Qui vi presentiamo un protocollo per l'esecuzione di solido piatto a base di restrizioni alimentari,<em> C. elegans</em> Con batteri uccisi.
Riduzione del consumo di cibo, senza fame o malnutrizione è conosciuto per aumentare la durata della vita e ritardare l'insorgenza di varie malattie legate a una vasta gamma di specie, tra i mammiferi. Essa provoca anche una diminuzione del peso corporeo e fertilità, così come bassi livelli di glicemia, insulina e IGF-1 in questi animali. Questo trattamento è spesso definito come restrizione dietetica (CD) o restrizione calorica (CR). Il nematode Caenorhabditis elegans è emerso come un organismo importante modello per lo studio della biologia dell'invecchiamento. Entrambe le manipolazioni ambientali e genetici sono stati utilizzati per modellare DR e hanno dimostrato di prolungare la durata della vita in C. elegans. Tuttavia, molti degli studi DR riportato in C. elegans sono stati fatti da animali di propagazione in mezzi liquidi, mentre la maggior parte degli studi genetici nel campo dell'invecchiamento sono stati fatti su l'agar standard di solido in piastre di Petri. Qui vi presentiamo un protocollo DR utilizzando le normali solido NGM agar a base di piastra con batteri uccisi.
Restrizione dietetica (DR) è noto per aumentare la durata della vita e ritardare l'insorgenza di varie malattie legate a una vasta gamma di specie, tra cui i mammiferi 5-7. Entrambe le manipolazioni ambientali e genetici sono stati utilizzati per modellare DR in C. elegans, tra cui vermi coltura in un semi-definita liquido 8,9, diluizione della fonte di cibo batterica in terreno liquido 10-12, e l'uso di mutanti comportamenti che alimentano ad un ritmo più lento 1…
The authors have nothing to disclose.
Questo lavoro è stato sostenuto da un premio pilota dal Centro Shock Nathan (P30 AG13283) e una borsa di R01 (R01 AG028516) dal National Institute on Aging (NIA) di A.-LH
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |