Introduction
림프 시스템은 생리학의 파악 하였다 영역입니다. 림프 카테터의 전임상 모델은 다른 동물 종 1-8에서 발생하는 지질 8-12 및 약물 대사 13-15, 실험적인 치료 (17)와 암 전이 (16)에 관여하는 메커니즘을 조사하기 위해 제약 산업 및 연구 기관에 의해 사용되며, 면역 기능 (18) -26. 본 연구는 지단백질 대사의 성분을 측정하는 돼지 모델에서 장 림프 트렁크 카테터의 사용을 탐구한다. 지단백질 대사는 생산과 분비 킬로 미크론의뿐만 아니라 연관된 지질 및 총 단백질의 변화에 관여한다. 일반적으로 사용되는 설치류 모델과 인간 사이와 같은 지질 대사에 큰 차이가 있기 때문에이 날 지질 연구를 더 비교 정보를 제공 할 수있는 장 림프를 수집하기 위해 돼지 모델을 사용, 중요한 고려 사항입니다사람들 27-31에서 tabolism.
여러 가지 수술 기법은 많은 동물 종에서 장 림프 수집하는 데 사용됩니다 두개골 어깨 접근 방식 (즉, 흉부 덕트 카테터) (5), 측면 상부 측면의 접근 방식 32-34, 및 복부 정중선 또는 paramedian 접근 22,35. 이 동영상은 자세히 장 림프 줄기의 카테터를위한 복부 정중선 수술 방법을 사용하여 돼지의 수술 절차를 설명합니다. 조심 수술 기법의 허가 림프 카테터의이 방법은 장시간에 걸쳐 큰 림프의 수량과 그 구성 요소를 수집합니다.
이 기술은 다양한 생리적 기능을 검사 다양한 분야에 응용 프로그램의 무수를 엽니 다. 응용 프로그램이 포함될 수 있지만, 전신 지질 및 지단백질 대사 immunosurveillance 종양 기원 및 전이, 장 기능, developm, 이에 한정되지 않는다엔트과 장 염증 질환의 진행.
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Protocol
비디오와 원고 모두에 설명 된 실험 동물의 모든 절차는 동물 케어의 캐나다위원회가 설정 한 가이드 라인을 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 관찰 하였다.
1. 수술 마취 및 신생아 돼지의 수술 준비
- 된 azaperone (0.3 ㎎ / ㎏), 케타민 하이드로 클로라이드 (10 ㎎ / ㎏), 덱스 메데 토미 딘 (15 μg의 / kg) : 분리 대기실에서 25kg에 포함 된 근육 진정 마취 약물 칵테일 목의 기지 근처에 돼지를 premedicate.
참고 : 향상된 내 수술 통증 조절에 대한 사전 마취 약물 칵테일에 부 프레 노르 핀 (0.005-0.02 ㎎ / ㎏)를 추가합니다. - 안면 마스크를 사용하여 (500 ㎖-1000 ml / 분의 O이 4-5 %의 이소 플루 란) 흡입 이소 플루 란 흡입 가스 돼지 마취. 수의학 후두 범위 (17~25cm 긴 직선 칼날)를 사용하여 성대 시각화 및 보컬 국소 10 % 리도카인 중성화 적용코듀로이 바지. 리도카인 스프레이 성대 경련 및기도 폐쇄의 가능성을 줄이기 위해 삽관에 30 ~ 60 초 전에 성대에 문의 할 수 있습니다.
- 이소 플루 란 가스로 마취 성대 사이에 수갑을 차고 기관 내 튜브 (5.0-7.0 mm 내부 직경 (ID))를 전달하여 돼지를 삽관 및 유지 보수 (/ 1,000-2,000 ml의에서 0.5 ~ 2.0 %의 이소 플루 란을 분 O 2)를 사용하여 폐쇄 수술을 통해 마취 시스템을 재 호흡 회로. 턱 톤에 의한 마취의 수준, 두 페달과 눈꺼풀 반사 반응을 평가합니다. 만료 된 마취 가스는 소기 및 수술 스위트 외부에 배출된다.
