4방향 올리티미터 분석: 드로소필라에서 오취자-cued 응답을 평가하는 방법

Published: April 30, 2023

Abstract

출처: 린, C.C., 외. 4 사분면 Olfactometer에서 Drosophila의 컴퓨터 추적에 의해 분석 된 후각 행동. J. 비스 익스펙. (2016).

과일 파리는 복잡한 후각 시스템을 가지고, 냄새의 수백을 차별 할 수 있습니다, 행동 결정을 지시하기 위해 자신의 냄새의 감각을 사용합니다. 이 비디오는 4방향 올리소미터 분석법, 파리의 후각 행동 반응을 연구하는 방법에 대해 설명합니다. 추천 프로토콜 클립은 분석기를 수행하는 동안 테스트 파리를 처리하는 방법과 중요한 단계를 보여줍니다.

Protocol

이 프로토콜은 Lin 외., 4사분성 올리미터, J. Vis. Exp. (2016)에서 드로소필라의 컴퓨터 추적에 의해 분석된 후각 행동에서 발췌한 것입니다. 1. 매력적이고 구충제 오취제에 대한 행동 적 반응 온도 컨트롤러를 켜고 25 °C로 설정합니다. 도취챔버(제어 및 테스트 악취)를 도취챔버 의 출구에 삽입하고 동작 상자에 푸시-투-커넥트 피팅에 연결합니?…

Representative Results

그림 1: 4필드 후각 분석서를 사용하여 생성된 예제 데이터입니다. (A)4필드 경기장의 회로도. (B)네 사분면이 모두 건조한 공기 관류만 을 포함할 때 중립 반응이 관찰된다. (C)왼쪽 상부 사분면에서 침전된 사과 사이다 식초의 6.25% 희석에 대한 어트랙션 응답. (D)10% 에틸 프…

Materials

Air delivery system (Quantity needed)
Tubing and connectors
Thermoplastic NPT(F) Manifolds Cole-Parmer, IL, USA R-31522-31 1
Hex reducing nipple (1/4MNPT->1/8MNPT) McMaster-Carr, IL, USA 5232T314 1
Tubing (ID:1/8) McMaster-Carr, IL, USA 5108K43 50 Ft
Tubing (ID:1/16) McMaster-Carr, IL, USA 52355K41 100 Ft
Barbed tube fittings McMaster-Carr, IL, USA 5117K71 1 pack
Push-to-connect tube fittings McMaster-Carr, IL, USA 5779K102 4
Barbed Tube Fittings (1/4MNPT->1/8BF) McMaster-Carr, IL, USA 5463K439 1 pack (10)
Barbed Tube Fittings (1/8MNPT->1/8BF) McMaster-Carr, IL, USA 5463K438 2 pack (10)
Barbed Tube Fittings (1/8MNPT->1/16BF) McMaster-Carr, IL, USA 5463K4 2 pack (10)
Barbed Tube Fittings (1/4MNPT->1/4BF) McMaster-Carr, IL, USA 5670K84 1
Hex head plug McMaster-Carr, IL, USA 48335K152 1
Air pressure regulator, air filter and flowmeters (Quantity needed)
Labatory gas drying unit W A HAMMOND DRIERITE CO LTD, OH, USA Model: L68-NP-303; stock #26840 1
Multitube frames for 150 mm flowtubes Cole-Parmer, IL, USA R03215-30 1
Multitube frames for 150 mm flowtubes Cole-Parmer, IL, USA R03215-76 1
150 mm flowtubes Cole-Parmer, IL, USA R-03217-15 9
Valve Cartridge Cole-Parmer, IL, USA R-03218-72 9
Precision Air regulator McMaster-Carr, IL, USA 6162K13 1
Soleniod valves Automate Scientific, Berkeley, CA 02-10i 4
Solenoid valve controller ValveLink 8.2, Automate Scientific, Berkeley, CA 18-Jan 1
Electronic flow meter Honeywell AWM3100V 1
DAQ (NI USB-6009, National Instruments) and a National Instruments NI USB-6009 1
Power supply Extech Instruments 382200 1
Odor chambers
Polypropylene Wide Mouth jar 2 oz; 60 ml Nalgene 562118-0002 At least 5 are required per experiment, but a separate chamber is required for each dillution of each odorant. Available at Container Store, part #635114)
Glass odor chamber, 0.25 oz Sunburst Bottle LB4B At least 5 are required per experiment
"In" valve for odor chamber Smart Products, Inc., CA, USA 214224PB-0011S000-4074 1 of these parts is used per odor chamber but they need to be replaced frequently
"Out" valve for odor chamber Smart Products, Inc., CA, USA 224214PB-0011S000-4074 1 of these parts is used per odor chamber but they need to be replaced frequently
O ring RT Dygert International, MN, USA AS568-029 Buna-N O-R 1 pack (100)
Fly arena, camera and behavior boxes (Quantity needed)
Behavior and camera box material Interstate plastics, CA, USA ABS black extruded (https://www.interstateplastics.com/Abs-Black-Extruded-Sheet-ABSBE~~ST.php) 1803 sq inch
Teflon for fly arena and odor chamber inserts, 3/8" thick, 12" x 12" McMaster-Carr, IL, USA 8545K27 1
Glass plates, 1/8" Thick, 9" x 9" McMaster-Carr, IL, USA 8476K191 2
Dual action thermoelectric controller WAtronix Inc, CA, USA DA12V-K-0 1
IR LED array Advanced Illumination, Rochester, VT, USA AL4554-88024, PS24-TL 2 LED arrays and one power supply
Air conditioner Unit Melcor Store MAA280T-12 1
Imaging system (Quantity needed)
Cosmicar/Pentax C21211TH (12.5 mm F/1.4) C-mount Lens B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA PEC21211 KP 1
CCXC-12P05N Interconnect Cable B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA SOCCXC12P05N 1
DC-700 Camera Adapter B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA SODC700 1
B+W 40,5 093 IR filter B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA 65-072442 1
TiFFEN 40.5 mm Circular polarizer Amazon 1
IR Videocamera Industrial Vision Source, FL, USA Sony XC-EI50 (SY-XC-E150) 1
USB video converter The Imagingsource, NC, USA DFG/USB2-It 1
iFlySpy2 (fly tracking software) Julian Brown, Stanford, Calfornia: julianrbrown@gmail.com iFlySpy2 1
IC Capture software The Imagingsource, NC, USA (http://www.theimagingsource.com/)
Miscellaneous (Quantity needed)
Dremel rotary tool Dremel, Racine, WI, USA Dremel 8000-03 1
Diamond-coated drill bits for glass cutting Available from various suppliers; MSC industrial Supply Co, Melville, NY 90606328 1

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Cite This Article
Four-Way Olfactometer Assay: A Method to Assess Odorant-Cued Responses in Drosophila. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20140, doi: (2023).

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