Summary
여기는 실험 동물에 대 한 안정적인 intranasal 관리 최소한의 물리적 스트레스와 흡입 마 취의 두 가지 새로운 방법에 설명합니다. 우리는 또한 방사선된 [14C]를 사용 하 여 코-투-두뇌 통로 통해 뇌에 약물 분포 레벨의 양적 평가 하는 방법 설명-수용 성 고분자의 모델 기판으로 눌린.
Abstract
Intranasal 행정 혈액-뇌 장벽 circumvents 치료제의 코-투-두뇌 배달에 대 한 잠재적인 경로 수를 보고 되었습니다. 그러나, 몇 가지 보고서는 정량 분석 뿐만 아니라 최적의 관리 조건 및 코-투-두뇌 배달의 수사를 위해 식이요법을 먹이 지 되었습니다. 설치류를 사용 하 여 코-투-두뇌 통로 메커니즘에 대 한 연구에서 제한 된 진행 후보 약물에 대 한 코-투-두뇌 전달 시스템 설계 측면에서 상당한 장애를 나타냅니다.
이런 점에서 진보를 얻으려면, 우리 개발 하 고 실험 동물에 대 한 안정적인 intranasal 행정 흡입 마 취의 두 가지 새로운 방법으로 평가. 우리는 또한 라디오 표시 [14C]를 사용 하 여 코-투-두뇌 통로 통해 두뇌에 마약 유통 수준 평가 하는 방법 설명-눌린 (분자량: 5000) 수용 성 고분자의 모델 기질으로.
처음에, 우리는 안정적인 마 취 동물에 신뢰할 수 있는 관리를 수행할 수 있게 일시적으로 열 수 있는 마스크를 사용 하 여 피 펫 기반 intranasal 관리 프로토콜 개발. 이 시스템 [14C]를 사용 하 여-눌린 작은 실험 오류와 함께 뇌에 전달 될 수 있는.
우리는 이후 mucociliary 클리어런스 (MC)의 효과 최소화 하기 위해 개발 된 식도 통해 기도 측면에서 역방향 cannulation 수 반하는 intranasal 관리 프로토콜 개발. 이 기술은 상당히 높은 수준의 [14C] 주도-눌린, 양적 嗅, 뇌, 그리고 피 펫 방법 보다 수 질 oblongata에 발견 되었다. 이 비 강에 마약 솔루션의 유지 비 강에 MC 반대 방향으로는 주사기 펌프를 사용 하 여 활성 관리에 의해 실질적으로 증가 하기 때문에 나타납니다.
결론적으로, intranasal 행정이 연구에서 개발의 두 가지 방법 설치류 약 동학을 평가 하기 위한 매우 유용한 기술 될 기대 될 수 있습니다. 역방향 cannulation 방법, 특히, 약 후보자의 코-투-두뇌 배달의 완전 한 잠재력을 평가 하는 데 유용 수 있습니다.
Introduction
펩 티 드, oligonucleotides, 항 체 등 biomedicines 내 화 중앙 신 경계 장애는 현재 아무 치료 요법에 대 한 새로운 치료 대리인으로 잠재적인 응용 프로그램으로 간주 됩니다. 그러나, 대부분 biomedicines 수용 성 고분자 이기 때문에, 정 맥 또는 구두 관리를 통해 두뇌에 혈액에서 배달 매우 어렵습니다 혈액-뇌 장벽 (BBB)의 임피던스 때문.
최근 몇 년 동안, intranasal 행정 BBB1,2,3,,45를 방지 하는 치료제의 코-투-두뇌 배달에 대 한 잠재적인 경로 수를 보고 되었습니다. 그러나, 코-투-두뇌 통로 배달6의 정량 분석에 대 한 상대적으로 몇 가지 보고서 되었습니다. 또한, 거의 아무 보고 되어 설립된 최적 관리 조건 및 투약 식이요법, 볼륨, 같은 시간, 기간, 및 속도, 코-투-두뇌 배달의 수사를 위해. 다음과 같은 이유 때문에 상기 결함을 관찰 수: 마우스 intranasal 관리의 최적의 방법 (i)는 아직 설정할 수, 그리고 (ii) intranasal 관리 pipetting, 일반적으로 사용 되는 일반적으로 특징 이다 mucociliary 클리어런스 (MC)으로 인해 동물 중 interindividual 변화에 의해 그로 인하여 종종 특정 약물의 실제 코-투-두뇌 배달 잠재력의 underestimations로 이어지는.