- 70 % 이소 프로필 알코올 린스 2.0 %의 클로르헥시딘 수술 스크럽 솔루션 귀의 외부 표면을 청소합니다. 수술하는 동안, 20 G 정맥 카테터, 정맥 유체 (5-10 ㎖ / kg / hr로 락 테이트 화 링거액)을 제공 귀 정맥 카테 테르를 꽂다. 의대와 혀의 점막 표면에 맥박 산소 측정기를 고정iCal의 테이프 심박수 및 말초 혈액의 산소 포화도 (SPO 2)를 모니터링한다.
- 지느러미 누운 위치에 마취 된 돼지를 놓고 치골의 복부 측면에 중반 흉부 꼬리 쪽의 복부 복부를 면도. 이 2.0 %의 클로르헥시딘에게 외과 수술 및 멸균 세척을 교대로이 지역을 청소합니다.
- 수술 스위트 마취 돼지를 전송하고 70 % 이소 프로필 알코올 린스의 최종 수술 스크럽을 적용, 그것은 건조 할 수 있도록하고 동물을 드레이프.
- 체온을 모니터링 직장으로 직장 온도 프로브로부터 약 2 ~ 4 cm의 삽입. 수술 중 정상 체온 (38 ~ 40 °의 C)를 유지하기 위해 물 순환 가열 패드에 돼지를 놓습니다.
- 복부 주위의 상부 사분면 패턴에 배치 네 수건 커튼와 돼지 드레이프. 복부 약 5 (c)의 좌우 측면을 따라, 흉부의 검상 부부를 통해 두 번째 드레이프를 처음 드레이프를 놓습니다복부 정중선에 m의 측면. (반대편에 있지만), 약 5 센티미터 복부 정중선 측 방향 복부의 측면 측면을 따라 배치되는 제 2 드레이프처럼 골반의 회장 크레스트와 네 번째 드레이프에서 세 번째 드레이프를 놓습니다.
- 기본 수건 커튼을 통해, 수술 부위에 대한 액세스를 허용하는 슬릿 개구, 큰 테이블 드레이프를 놓고 돼지와 전체 수술 테이블 커버. 마지막 드레이프가 큰 테이블 드레이프에 둔 일회용 steri - 드레이프이다.
창자 림프 트렁크 2. 복부 수술 및 도관
- 기본 복부 근육을 노출 메스 블레이드 20cm의 피부 절개를합니다. 정수리 복막을 노출 모노 폴라 전기 소 (20 와트 설정)으로 복근 층 절개. 복부 내장과 림프관에 액세스 할 수 Metzenbaum 가위와 정수리 복막의 20cm의 직선 세그먼트를 엽니 다.
- 전체 수술 따뜻한 (37 ° C) 멸균 식염수로 모든 조직을 적셔. 조심스럽게 복강에서 결장, 맹장, 회장 및 공장을 포함한 대장의 큰 부분을 들어 올려 상단 복부, 간, 림프관에 액세스 할 돼지의 왼쪽 측면에 외면 화하다. 부드럽게 장을 지원하기 위해 슬링을 형성하기 위해 추가 수건 커튼과 위치에 표면화 소장을 고정합니다.
- 림프관을 찾은는 약 4cm 오른쪽 신장 정맥, 6cm 꼬리-medial- 대정맥 반장의 복부 및 췌장 22,36,37 근처 오른쪽 간 엽의 내장 측면 아래의 두개골 - 중간을 낳는다. 포털 정맥 (36, 37)의 오른쪽 복부 세그먼트에 나란히 반투명 구조로 림프관을 확인합니다.
- 림프의 VESS를 분리엘 부드럽게 Q 팁 어플리케이터와 함께 첨부 된 조직을 멀리 괴롭 히고하여 주변의 밴드에서. 용기의 측면 측면이 주변 조직으로부터 분리되면, 미세 무딘는 집게를 팁으로 용기 아래에 "터널"개방을 만들 수 있습니다.
- 미세 집게로 림프관 아래에 세 2-0 실크 봉합사를 전달합니다. , 폐색 팽창과 림프와 혈관을 채우기 위해 먼저 대부분의 꼬리 봉합사를 결찰. 의도적으로 림프 혈관에 카테터를 확보하기 위해 상대적으로 긴이 봉합 (4cm)의 끝을 둡니다. 다른 두 봉합은 서로 1.0 cm를 분리하고 보안 꼬리 봉합에 두개골 1.0-1.5 cm 약입니다 놓습니다. 혈관에 카테터의 빠른 확보 할 수 있도록 '하나의 느슨한 끈 넥타이'로이 두 봉합을 둡니다.
