We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.
Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal (central) efferent lymph. Importantly, the collection of central lymph from the intestine enables researchers to study both the mechanisms and lipid constitutes associated with lipid metabolism, intestinal inflammation and cancer metastasis, as well as cells involved in immune function and immunosurveillance. A ventral mid-line surgical approach permits excellent surgical exposure to the cranial abdomen and relatively easy access to the intestinal lymph trunk vessel that lies near the pancreas and the right ventral segment of the portal vein underneath the visceral aspect of the right liver lobe. The vessel is meticulously dissected and released from the surrounding fascia and then dilated with sutures allowing for insertion and subsequent securing of the catheter into the vessel. The catheter is exteriorized and approximately 1 L/24 hr of lymph is collected over a 7 day period. While this technique enables the collection of large quantities of central lymph over an extended period of time, the success depends on careful surgical dissection, tissue handling and close attention to proper surgical technique. This is particularly important with surgeries in young animals as the lymph vessels can easily tear, potentially leading to surgical and experimental failure. The video demonstrates an excellent surgical technique for the collection of intestinal lymph.
Lymfesystemet er en studerte område av fysiologi. Prekliniske modeller av lymfatisk kateterisering oppstå i forskjellige dyrearter 1-8 og brukes av farmasøytisk industri og forskningsmiljøer for å undersøke mekanismene som er involvert i lipid 8-12 og legemiddelmetabolisme 13-15, kreft metastaser 16 med eksperimentell behandling 17, og immunfunksjon 18 -26. Denne studien undersøker bruk av intestinal lymfe trunk kateterisering i en gris modell for å måle komponenter av lipoprotein metabolismen. Lipoprotein metabolisme er involvert i produksjon og sekresjon av kylomikroner, samt endringer i tilknyttede lipider og total protein. Dette er viktige hensyn som det er store forskjeller i fettmetabolismen mellom brukte gnagermodeller og mennesker og som sådan, sysselssvine modeller for å samle intestinal lymfe kunne gi mer sammenlignbar informasjon for å studere lipid megstoffskiftet i mennesker 27-31.
Flere kirurgiske teknikker brukes til å samle intestinal lymfe i store dyrearter: en kranie skulder tilnærming (dvs. thorax kanal kateterisering) 5, en lateral øvre flanke tilnærming 32-34, og en ventral midtlinjen eller paramedian tilnærming 22,35. Denne videoen beskriver i detalj den kirurgiske prosedyren i svine bruker en ventral midtlinje kirurgisk tilnærming for kateterisering av intestinal lymfe stammen. Forsiktig kirurgisk teknikk tillater denne metoden for lymfatisk kateterisering for å samle store mengder av lymfe og dens bestanddeler over lange tidsperioder.
Denne teknikken åpner en myriade av søknader til mange disipliner som undersøker ulike fysiologiske funksjoner. Programmer kan inkludere, men er ikke begrenset til, hele kroppen lipoprotein og lipidmetabolisme, immunosurveillance, tumormetastase og genese, tarmfunksjonen, og den development og progresjon av tarminfeksjon.
Samle intestinal lymfe er en utmerket metode for å undersøke mekanismene som er involvert i lipid 8-12 og narkotika 13-15 metabolisme, kreft metastase 16,17, celle trafficking og immunfunksjon 18-26, i ulike eksperimentelle dyremodeller. Faktisk har muligheten til å høste store mengder enten perifer (afferent) og sentralt (efferent og store bagasjerommet fartøy) lymfe over en lengre periode vært særlig viktig for å forstå tidsmessige endringene som skjer i cellepopula…
The authors have nothing to disclose.
The work was supported in part by funding from Alberta Livestock and Meat Agency and Natural Science and Research Council Discovery grant to S. D. Proctor.
Miller laryngoscope blade | Welch Allyn | 68044 | 182 mm length |
Surgivet advisor: Vital signs monitor | Surgivet | V9203 | |
Rectal temperature probe | Surgivet | V3417 | |
Mono-polar electrosurgery generator | Valley Lab | ||
Metzenbaum scissors | Fine Science | 14518-18 | |
Tuffier retractor | Stevens | 162-11-676 | |
Mosquito forceps | Stevens | 162-7-10 | |
Kelly forceps-curved (14cm) | Stevens | 162-7-38 | |
Allis tissue forceps | Stevens | 162-7-38 | |
Forceps dressing-eye (10.2cm) | Stevens | 162-18-780 | |
Forceps dressing-Adison (12.1cm) | Stevens | 162-17-2510 | |
Needle Drivers | Stevens | 162-V98-42 | |
Iris scissors | Fine science | 14058-11 | |
Circulating water pump | Jorvet | J-783X | |
Maxitherm-Vinyl blanket | Jorvet | J-784C | |
Q tip applicators | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
Catheterization tubing (4.06 OD X 2.31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Micro-Renethane implantation tubing |
2-0 silk suture | Ethicon | LA556 | |
2-0 polyglactin suture | Ethicon | J443H | 2-0 vicryl |
Large animal jacket | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
Polypropylene wash bottles | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 ml |
Penicillin-Streptomycin | Sigma Aldrich | D4333 | |
EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
Amphotericin B | Sigma Aldrich | A2411 | |
Azaperone | Elanco Animal Health | Stresnil | |
Dexmedetomidine hydrochloride | Zoetis | 6295 | Dexdomitor |
Isoflurane | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
Ketamine hydrochloride | Zoetis | 2626 | Ketaset |
Bupenorphine hydrochloride | Champion Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
6 mm Endotracheal tube | Jorvet | J-165d | |
10% Lidocaine spray | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
4 % Chlorhexidine surgical scrub | Partnar Animal Health | PCH-011 | Diluted: 2.0% solution |
3M Surgical steri- drape | 3M Health Care | 1040 | |
SDS page gel | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % tris acetate |
Polyvinylidene fluoride membrane | Millipore | IPVH00010 | 0.45 μm pore size |
ApoB antibody | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 dilution |
Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
Triglyceride Kit | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
Total Cholesterol Kit | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
Total Protein | Pierce | 23225 | Bicinchoninic Acid Assay |