흡입 마 취 isoflurane를 사용 하 여 (개시: 4%, 유지 보수: 2%)는 흡입과 설치류에 대 한 마스크는 감소 시키기의 목표와 함께 광범위 한 사용, 또는 실험 동물에서 수행 수술과 관련 된 통증을 제거. 마스크의 사용은 피하, 복, 그리고 정 맥 경로 통해 흡입 마 취 실험 동물에 일반적인 약물 관리를 수행 하는 비교적 간단 합니다. 그러나, intranasal 관리의 경우 마스크를 약국에 대 한 동물에서 일시적으로 제거 될 필요가 있다. 유지 보수 2% 미만 isoflurane, 동물 일반적으로 자각 빠르게 흡입 마 취에서. 복용량 당 관리 볼륨이 큰 경우,이 식도, 코 구멍에서 흘러 마약 솔루션을 발생할 수 있습니다. 그리고 따라서 하나의 큰 복용량 작은 intranasal 행정에 대 한 여러 개의 더 작은 복용량으로 세분화 될 필요가 있습니다. 동물입니다. Intranasal 행정 반복 관리용 마스크 제거 및 지속적인된 비 강 납품을 위한 충분 한 시간을 필요로, 생쥐 관리 절차 동안 마 취에서 각 성 것 이다 높은 확률이입니다. 이 매우 어려운 안정적인 마 취 상태, intranasal 행정을 수행 하 게 하 고 아마 설치류 중 코-투-두뇌 배달의 관찰 된 interindividual 변화에 기여.
이 연구에서 우리는 따라서 실험 동물에 최소한의 물리적 스트레스를 부과 흡입 마 취, 안정적인 intranasal 관리의 두 가지 새로운 방법 개발. 첫 번째 방법은 흡입 마 취 동안 intranasal 행정을 가능 하 게 일시적으로 열 수 있는 마스크를 사용 했습니다. 마스크의 열 수 있는 부분을 피 펫을 사용 하 여 안정적인 intranasal 행정을 촉진 하기 위하여 관리 타이밍에 따라 사용할 수 있는 실리콘 플러그를 포함 합니다. 두 번째 방법으로 비 강, 식도에서 전달 하는 정 삽입 수술 그리고 약물 솔루션 전달 될 수 있는 직접 하 고 확실 하 게 안정적인 흡입에서 비 강에는 주사기 펌프는 다음이 연결 된 마 취입니다. 실질적으로 MC의 영향을 최소화 하 여 비 강에 있는 retentively 약 향상 될 때문에이 방법은 코-투-두뇌 루트를 통해 두뇌에 약의 납품을 강화할 수 있습니다. 또한, 양적 라디오 표시 [14C]를 사용 하 여 뇌에서 마약 유통 수준 주입된 복용량/g 뇌에 대 한 (%)을 평가 하는 방법 설명-눌린 [분자량 (MW): 5000] 수용의 모델 기판으로 고분자입니다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
이 동물 연구 (#AP17P004)는 니혼 대학 동물 관리 및 사용 위원회 (도쿄, 일본)에 의해 승인 지침에 따라 수행 되었다. 이 연구 (#17-0001) 약 학 학교, 일본 대학의 방사성 동위 원소 센터에 의해 승인 되었다.
1. 흡입 마 취 Intranasal 관리에 사용 되는 동물
- 제어 온도 23 ± 1 ° C, 습도 50% ± 10%, 그리고 음식과 물에 대 한 광고 libitum 액세스의 유지와 스테인리스 스틸 케이지 12 h 명암 주기 (오전 8시-오후 8시 빛), 아래에서 실험 쥐를 집.
- 실험, 이전 2 %isoflurane, 다음 개시 4%의 농도에서 흡입을 통해 마우스를 anesthetize. 표면 righting의 실종에 대 한 확인 하 여 anesthetization의 필요한 수준을 확인 합니다.
2입니다. 관리 솔루션의 준비
- [14C]의 관리 솔루션 준비-눌린 (50 μ M, 마우스 당 0.5 μCi/mL) 인산 염 버퍼 식 염 수에 희석 하 여 사용 될 때까지 4 ° C에서 저장.
3. 마우스 intranasal 행정
-
일시적으로 열 수 있는 흡입 마스크를 사용 하 여 micropipette 메서드 (그림 1)
참고:이 기술은 이다 Frey 그 외 여러분 에 의해 설립 micropipette를 사용 하 여 intranasal 관리 프로토콜의 수정 3- 흡입 마 취 2 %isoflurane (그림 1A)와 그들의 사지를 찍고 여는 코르크에서 부정사의 위치에서 마우스를 해결.
- 30 s 간격으로, 1-2 μ 복용량 쥐는 흡입 마 취 (그림 1B 및 C) 아래에 고정 하는 동안 또는 왼쪽 및 오른쪽 콧구멍으로 관리를 통해 각 마우스 25 μ 관리 솔루션의 전체 볼륨을 관리 합니다.
- 참고: 폐기물 마스크 열 때와 수동 방법 (폐기물 마 취 가스 용기)으로 마 취 가스 (연기 후드, 하드 ducted biosafety 내각, 진공, 등) 활성화 방법으로 청소를 닫을 때
-
Cannulation 역 m 는 식도 통해 기도 측면에서 ethod (그림 2)
참고:이 기술은 이다 쥐 히 라이 외 에 의해 설립에 대 한 intranasal 흡수 프로토콜의 수정 7- 흡입 마 취와 isoflurane 2% 그들의 사지를 찍고 여는 코르크에서 부정사의 위치에서 마우스를 해결.
- 목에서 머리 면도 하 고 뒤에 알코올 린스 betadine 또는 액체 응용 프로그램을 통해 준비.
- 가 위는 작은 절 개 (1.5 cm) 후 집게로 목 구멍 아래 피부를 확장 하 여 기도 식도 노출 합니다.
- 가 위를 사용 하 여 기도에 절 개 (1 m m)를 확인 합니다.
- 캐 뉼 러를 삽입 (내부 직경: 0.58 m m, 외부 직경: 0.965 m m) 1.2 c m의 길이에 흡입 마스크의 내부에는 정 맥의 반대쪽 끝을 연결 하는 고.
- 가 위를 사용 하 여 식도 있는 절 개 (1mm), 한 캐 뉼 러를 삽입 (내부 직경: 0.28 m m, 외부 직경: 0.61 m m), 코 구멍의 후부 부분을 향해 1.4 c m의 길이에 그것 (그림 2A , B)을 선 고.
참고: 프로시저 3.2.2 3.2.4 × 10 배율에서 입체 현미경 실행 되었다. - 관리 솔루션으로 채워진 1 mL 주사기를 바늘 (27G × 1/2)를 첨부 하 고 프로그래밍 가능한 마이크로 주사기 펌프에 연결.
- 3.2.5 (그림 2C)에서 식도에 삽입 했다 정 맥에 바늘 위에 연결 합니다.
- 25 μ [14C]의 총 볼륨 관리-일정 한 속도로 (5 μ/분) 눌린 솔루션 (그림 2C 및 2D).
4. 양적 실험 라디오 표시 된 수용 성 고분자를 사용 하 여 ([14C]-눌린)
- 마 취 실험 쥐 목을 벨을 위를 사용 하 여 그들의 두개 그리고 수 질 oblongata의 측면에서 두뇌를 손상 하지 않도록 주의 복용 하는 동안.
- 신중 하 게 떠 서 두개골에서 마이크로 주걱을 사용 하 여 전체 뇌를 추출 합니다.
- 장소 필터 종이 얼음에 저장 된 배양 접시에 염 분 해결책으로 습.
- 추출 된 두뇌 moistened 필터 종이에 놓습니다.
- 혈액 두뇌의 표면에 고착 해 서 적어도 [14C]의 영향을 제거 하기 위해 생리 식 염 수를 적신 면봉으로 닦아-두뇌의 표면에 혈액에 눌린.