참고 : 대부분의 꼬리 결찰 봉합하고 (두 개의 두개골 봉합의) 중간 봉합 사이에있는 림프관의 세그먼트는 카테터를위한 사이트입니다. 스와 관련하여필요한 경우 스트럭처 재료는 2-0 polyglactin 봉합사 2-0 실크 봉합사를 대체 할 수있다. - 홍채 가위로 배에 작은 구멍을 잘라 잘 무딘 집게로 혈관을 팽창. 용기에 경 사진 단부와 전문 카테터 튜브 (4.06 외경 (OD) X 2.31 mm의 ID)의 약 1.0-1.5 cm를 삽입하고 제자리에 카테터를 고정하는 두 개의 두개골 봉합을 묶어. 용기에 카테터를 확보하기 위해 꼬리 봉합의 긴 봉합 끝을 사용합니다.
- 따뜻한 식염수의 풍부한 양으로 표면화 장을 세척하고 부드럽게 창자의 정확한 해부학 적 위치를 확보 복강으로 돌아갑니다.
- (paralumbar 포사에서 5-10cm 복부) 왼쪽 중간 측면에서 카테터를 외면 화하다. 메스 피부 절개를하고 카테터의 exteriorization위한 개구를 만들 피부 표면에 복강에서 투관침을 통과한다. 복부 CAV에서 카테터를 외면 화하다하기 위해 큰 켈리 집게를 사용하여투관침 개방을 통해 ITY.
- 라운드 (테이퍼) 바늘 2-0 polyglactin 봉합의 간단한 연속 봉합 패턴 정수리 복막을 닫습니다. 둥근 바늘에 2-0 polyglactin 봉합과 간단한 중단 봉합 패턴으로 복부 근육 레이어를 닫습니다.
- 절단 바늘에 2-0 polyglactin 봉합과 표피 하 패턴으로 피부를 닫습니다. 지갑 문자열 봉합 패턴 피부와 절단 바늘에 2-0 나일론 봉합사로 표면화 카테터를 고정합니다.
- 여전히 배치를 용이하게하고 복구하는 동안 돼지의 스트레스를 줄이기 위해 마취 상태에서 돼지 전문 재킷을 놓습니다.
3. 포스트 수술 복구 및 림프 컬렉션
- 이전에 흡입 마취의 중단에 약 10 분, 즉시 수술 후 진통제를 제공하기 위해 근육 bupenorphine (0.1 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수 있습니다. bupenorphine 계속 (0.1 ㎎ / ㎏) 24 ~ 48 시간 유지하기위한 모든 12 시간수술 후 진통제.
- 수술 후 합병증에 대해 7 일 동안 매일 8 ~ 12 시간을 돼지를 모니터링합니다.
- 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 (EDTA), 코팅 및 항생제로 보충 된 500㎖의 폴리 프로필렌 세척 병 림프를 수집; 페니실린 (6000 IU), 스트렙토 마이신 (6 mg) 및 암포 테리 신 B (3 mg)을 7 일 동안 매 12 시간.
지단백질 ApoB48, 중성 지방, 콜레스테롤 및 총 단백질의 정량 4. 림프에서 수집
- 4 ℃에서 5 분 동안 1,800 XG에서 림프 샘플을 원심 분리기. 상층 액을 수집하고 중성 지방, 콜레스테롤 및 총 단백질의 정량을 위해 사용합니다.
- 희석 샘플, 샘플 희석 1시 20분 증류수와 1 희석 최종 샘플 : 증류수로 100 세 샘플로 뜨는을 나눈다.
- 시판의 키트, 콜레스테롤 수준을 측정하는 희석 상등액을 사용한다.
- 1시 20분 1:10 사용0 희석 된 샘플은 시판 키트 각각 bicinchoninic 산 총 단백질 분석과 트리글리 세라이드 및 총 단백질 수준을 측정 하였다.
림프 (38)로부터 수집 된 지단백 ApoB48 5. 정량,
- 적응 면역 웨스턴 블로 팅 방법 (38) 지질 단백질 ApoB48의 농도를 결정합니다. 3~8% 트리스 초산 나트륨 도데 실 설페이트 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동 (SDS-PAGE)으로 분리 총 림프.
