Твердые пластины основе Диетические ограничения в Caenorhabditis Элеганс</em
Summary
Здесь мы приводим протокол для проведения твердой пластиной, основанных на пищевых ограничений в<em> С. Элеганс</em> С убитых бактерий.
Abstract
Сокращение потребления пищи без недоедания или голода как известно, увеличивает продолжительность жизни и замедления наступления различных возрастных заболеваний в широком диапазоне видов, в том числе млекопитающих. Это также приводит к снижению массы тела и плодородия, а также более низкие уровни глюкозы в плазме крови, инсулина и IGF-1 у этих животных. Это лечение часто упоминается как диетические ограничения (DR) или ограничение калорийности (CR). Элеганс нематоды Caenorhabditis стала важным организма модель для изучения биологии старения. Оба экологические и генетические манипуляции были использованы для модели DR и показали продлить продолжительность жизни C. Элеганс. Однако многие из сообщили DR исследования в С. Элеганс было сделано путем распространения животных в жидких средах, в то время как большая часть генетических исследований старения поле были сделаны на стандартных твердых агара в чашках Петри. Здесь мы приводим протокол DR с использованием стандартных твердых NGM агар основе пластины с убитых бактерий.
Protocol
Discussion
Диетические ограничения (DR), как известно, увеличивает продолжительность жизни и замедления наступления различных возрастных заболеваний в широком диапазоне видов, включая млекопитающих, 5-7. Оба экологические и генетические манипуляции были использованы для модели DR на C. Эле?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана пилот награду от центра Натан Шок (P30 AG13283) и R01 гранта (R01 AG028516) из Национального института старения (NIA) А.-LH
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
References
- Hsu, A. L., Murphy, C. T., Kenyon, C. Regulation of aging and age-related disease by DAF-16 and heat-shock factor. Science. 300, 1142-1145 (2003).
- Kenyon, C., Chang, J., Gensch, E., Rudner, A., Tabtiang, R. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature. 366, 461-464 (1993).
- Apfeld, J., Kenyon, C. Regulation of lifespan by sensory perception in Caenorhabditis elegans. Nature. 402, 804-809 (1999).
- Ching, T. T., Paal, A. B., Mehta, A., Zhong, L., Hsu, A. L. drr-2 encodes an eIF4H that acts downstream of TOR in diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Aging Cell. 9, 545-557 (2010).
- Weindruch, R., Walford, R. . The Retardation of Aging and Disease by Dietary Restriction. , (1988).
- Masoro, E. J. Subfield history: caloric restriction, slowing aging, and extending life. Sci Aging Knowledge Environ. , RE2-RE2 (2003).
- Masoro, E. J. Overview of caloric restriction and ageing. Mech Ageing Dev. 126, 913-922 (2005).
- Houthoofd, K. Axenic growth up-regulates mass-specific metabolic rate, stress resistance, and extends life span in Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1371-1378 (2002).
- Houthoofd, K. No reduction of metabolic rate in food restricted Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1359-1369 (2002).
- Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
- Bishop, N. A., Guarente, L. Two neurons mediate diet-restriction-induced longevity in C. elegans. Nature. 447, 545-549 (2007).
- Panowski, S. H., Wolff, S., Aguilaniu, H., Durieux, J., Dillin, A. PHA-4/Foxa mediates diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Nature. 447, 550-555 (2007).
- Lakowski, B., Hekimi, S. The genetics of caloric restriction in Caenorhabditis elegans. Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13091-13096 (1998).
- Kaeberlein, T. L. Lifespan extension in Caenorhabditis elegans by complete removal of food. Aging Cell. 5, 487-494 (2006).
- Greer, E. L. An AMPK-FOXO pathway mediates longevity induced by a novel method of dietary restriction in C. elegans. Curr Biol. 17, 1646-1656 (2007).
