Summary

اللوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في انواع معينة ايليجانس</em

Published: May 28, 2011
doi:

Summary

هنا نطرح على بروتوكول لتنفيذ لوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في<em> C. ايليجانس</em> مع البكتيريا قتل.

Abstract

ومن المعروف الحد من تناول الطعام من دون سوء التغذية أو المجاعة لزيادة العمر وتأخير ظهور الأمراض المرتبطة بالعمر المختلفة في مجموعة واسعة من الأنواع ، بما فيها الثدييات. كما أنه يسبب انخفاض في وزن الجسم والخصوبة ، وكذلك انخفاض مستويات السكر في البلازما ، والانسولين ، وIGF – 1 في هذه الحيوانات. وكثيرا ما يشار إلى هذا العلاج وتقييد الغذائية (DR) أو الحد من السعرات الحرارية (CR). برزت ايليجانس انواع معينة الخيطية باعتبارها كائن نموذجا هاما لدراسة بيولوجيا الشيخوخة. وقد استخدمت التلاعب الناحيتين البيئية والوراثية للدكتور النموذجية وأظهرت لتمديد عمر في C. ايليجانس. ومع ذلك ، فإن العديد من الدراسات التي أعلن عنها في DR C. تم القيام به عن طريق الترويج ايليجانس الحيوانات السائل في وسائل الإعلام ، في حين تم القيام به معظم الدراسات الوراثية في مجال الشيخوخة على أجار الصلبة القياسية في لوحات بتري. هنا نقدم بروتوكول DR باستخدام معيار الصلبة NGM آغار المستندة وحة مع البكتيريا قتل.

Protocol

1. إنشاء منحنى المعايرة لتقدير تركيزات البكتيريا هذا المقطع يصف طريقة لتقدير تركيز البكتيريا عن أي سلالة بكتيريا معينة (مثلا OP50 ، HT115) التي سيتم استخدامها كمصدر للغذاء للتجارب تقييد الغذائية في C. ايليجانس. وينبغي وضع منحني?…

Discussion

ومن المعروف تقييد الغذائية (DR) لزيادة العمر وتأخير ظهور الأمراض المرتبطة بالعمر المختلفة في مجموعة واسعة من الأنواع ، بما فيها الثدييات 5-7. وقد استخدمت التلاعب الناحيتين البيئية والوراثية للدكتور النموذج في C. ايليجانس ، بما فيها الديدان زراعة في وسط شبه ا?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وأيد هذا العمل من قبل على جائزة التجريبية من مركز الصدمات ناثان (P30 AG13283) ومنحة R01 (R01 AG028516) من المعهد الوطني للشيخوخة (NIA) إلى A. – LH

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Carbenicillin Duchefa Biochemie C0109.25 Dissolved in water.
Kanamycin Roche 10106801001 Dissolved in water.
Bacto-peptone Becton, Dickinson and company DF0118072  
Bacto-tryptone Becton, Dickinson and company DF0123075  
Bacto-yeast extract Becton, Dickinson and company DF0127071  
Agar Becton, Dickinson and company DF00145170  
Sterile culture tube USA Scientific 1485-0810  
Spectrophotometer Amersham Biosciences Gene Quant pro Amersham is now part of GE Healthcare.
Dissecting Microscope Zeiss Stemi 2000  
Centrifuge Beckman Coulter Accuspin FR  

References

  1. Hsu, A. L., Murphy, C. T., Kenyon, C. Regulation of aging and age-related disease by DAF-16 and heat-shock factor. Science. 300, 1142-1145 (2003).
  2. Kenyon, C., Chang, J., Gensch, E., Rudner, A., Tabtiang, R. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature. 366, 461-464 (1993).
  3. Apfeld, J., Kenyon, C. Regulation of lifespan by sensory perception in Caenorhabditis elegans. Nature. 402, 804-809 (1999).
  4. Ching, T. T., Paal, A. B., Mehta, A., Zhong, L., Hsu, A. L. drr-2 encodes an eIF4H that acts downstream of TOR in diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Aging Cell. 9, 545-557 (2010).
  5. Weindruch, R., Walford, R. . The Retardation of Aging and Disease by Dietary Restriction. , (1988).
  6. Masoro, E. J. Subfield history: caloric restriction, slowing aging, and extending life. Sci Aging Knowledge Environ. , RE2-RE2 (2003).
  7. Masoro, E. J. Overview of caloric restriction and ageing. Mech Ageing Dev. 126, 913-922 (2005).
  8. Houthoofd, K. Axenic growth up-regulates mass-specific metabolic rate, stress resistance, and extends life span in Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1371-1378 (2002).
  9. Houthoofd, K. No reduction of metabolic rate in food restricted Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1359-1369 (2002).
  10. Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
  11. Bishop, N. A., Guarente, L. Two neurons mediate diet-restriction-induced longevity in C. elegans. Nature. 447, 545-549 (2007).
  12. Panowski, S. H., Wolff, S., Aguilaniu, H., Durieux, J., Dillin, A. PHA-4/Foxa mediates diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Nature. 447, 550-555 (2007).
  13. Lakowski, B., Hekimi, S. The genetics of caloric restriction in Caenorhabditis elegans. Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13091-13096 (1998).
  14. Kaeberlein, T. L. Lifespan extension in Caenorhabditis elegans by complete removal of food. Aging Cell. 5, 487-494 (2006).
  15. Greer, E. L. An AMPK-FOXO pathway mediates longevity induced by a novel method of dietary restriction in C. elegans. Curr Biol. 17, 1646-1656 (2007).
check_url/2701?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Ching, T., Hsu, A. Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (51), e2701, doi:10.3791/2701 (2011).

View Video