- 항 - 염소 이차 항체로 바인딩 할 : 폴리 비닐 리덴 플루오 라이드 막 (0.45 μm의)로 분리 된 단백질을 옮기고 형 ApoB (4000 1)에 염소 폴리 클로 날 항체와이를 부화.
- 정제 설치류 ApoB48 단백질 표준 선형 농도계 비교하여 화학 발광 지단백질 ApoB48 정량화.
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Representative Results
신생아 돼지의 창자 림프 트렁크의 림프 카테터는 7 일 동안 약 1 L 중앙 림프의 / 24 시간의 모음을 할 수 있습니다. 이 실험에서 수집 된 림프 지질 대사, 즉 총 림프 단백질, ApoB48 지단백, 중성 지방, 총 단백질, 콜레스테롤의 구성 요소가 포함되어 있습니다. 표 1 주요 세 돼지 풀 림프 샘플에서 이러한 지질 성분의 대표 양. 특히, 림프의 흐름과 지질 성분은 인라인 장 림프 혈관 카테터 다음 다른 연구자에 의해보고 중앙 림프의 값 (림프 570 ± 158-979 ± 284 ㎖ / 24 시간 25, 360 ± 120 MLL / 24 시간에 흐름이다 1080 720 ± ㎖ / 24 시간 (26), 중성 지방 687 ± 110 밀리그램 / dL로 9 콜레스테롤 63.1 ± 5.6 밀리그램 / dL로 9) 림프 혈관 내 카테터의 적절한 배치를 나타내는.
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그림 2. 신생아 돼지 창자 림프의 유미 미립 준비의 순도를 보여 고속 단백질 액체 크로마토 그래피 (FPLC) 프로필. 1.006 g / ㎖의 밀도 구배 초 원심 분리 프로토콜을 사용하여 분리 된 세 돼지로부터 수집 림프. 프로필 (A) 콜레스테롤과 림프 샘플 (B) 중성 지방에 대한 단일 피크를 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 1. 신생아 돼지 창자 림프의 ApoB48 및 ApoB100 지질 단백질의 기여를 보여주는 대표적인 웨스턴 블롯 분석. 림프 세에서 수집돼지는 1.006 g / ㎖의 밀도 구배 초 원심 분리 프로토콜을 사용하여 분리된다. 그림은 ApoB100 유도 플라즈마의 약 15 %가 오염의 작은 금액을 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 림프 특성 | |
| ApoB48 (㎎ / ㎖) | 3022.4 ± 440.4 |
| 중성 지방 (밀리그램 / DL) | 607 ± 203.6 |
| 콜레스테롤 (밀리그램 / DL) | 58.5 ± 9.6 |
| 결과는 평균 ± SD로 나타낸다 (N = 3) | |
수술 후. 결과는 내 잘못을 반복 칠일 신생아 돼지에서 수집 한 장 림프 표 1. 구성 요소림프의 sures 다음과 같이 표현은 (N = 3) SD 의미
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Discussion
장 림프를 수집하는 다양한 실험 동물 모델에서 지질 8-12 및 약물 13-15 대사, 암 전이 16, 17, 셀 인신 매매와 면역 기능 18-26에 관여하는 메커니즘을 조사 할 수있는 좋은 방법입니다. 실제로, 장기간에 걸쳐 어느 주연 (심성) 및 중앙 (원심성 큰 트렁크 용기) 림프 다량 수확 할 수있는 능력은 면역 변조 제 18-22을 가진 도전 다음 세포 집단에서 발생하는 시간 변화를 이해하는데 특히 중요했다 , 25, 26. 마찬가지로, 중앙 림프의 컬렉션 지단백 대사 8-12에 관여하는 과정을 서술하는 데 도움이되고있다. 림프 컬렉션의 유틸리티는 카테터 절차의 성공과 림프 혈관 내 카테터의 개통에 따라 달라집니다.
