דרוזופילה (לא כולל) בדיקה אגרסיבית: שיטה לבדיקת פלסטיות התנהגותית בזבובים

Overview

תוקפנות היא התנהגות מולדת וניסיון לחימה קודם משפיע על אסטרטגיית הלחימה ועל התוצאה של תחרויות מאוחרות יותר בזבובים. סרטון זה מתאר חקירה המשמשת לחקר ההתנהגות האגרסיבית של דרוזופילה. פרוטוקול הדוגמה כולל את ההסתעפות המבוצעת בהתקנה המבטלת טיפול בזבובים ולכן מפחיתה את הלחץ על בעלי החיים, שאחרת היה משפיע על ביצועי הנבדקים.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Trannoy et al., גישה חדשה המבטלת את הטיפול בחקר התוקפנות ואת אפקט "המפסיד" ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. ניסוי התנהגותי

1. לבצע את הניסויים ההתנהגותיים עם זבובים זכרים בני 6-7 ימים.
2. הכנס מחלקי פלסטיק לכל תא לחימה.
3. הסר את תקע הכותנה מצינור הבידוד והצב את הצינור מתחת לחור פתוח בצד המנגנון.
4. תן זבוב להיכנס לתא הלחימה על ידי geotaxis שלילי, בדרך כלל בתוך כמה שניות.
5. סגור את קיר ההזזה לאחר שהזבוב עזב את הצינור ונכנס לתא.
6. חזור על ההליך כדי להציג את הזבוב השני לתוך תא הקרב בצד השני של המנגנון.
7. הנח את המנגנון בחזרה במצב צילום מואר.
8. התחל הקלטת וידאו ולהסיר את מחלק פלסטיק כדי לאפשר זבובים לקיים אינטראקציה.
   1. לניסויי תוקפנות:
      1. בניסויים אלה, שיא נלחם לפחות 20 דקות כדי להבטיח היווצרות של יחסי דומיננטיות חזקים.
      2. לאחר הזמן הרצוי, הפסק את הקלטת הווידאו.
      3. הסר זבובים מחדרי הלחימה על ידי היפוך ההליך המתואר לעיל.
      4. ביסודיות לשטוף את המנגנון ההתנהגותי עם חומר ניקוי קל ומים לאחר כל שימוש ולשטוף.
   2. לניסויי אפקט "לוזר":
      שים לב: בניסויים אלה, קרבות ראשונים נחשבים כשלב ההתניה וקרבות שניים כשלב המבחן. תקופת המנוחה בין קרבות יכולה להיות שונה, אך 10 דקות מאפשרות היווצרות של אפקט "לוזר" חזק.
      1. בצע את ההליך המתואר לעיל כדי לבצע קרב ראשון.
      2. שלב קריטי: כדי לגרום להיווצרות מנטליות של "לוזר", ודא כי הקרבות הראשונים הם לפחות 20 דקות ארוכות על מנת ליצור יחסי דומיננטיות חזקים. לאחר 20 דקות, הכנס מחדש את מחיצת הפלסטיק לתאי לחימה כדי להפריד את הזבובים.
      3. לאחר תקופה של 10 דקות של מנוחה, להסיר בעדינות את מחלק פלסטיק כדי לאפשר זבובים לקיים אינטראקציה לקרבות השני.
      4. בסוף הקרב השני של 20 דקות, להפסיק את הקלטת וידאו.
      5. הסר זבובים מתאי התנהגות כאמור לעיל.
      6. שוב, לנקות ביסודיות את המנגנון ההתנהגותי.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used