Lesão neural induzida por laser de dois fótons: um método para observar a degeneração e regeneração do Axônio em Larvas de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model for Study Neuroregeneration in the Perif periférico and Central Nervous System. J. Vis. Exp. (2018).
Este vídeo descreve ablação a laser de dois fótons de axônios em uma larva de melanogaster Drosophila e um protocolo de exemplo para induzir lesões e imagem do local da lesão.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Study Neuroregeneration in the Perif periférico and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018). 1. Lesão de dois fótons e imagem confocal Configuração do microscópioNOTA: Um microscópio de varredura a laser confocal com um laser de dois fótons foi usado para este experimento, mas outros sistemas com uma configuração equivalente també…
Representative Results
Figura 1: A regeneração do axônio do neurônio na periferia mostra especificidade de classe. (A e B) Desenho esquemático mostrando a posição das larvas. (C) Desenho esquemático da classe III dos neurônios. (D) Axônios da classe III da neurônios ddaF, rotulados com 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, não conseguem voltar a crescer. (E) Dese…
Materials
| Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous | Acros Organics | AC615080010 | |
| Halocarbon 27 Oil | Genesee Scientific | 59-133 | |
| Propionic Acid | J.T.Baker | U33007 | |
| Cover Glasses: Rectangles | Fisher Scientific | 12-544-D | 50 mm X 22 mm |
| Zeiss LSM 880 laser scanning microscope | Zeiss | ||
| Zen software | Zeiss | ||
| Chameleon Ultra II | Coherent |
Cite This Article
Two-Photon Laser-Induced Neural Injury: A Method to Observe Axon Degeneration and Regeneration in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20108, doi: (2023).