관련된 주요 림프 혈관 카테터큰 동물의 창자 림프 배수는 일반적으로 세 가지 수술 방법 중 하나를 사용합니다. 제 1 기술은 공통 경정맥 (소의 흉부 덕트) (5)를 덮는 흉관를 입력 뇌 어깨 방식을 사용한다. 두번째는 오른쪽 신장 32,33의 중앙 측 측면을 상부 측면 접근을 사용한다. 이 동영상 바와 같이 세번째 기술은 췌장 근처 장 림프 트렁크를 노출 복부 정중선 또는 paramedian 22,35 개복술를 사용하고 문맥 22,36,37 우측 복부 형태에 병설. 상단 측면과 복부 정중선 모두 수술 기법이 장 림프 트렁크의 카테터를 사용하지만, 우리는 복부 정중선 접근법은 처리하고 용기를 조작 할 수있는 상복부 내에서 충분한 공간이 용기의 더 나은 노출을 가능하게 생각합니다.
중요한 것은, 어떤 실험적인 수술로 이상적 상대 있습니다 단계가 있습니다cularly 실험 절차의 성공적인 결과에 매우 중요. 장 림프관에 액세스 할 수 복부 정중선 접근법을 사용하여주의를 필요로 네 가지 주요 영역이 있습니다. 부위에 장시간 노출 순환 허혈성 장 점막 괴사 수술 실패를 유발 첫째, 표면화 부위 우수한 혈액 공급이 필요하다. 이 과정에서 '수건 슬링'은 우수한 조직 관류을 보장 내장의 무게를 지원하여 장간막 혈관의 긴장을 감소시킨다. 둘째 포함한 용기의 조작주의 : 근막과 지방 조직 주변 삽입 단단히 장기 림프 수집 용기 내에서 카테터를 고정 용기의 분리에 성공 카테터 중요하다. 실제로, 39, 40 쉽게 찢어 수 성숙한 동물에서 그러한 것처럼 신생아 돼지 용기의 구조적 완전성은 견고 아니라고 제안 (41)의 비 장 림프의 장기 림프 컬렉션, 카테터에서 혈전을 제거하는 것은 매우 어렵다. 따라서, 이는 매우 성공적 장기간 실험 (미공개 데이터)을위한 카테터 동물 (약 40 %) 수치를 감소시킬 것이다. 림프의 흐름이 느려지거나 절차를 수행하는 동안 중단 한 경우 따라서, 림프 카테터는 두개쪽으로 초기 카테터 사이트에서 0.5 cm를 다시 삽입해야합니다.
과학적 질문을 조사하기 위해 사용되는 모든 모델은 inherant 제한 및 장 림프 줄기의 도관도 예외는 아니다 있습니다. 절차에 대한 가장 발음 제한 효과적으로 분리 림프관을 카테 테르를 꽂다하고, 용기 내에서 카테터를 안정화 할 수 없다는 것입니다. 따라서,이 절차는 우수한 기술과 수술 기술을 가진 사람이 필요합니다에스. 또 다른 중요한 한계는 주요 복부 수술 중 장시간 수술 시간은 위험과 수술 후 이환율과 사망률이 증가한다는 것입니다. 특히, 그러나, 우리의 실험에서 돼지는 수술에서 빨리 회복 및 감염, 장 폐쇄증, 과도한 조직 손상, 또는 절차에 따라 식욕 부진 등의 합병증은 없었다. 확실히, 돼지 ambulating과 일반적으로 24 시간 수술 후 식사, 밝은 응답 것으로 관찰되었고,이 칠일 림프 수집 기간 동안 계속했다. 혈청 화학 또는 전체 혈액 카운트 7 일 실험 다음이 돼지에서 평가되지 않은 있지만 특히, 양 (41)의 장기 림프 컬렉션에서 연구자에 의해 이전 작업은 카테터 양 전해질 불균형이나와, lymphopenic, leukopenic hypoproteinemic 결코 없었다 시연 임상 적으로 건강이 좋지 (게시되지 않은 데이터)를 묘사. 전술 한 바와 같이 중요하고,이 관찰 catheteri 상관 관계데이빗 돼지는 건강의 임상 적 특징을 표시.
흥미롭게도, 연구자들은 림프 흐름의 볼륨의 변화를 지적했다. 돼지는이 때 발생하는 매일 수집 림프의 약 70 %를 공급하고 활성 때 흐름은 하루 동안 가장이었다. 림프 흐름의 나머지 30 %는 휴식과 수면 중에 저녁에 발생합니다.
