Drosophila Ensayo de agresión: un método para probar la plasticidad conductual en moscas

Overview

La agresión es un comportamiento innato y la experiencia previa de lucha afecta la estrategia de lucha y el resultado de concursos posteriores en moscas. Este video describe un ensayo utilizado para estudiar el comportamiento agresivo de Drosophila. El protocolo de ejemplo cuenta con el ensayo realizado en una configuración que elimina el manejo de moscas y, por lo tanto, reduce el estrés para los animales, lo que de otro modo afectaría el rendimiento de los sujetos.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Trannoy et al., A New Approach that Eliminate Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. Experimento conductual

1. Realiza los experimentos conductuales con moscas macho de 6-7 días de edad.
2. Inserte divisores de plástico en cada cámara de combate.
3. Retire el tapón de algodón del tubo de aislamiento y coloque el tubo debajo de un orificio abierto en el lado del aparato.
4. Deje que la mosca entre en la cámara de combate por geotaxis negativa, por lo general en pocos segundos.
5. Cierre la pared deslizante después de que la mosca haya salido del tubo y haya entrado en la cámara.
6. Repita el procedimiento para introducir la segunda mosca en la cámara de lucha al otro lado del aparato.
7. Coloque el aparato de nuevo en la posición de grabación de vídeo iluminada.
8. Comience la grabación de vídeo y retire el divisor de plástico para permitir que las moscas interactúen.
   1. Para experimentos de agresión:
      1. En estos experimentos, el registro lucha durante al menos 20 minutos para asegurar la formación de relaciones de dominio fuertes.
      2. Después de la hora deseada, detenga la grabación de vídeo.
      3. Retire las moscas de las cámaras de combate invirtiendo el procedimiento descrito anteriormente.
      4. Lave a fondo el aparato conductual con detergente suave y agua después de cada uso y enjuague.
   2. Para experimentos de efectos "perdedores":
      NOTA: En estos experimentos, las primeras peleas se consideran como la fase de acondicionamiento y segundas peleas como la fase de prueba. El período de descanso entre peleas puede diferir, pero 10 min permite la formación de un fuerte efecto "perdedor".
      1. Siga el procedimiento descrito anteriormente para realizar una primera pelea.
      2. PASO CRÍTICO: Para inducir la formación de una mentalidad de "perdedor", asegúrese de que las primeras peleas sean de al menos 20 minutos de largo con el fin de establecer relaciones de dominio fuertes. Después de 20 min, vuelva a insertar el divisor de plástico en cámaras de combate para separar las moscas.
      3. Después de un período de descanso de 10 minutos, retire suavemente el divisor de plástico para permitir que las moscas interactúen para segundas peleas.
      4. Al final de la segunda pelea de 20 minutos, detenga la grabación de video.
      5. Retire las moscas de las cámaras de comportamiento como arriba.
      6. Una vez más, limpie a fondo el aparato conductual.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used