Drosophila ( Drosophila ) Aggression Assay: Une méthode pour tester la plasticité comportementale chez les mouches

Overview

L’agression est un comportement inné et l’expérience de combat précédente affecte la stratégie de combat et le résultat de concours ultérieurs dans les mouches. Cette vidéo décrit un essai utilisé pour étudier le comportement agressif de Drosophila. Le protocole d’exemple comporte l’analyse effectuée dans une configuration qui élimine la manipulation des mouches et réduit donc le stress pour les animaux, ce qui aurait autrement un impact sur les performances des sujets.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Trannoy et coll., A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the « Loser » Effect in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. Expérience comportementale

1. Effectuez les expériences comportementales avec des mouches mâles de 6 à 7 jours.
2. Insérez des séparateurs en plastique dans chaque chambre de combat.
3. Retirez le bouchon de coton du tube d’isolement et placez le tube sous un trou ouvert sur le côté de l’appareil.
4. Laissez la mouche entrer dans la chambre de combat par géotaxis négatifs, généralement en quelques secondes.
5. Fermez le mur coulissant après que la mouche a quitté le tube et est entré dans la chambre.
6. Répétez la procédure pour introduire la deuxième mouche dans la salle de combat de l’autre côté de l’appareil.
7. Placez l’appareil en position d’enregistrement vidéo illuminé.
8. Commencez l’enregistrement vidéo et retirez le séparateur en plastique pour permettre aux mouches d’interagir.
   1. Pour les expériences d’agression :
      1. Dans ces expériences, enregistrer des combats pendant au moins 20 min pour assurer la formation de fortes relations de dominance.
      2. Après le temps désiré, arrêtez l’enregistrement vidéo.
      3. Retirez les mouches des chambres de combat en inversant la procédure décrite ci-dessus.
      4. Laver soigneusement l’appareil comportemental avec du détergent doux et de l’eau après chaque utilisation et rincer.
   2. Pour les expériences d’effet « perdant » :
      REMARQUE: Dans ces expériences, les premiers combats sont considérés comme la phase de conditionnement et les deuxièmes combats comme la phase de test. La période de repos entre les combats peut différer, mais 10 min permet la formation d’un fort effet « perdant ».
      1. Suivez la procédure décrite ci-dessus pour effectuer un premier combat.
      2. ÉTAPE CRITIQUE : Pour induire la formation d’une mentalité de « perdant », assurez-vous que les premiers combats sont d’au moins 20 min de long afin d’établir des relations de domination forte. Après 20 min, réinsérer le séparateur en plastique dans des chambres de combat pour séparer les mouches.
      3. Après une période de repos de 10 minutes, retirez doucement le séparateur en plastique pour permettre aux mouches d’interagir pour les deuxièmes combats.
      4. À la fin du deuxième combat de 20 min, arrêtez l’enregistrement vidéo.
      5. Retirez les mouches des chambres comportementales comme ci-dessus.
      6. Encore une fois, bien nettoyer l’appareil comportemental.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used