Drosophila (olika betydelser) Aggressionsanalys: En metod för att testa beteendemässig plasticitet hos flugor

Overview

Aggression är ett medföddt beteende och tidigare kamperfarenhet påverkar kampstrategi och resultatet av senare tävlingar i flugor. Denna video beskriver en analys som används för att studera Drosophilasaggressiva beteende. Exempelprotokollet innehåller den analys som utförs i en installation som eliminerar flughantering och därför minskar stressen för djuren, vilket annars skulle påverka försökspersonens prestanda.

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från Trannoy et al., Ett nytt tillvägagångssätt som eliminerar hantering för att studera aggression och "Loser" -effekten i Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. Beteendeexperiment

1. Utför beteendeexperimenten med 6-7-dagars gamla manliga flugor.
2. Sätt in plastavdelare i varje stridskammare.
3. Ta bort bomullspluggen från isoleringsröret och placera röret under ett öppet hål på apparatens sida.
4. Låt flugan komma in i stridskammaren med negativ geotaxis, vanligtvis inom några sekunder.
5. Stäng skjutväggen efter att flugan har lämnat röret och gått in i kammaren.
6. Upprepa proceduren för att föra in den andra flugan i kampkammaren på andra sidan apparaten.
7. Placera apparaten i upplyst videobandsläge igen.
8. Börja videoinspelning och ta bort plastavdelaren så att flugor kan interagera.
   1. För aggressionsexperiment:
      1. I dessa experiment kämpar rekord i minst 20 minuter för att säkerställa bildandet av starka dominansrelationer.
      2. Efter önskad tid, stoppa videoinspelning.
      3. Ta bort flugor från stridskamrarna genom att vända proceduren som beskrivs ovan.
      4. Tvätta beteendeapparaten noggrant med milt rengöringsmedel och vatten efter varje användning och skölj.
   2. För "Loser"-effektexperiment:
      OBS: I dessa experiment betraktas första slagsmål som konditioneringsfasen och andra striderna som testfasen. Viloperioden mellan matcherna kan skilja sig åt men 10 min tillåter bildandet av en stark "förlorare" effekt.
      1. Följ proceduren som beskrivs ovan för att utföra en första match.
      2. KRITISKT STEG: För att inducera bildandet av en "förlorare" mentalitet, se till att de första striderna är minst 20 minuter långa för att etablera starka dominansrelationer. Efter 20 min sätt du in plastavdelaren i stridskammare igen för att separera flugorna.
      3. Efter en 10 minuters viloperiod, ta försiktigt bort plastavdelaren så att flugorna kan interagera för andra slagsmål.
      4. I slutet av den andra matchen på 20 minuter, stoppa videoinspelningen.
      5. Ta bort flugor från beteendekammare enligt ovan.
      6. Rengör återigen beteendeapparaten noggrant.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used