordered from

    BioInnovation LLC
    http://www.bioinnovationllc.com
    26277 E River Rd
    Grosse Ile, MI 48138

    (262) 797 0323

    Order form:
    http://www.bioinnovationllc.com/uploads/01_Order_form__GI-MI_-_5-13-2012.pptx

    Info:
    http://bioinnovationllc.com/uploads/00_Protocols__GI-MI_-_5-13-2012.pdf

    Catalog # 09-991-AVM100

    Dark colored AV marker for cell block depth perception and SCIP mapping

    Qty: 100

    __________________________________________

    The flat bottom plastic tube could be any- we use plastic Slide container with slots similar to Coplin jar (can be reused) from Fisher-

    Fisher Scientific* PROTOCOL* Cytology Transport System

    Cat No. 23-034803
    http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/fsproductdetail?storeId=10652&productId=649503&catalogId=29103&matchedCatNo=23034803&fromSearch=1&searchKey=034803||23&highlightProductsItemsFlag=Y&endecaSearchQuery=%23store%3DHealthcare%23nav%3D0%23rpp%3D25%23offSet%3D0%23keyWord%3D23-034803%23searchType%3DPROD%23SWKeyList%3D%5B%5D&xrefPartType=From&savings=0.0&xrefEvent=1413999345377_0&searchType=PROD&hasPromo=0#
    _________________________________________

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    October 22, 2014 - 1:45 PM
  14. Thanks for sharing the video and detailed information. Cell blocks set up from residual tissue fluids and fine-needle aspirations might be very helpful add-on to establish perfect cytopathologic diagnosis. Especially for the categorization of tumors, this will be highly useful. Its identification goes through various medical instruments that you can see on http://www.ilexmedical.com/products.php?act=cat for successful testing. This improved research provides fine cytomorphologic features which correspond closely to cells in Papanicolaou-stained mark and ensures finest preservation of histochemical and immunocytochemical functionalities. It is an interesting protocol for finding tissue culture cells; however can you share the vendor and product number.

    Reply
    Posted by: Shawn P.
    January 16, 2015 - 7:32 AM
  15. On consistent demand with many enquirers including phone calls, I am providing following details:
    One of the company (AV BioInnovation) is coming up withe kit based on this principle.

    Will send additional information including website details when available.
    In the meanwhile, please check workshop presented at 19th International Congress of Cytology, Pacifico Yokohama (Tokyo), Japan, May 28 - June 1, 2016:
    Shidham VB. Cell block & beyond: High yield goal- How to? (Workshop# 16)
    http://www.slideboom.com/presentations/1482461/00-CellBlock-%28ICC-2016--Japan%29-5-23-2016

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    June 11, 2016 - 7:40 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Video Stats