림프 샘플의 추가 특성화는도 1,도 2에 표 1에 제공된다.도 1은 ApoB100 유도 플라즈마의 약 15 %가 오염 소량을 나타낸다. 장 림프 내 혈장 지단백질의 존재는 종종 돼지 (42)에 발생하는 관찰된다. 유아 돼지, 지단백질의 대부분은 간에서 생성되는 플라즈마의 방출. 플라즈마에서 ApoB100 가능성이 lacteals 42 수집에 다음 림프 혈관 네트워크를 통해 스며장 림프 트렁크에 배수구. 크로마토 그래피의 다양한 방법이 수집 림프 샘플 42-45 콜레스테롤, 트리글리 세라이드 및 기타 인지질 내용을 평가하기 위해 사용된다. 그림 2의 단일 피크가 명확하게 콜레스테롤을 보여줍니다 및 중성 지방은 유미 미립 부분에 존재한다. 이 방법은 프로파일 림프 지단백질의 편리하고 정확한 방법이며 장 림프 카이로 미크론 (45)로부터 시료의 순도를 평가할 때 고려되어야한다. 마지막으로, 표 1은 신생아 돼지 칠일 수술 후에서 수집 한 장 림프의 생화학 적 구성 요소를 제공합니다.
결론적으로, 장 림프 트렁크 장기 카테터 어린 돼지에서 성공적이다. 이 방법으로, 림프 도관은 수집 지질 대사의 성분을 조사하는데 사용될 수있다. 림프, 생산 림프 양의 순도 및 지질 대사의 구성 성분의 양다른 실험 9,25,26,42 돼지 중앙 림프에 존재하는 양 유사하다. 결과는주의 조직의 절개 및 용기 어린 돼지의 창자 림프 트렁크에 카테 테르를 꽂다하는 처리와 복부 정중선 수술 방법을 사용하는 중앙 림프 많은 양의를 수집 할 수있는 좋은 방법임을 나타냅니다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Miller laryngoscope blade | Welch Allyn | 68044 | 182 mm length |
| Surgivet advisor: Vital signs monitor | Surgivet | V9203 | |
| Rectal temperature probe | Surgivet | V3417 | |
| Mono-polar electrosurgery generator | Valley Lab | ||
| Metzenbaum scissors | Fine Science | 14518-18 | |
| Tuffier retractor | Stevens | 162-11-676 | |
| Mosquito forceps | Stevens | 162-7-10 | |
| Kelly forceps-curved (14cm) | Stevens | 162-7-38 | |
| Allis tissue forceps | Stevens | 162-7-38 | |
| Forceps dressing-eye (10.2cm) | Stevens | 162-18-780 | |
| Forceps dressing-Adison (12.1cm) | Stevens | 162-17-2510 | |
| Needle Drivers | Stevens | 162-V98-42 | |
| Iris scissors | Fine science | 14058-11 | |
| Circulating water pump | Jorvet | J-783X | |
| Maxitherm-Vinyl blanket | Jorvet | J-784C | |
| Q tip applicators | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
| Catheterization tubing (4.06 OD X 2.31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Micro-Renethane implantation tubing |
| 2-0 silk suture | Ethicon | LA556 | |
| 2-0 polyglactin suture | Ethicon | J443H | 2-0 vicryl |
| Large animal jacket | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
| Polypropylene wash bottles | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 ml |
| Penicillin-Streptomycin | Sigma Aldrich | D4333 | |
| EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
| Amphotericin B | Sigma Aldrich | A2411 | |
| Azaperone | Elanco Animal Health | Stresnil | |
| Dexmedetomidine hydrochloride | Zoetis | 6295 | Dexdomitor |
| Isoflurane | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
| Ketamine hydrochloride | Zoetis | 2626 | Ketaset |
| Bupenorphine hydrochloride | Champion Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
| 6 mm Endotracheal tube | Jorvet | J-165d | |
| 10% Lidocaine spray | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
| 4 % Chlorhexidine surgical scrub | Partnar Animal Health | PCH-011 | Diluted: 2.0% solution |
| 3M Surgical steri- drape | 3M Health Care | 1040 | |
| SDS page gel | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % tris acetate |
| Polyvinylidene fluoride membrane | Millipore | IPVH00010 | 0.45 μm pore size |
| ApoB antibody | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 dilution |
| Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
| ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
| Triglyceride Kit | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
| Total Cholesterol Kit | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
| Total Protein | Pierce | 23225 | Bicinchoninic Acid Assay |
References
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