To-Photon Laser-induceret neurale skade: En metode til at observere Axon Degeneration og regenerering i Drosophila Larver
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System. J. Vis. Exp. (2018).
Denne video beskriver to-foton laser ablation af axoner i en Drosophila melanogaster larve og et eksempel protokol til at fremkalde skade og billede skade site.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Li et al.,A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018). 1. To-foton skade og Confocal Imaging Opsætning af mikroskopBEMÆRK: Et konfokalt laserscanningsmikroskop med en to-foton laser blev brugt til dette eksperiment, men andre systemer med en tilsvarende opsætning vil også være tilstrækkelige. Den to-f…
Representative Results
Figur 1: Da neuron axon regenerering i periferien viser klasse specificitet. (A og B) Skematisk tegning, der viser larvernes position. (C) Skematisk tegning af klasse III da neuroner. (D) Axoner af klasse III da neuroner ddaF, mærket med 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, undlader at regrow. (E)Skematisk tegning af klasse IV da neuroner. (F…
Materials
| Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous | Acros Organics | AC615080010 | |
| Halocarbon 27 Oil | Genesee Scientific | 59-133 | |
| Propionic Acid | J.T.Baker | U33007 | |
| Cover Glasses: Rectangles | Fisher Scientific | 12-544-D | 50 mm X 22 mm |
| Zeiss LSM 880 laser scanning microscope | Zeiss | ||
| Zen software | Zeiss | ||
| Chameleon Ultra II | Coherent |
Cite This Article
Two-Photon Laser-Induced Neural Injury: A Method to Observe Axon Degeneration and Regeneration in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20108, doi: (2023).