Tavşan diz ekleminde kıkırdak defektlerinin tedavisi için bir deney tekniği tarif edilmektedir. Bir matris üzerinde numaralı seribaşı otolog kondrosit implantasyonu tatmin edici uzun vadeli sonuçlar sağlayan eklem kıkırdağı lezyonların yeniden ve onarım için bir iyi kabul edilen bir yöntemdir. Matrix destekli otolog kondrosit transplantasyonu (MACT) bir standart ve klinik olarak kurulan implantasyon yöntem sunmaktadır.
Eklem kıkırdağı kendini rejenerasyon 1 için sınırlı bir kapasiteye sahiptir çünkü eklem kıkırdağı kusurları önemli bir sağlık sorunu olarak kabul edilir. Tedavi edilmeyen kıkırdak lezyonları devam eden ağrıya yol, olumsuz yaşam kalitesini etkileyen ve osteoartrit için zemin hazırlayabilir. Son on yıl boyunca, çeşitli cerrahi tekniklerin bu lezyonların tedavisi için geliştirilmiştir. Ancak, şimdiye kadar hyalin kıkırdak ile defekt kapsayan veya tatmin edici uzun vadeli iyileşme 2-4 sağlama açısından tam bir onarım elde etmek mümkün değildi. Bu nedenle, eklem kıkırdağı yaralanmaları gibi Doku Mühendisliği gibi rejeneratif teknikler için önemli bir hedef olmaya devam etmektedir. Genellikle lifli ya da fibröz kıkırdak dokusu oluşumuna yol açan diğer cerrahi tekniklerin aksine, doku mühendisliği tam olarak nakledilen hücrelerin kondrojenik potansiyel kullanarak orijinal eklem kıkırdağının kompleks yapısı ve özellikleri geri amaçlamaktadır. Recent gelişmeler rejeneratif kıkırdak tedaviler için umut verici olanaklar açtı.
Tam kat kıkırdak veya osteokondral lezyonlarının tedavisi için ilk hücre bazlı yaklaşım klinik otolog kondrosit implantasyonu (ACI) 5 öncülük Lars Peterson ve Mats Brittberg tarafından 1994 yılında yapıldı. Bugün, tekniği klinik hatta 10 ila 20 yıl implantasyon 6 sonra iyi klinik sonuçlar bakımı, diz büyük kıkırdak defektleri tedavisi için iyi kurulmuştur. Son yıllarda, otolog kondrosit implantasyonu hızlı bir ilerleme yapıldı. Hücreler daha sonra dikilmiştir edildiği bir yapay üç boyutlu kolajen matrisin kullanımı daha popüler 7-9 oldu.
MACT iki cerrahi işlemler oluşmaktadır: kondrosit toplamak için, İlk olarak, kıkırdak biyopsi t olmayan bir ağırlık taşıyan kıkırdak alanından yapılması gerekiro diz eklemi. Daha sonra, kondrosit, çıkarılan saflaştırılmış ve in vitro yeterli hücre sayısı için genişletilmiş edilmektedir. Kondrositler, daha sonra, üç boyutlu bir matris üzerine ekilir ve daha sonra yeniden implante edilebilir. Bir doku mühendisliği implant hazırlarken, çoğalma hızı ve farklılaşma kapasitesi başarılı bir doku rejenerasyonu 10 için çok önemlidir. Bir cep taşıyıcı olarak üç boyutlu bir matrisin kullanılması, bu hücresel özellikleri 11 desteklemek için düşünülmektedir.
Aşağıdaki protokol özetlemek ve kıkırdak biyopsi gelen kondrosit izolasyonu için bir teknik, bir 3D-matrix (Chondro-Gide, Geistlich Biomaterials, Wollhusen, İsviçre) üzerine in vitro ve tohumlama kendi çoğalması gösterecektir. Son olarak, bir tavşan diz ekleminin yapay olarak oluşturulmuş kıkırdak zararların içine hücre-matriks-yapıları arasında implantasyon tarif edilecektir. Bu teknik, deneysel ortamda olarak kullanılabilirkıkırdak onarım daha fazla deneyler için.
Sunulan protokol tavşan diz yapay olarak oluşturulmuş kıkırdak defektleri içine sonraki çoğalması ve yeniden implantasyon için otolog kondrosit izole etmek için bir 9,12,13 kurulmuş ve kolay kullanışlı bir teknik sağlar. Eklem kıkırdağı lezyonlarının yeniden ve onarım için otolog kondrosit kullanımı klinik kullanımı tatmin edici uzun dönem sonuçları 6 sağlayan zaten.
Periost hipertrofisi ve kireçlenme örneğin gibi büyük sorunlar, gre…
The authors have nothing to disclose.
Bu proje Alman Araştırma Birliği (DFG, HE 4578/3-1) tarafından finanse edildi.
Name of reagent/equipment | Company | Catalogue Number | Comments |
DMEM | Biochrom AG | F 0415 | |
Collagenase A | Roche | 10 103 586 001 | 0.21 U/mg |
Fetal calf serum (FCS) | PAN Biotech GmbH | 3702-P103009 | |
Propofol | Fresenius Kabi | ||
Penicillin/Streptomycin | Biochrom AG | A 2213 | 10,000 U/ml/10,000 μg/ml |
PBS Dulbecco (1X) | Biochrom AG | L1815 | |
Ethanol (70%) | Merck KgaA | 410230 | |
Trypsin-EDTA 0.25 %/0.02 % | Biochrom AG | L2163 | in PBS w/o Ca2+, Mg2+ |
Fentanyl | Delta Select GmBH | 1819340 | |
NaCl solution (0.9%) | Bbraun | 8333A193 | |
Tissue culture dishes 100 mm/150 mm | TPP AG | 93100/93150 | Growth area 60.1 mm2/147.8 mm2 |
Tissue culture flasks 25/75 mm2 | TPP AG | 90025/90075 | 25 mm2, 75 mm2 |
Centrifuge Tubes (50 ml) | TPP AG | 91050 | Gamma-sterilized |
Hemocytometer | Brand GmbH+Co KG | 717810 | Neubauer |
Trypan Blue Solution 0.4% | Sigma-Aldrich | L8154 | |
Spray dressing (OpSite) | Smith&Nephew | 66004978 | Permeable for water vapor |
Chondro-GideÒ | Geistlich Pharma AG | 30915.5 | |
Biopsy Punch | pfm medical ag | 48351 | |
Tissucol Duo S | Baxter | 3419627 | 0.5 ml |