लिम्फोसाइटों माउस जननांग पथ Mucosa से अलगाव
Summary
माउस जननांग पथ से लिम्फोसाइटों को अलग करने के लिए एक कुशल तरीके से वर्णित है. इस विधि एंजाइम पाचन और Percoll ढाल जुदाई का लाभ लेता है कुशल अलगाव की अनुमति. इस तकनीक को भी अन्य प्रजातियों में उपयोग के लिए अनुकूल है
Abstract
जठरांत्र, मूत्रजननांगी, और सांस इलाकों में, प्रविष्टि के रोगजनकों के लिए ऐसे वायरस और बैक्टीरिया 1 के रूप में, पोर्टल उपलब्ध कराने सहित mucosal सतहों. Mucosae भी मेजबान में आगमनात्मक साइटों रोगजनकों के खिलाफ आंत्र पथ में Peyers पैच और नाक से जुड़े श्वास नलिका में lymphoreticular ऊतक के रूप में प्रतिरक्षा उत्पन्न. इस अनूठी विशेषता मेजबान रक्षा प्रणाली के एक महत्वपूर्ण खिलाड़ी के रूप में mucosal उन्मुक्ति लाता है. कई अध्ययनों जठरांत्र और श्वसन mucosal साइटों पर ध्यान केंद्रित किया गया. हालांकि, वहाँ प्रजनन mucosal साइटों के छोटे से जांच किया गया है. जननांग पथ mucosa यौन संचारित (एसटीडी) बैक्टीरियल और वायरल संक्रमण सहित रोगों के लिए प्राथमिक संक्रमण साइट है. एसटीडी सबसे महत्वपूर्ण स्वास्थ्य दुनिया का सामना करना पड़ आज की चुनौतियों में से एक हैं. रोग नियंत्रण और रोकथाम के लिए केंद्र का अनुमान है कि वहाँ संयुक्त राज्य अमेरिका में 19 लाख नए संक्रामक हर साल रहे हैं. STडी एस अमेरिका स्वास्थ्य देखभाल प्रणाली हर 2 साल 17 अरब डॉलर की लागत, व्यक्तियों और लागत भी तत्काल और जीवन भर के स्वास्थ्य के परिणामों के बारे में अधिक. आदेश में इस चुनौती का सामना करने के लिए, प्रजनन mucosal उन्मुक्ति का एक बड़ा समझ की जरूरत है और लिम्फोसाइटों अलग इन अध्ययनों के एक आवश्यक घटक है. यहाँ, हम एक reproducibly प्रतिरक्षाविज्ञानी अध्ययन के लिए murine मादा जननांग इलाकों है कि अन्य प्रजातियों के लिए adaption के लिए संशोधित किया जा सकता से लिम्फोसाइटों को अलग विधि प्रस्तुत करते हैं. नीचे वर्णित विधि एक माउस पर आधारित है.
Protocol
Discussion
इस प्रोटोकॉल में, यह दिखाया गया है कैसे माउस जननांग इलाकों से लिम्फोसाइटों को तैयार करने के लिए और आसानी से महारत हासिल है. इस प्रक्रिया का सबसे महत्वपूर्ण बात करने के लिए बर्फ पर रखने के द्वारा कोशिका?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम धन (काक) R01 AI026328 R01 और AI079004 (काक) के अनुदान के लिए NIH शुक्रिया अदा करना है.
Materials
| Name | Company | Catalogue number | |
| Collagenase | Sigma Life Sciences | C2139-1G | |
| Percoll | GE Healthcare Bio-Sciences | 17-0891-01 | |
| RPMI1640 | Gibco by Life Technologies | 11875 |
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