Manutenção de Wolbachia em Cell-livre Médio

Biology

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Summary

Este vídeo descreve um método para purificar Wolbachia pipientis a partir de uma linhagem de células Anopheles gambiae e cultura do endossimbionte na célula meio livre. Um ensaio para a viabilidade da bactéria é demonstrada.

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Gamston, C., Rasgon, J. Maintaining Wolbachia in Cell-free Medium. J. Vis. Exp. (5), e223, doi:10.3791/223 (2007).

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Abstract

Neste protocolo de vídeo, os procedimentos são demonstrados a (1) purificar simbiontes Wolbachia para fora das células cultivadas mosquito, (2) usar um teste de fluorescência para verificar a viabilidade da Wolbachia purificada e (3) manter a Wolbachia agora extracelular na célula meio livre . Purificada Wolbachia permanecem vivos na fase extracelular, mas não replicar até re-inoculado em células eucarióticas. Wolbachia extracelular purificada desta forma irá permanecer viável por pelo menos uma semana à temperatura ambiente, e possivelmente por mais tempo. Purificada Wolbachia são adequados para micro-injeção, extração de DNA e outras aplicações.

Comments

1 Comment

  1. Dear sir
    I am interest of your work, Wolbachia, so i have some question that make me clear about culture bacteria endosymbionts as
    1. How did you infected Wolbachia in your medium?
    ². What's the strain of your laboratory wolbachia?
    Please forward to me if possible and i woud like to thank for your kind

    Best reguard

    Veerayuth Kittichai
    Entomology Unit
    Chulalongkorn University
    Thailand

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 15, 2010 - 10:00 PM

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