- 빠르게, 두뇌를 해 부 및 세 부분으로 나눌: 후 각 전구, 뇌, 그리고 수 질 oblongata (는 폰 포함).
- 1 시간에 50 ° C에서 조직 solubilizer에 뇌 샘플을 배치 합니다.
- 액체 섬광 칵테일의 10 μ 뇌 샘플에 추가 합니다.
- 섬광 결정 적용된 솔루션의 방사능 섬광 유리병에 칵테일에 녹아 관리 솔루션의 25 μ 약 수를 전송 합니다.
- 측정 하는 뇌 샘플에서 [14C]의 분 방사능 당 번 ([14C] X뇌) 및 적용된 솔루션 ([14C]에 복용량X) 액체 섬광 카운터는 적절 한 장착에 3H, 14c.에 대 한 크로스 오버 보정
5. 데이터 분석
- 마약 배포 수준 (%) 주입된 복용량 (ID %)에 대 한 다음 수식을 사용 하 여 계산 합니다.
ID % ⁄g 뇌 = ([14C] X뇌/ [14C]복용량에X) × 100
X뇌 (뇌 dpm/g)가 [14C] 금액-눌린 뇌 조직에서 측정 및 X복용량 (dpm/25 μ 솔루션)은 [14C]의 농도-눌린 intranasal 관리에 사용 하는 솔루션에서.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
그림 3 은 [14C]-눌린 수준에 후 각 전구 (A), 뇌 (B), (C) 두 가지 유형의 intranasal 행정 현재 연구에서 평가 사용 하 여 얻은 수 질 oblongata (ID % ⁄g 두뇌). 피 펫 사용 방법 배달 [14C]를 사용 하 여 intranasal 관리-openable 흡입 마스크 (그림 1)를 사용 하 여 두뇌에 눌린. 흡입 마 취, 양적 결과 낮은 표준 오류에 의해 표시 된 시험된 동물 중에서 아무 실험 interindividual 변화를 밝혔다. -흡입 마 취 (그림 2), [14C]의 상당히 높은 수준의 눌린-눌린 후 각 전구 (에서 관찰 했다 식도 역 정 비 강 관리 방법 [14C]을 관리 하는 데 사용 된 경우 그림 3A), 뇌 (그림 3B), 및 수 질 oblongata (그림 3C) 보다 피 펫 방법. 또한, 더 높은 두뇌 [14C] 내-눌린 레벨 후 각 전구 및 수 질 oblongata, 눈에 띄게 코-투-두뇌 통로에 보다에 관련 뇌에서 발견 되었습니다.
그림 1: Intranasal 관리는 micropipette 일시적으로 열 수 있는 흡입 마스크와 함께에서 사용 하 여. 사진 관리, 및 (B) 클로즈업과 열린된 마스크의 (C) 전체 보기 전에 intranasal 행정부는 피 펫을 사용 하 여 (A)와 함께 닫힌된 마스크 고정된 마우스를 보여주는. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 주사기 펌프를 사용 하 여 식도 통해 기도 측면에서 역방향 cannulation Intranasal 관리. 두 가지 유형의 정 후 (A) 외과 영역, (B) 근접 및 (C) 전체 보기, 및 (D) 고정된 마우스의 계획을 보여주는 사진 했다 식도 및 기관지에 삽입 하 고 흡입 마스크에 마이크로 주사기에 연결. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 비교 [14C]-눌린 수준에 후 각 전구 (A), 뇌 (B), (C) 다음 두 가지 유형의 intranasal 관리 수 질 oblongata. 에 A와 B에 나타냅니다 micropipette 방법 (그림 1) 및 역방향 cannulation 방법 (그림 2) intranasal 행정, 각각. 각 방법, [14C] 25 μ의 총 볼륨을 사용 하 여-눌린 (50 μ M, 0.5 μCi/mL) 실시 되었다. 에 B의 관리 율 5 μ/분 이었다. 각 열은 평균 ± 남동 나타냅니다 (n = 4). p < 0.01 (학생의 t-테스트) 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
약물의 코-투-두뇌 전달이이 통로 BBB를 무시 하는 직접 운송 경로 나타내므로 중앙 신 경계 장애에 뚜렷한 영향을 미칠 전망 이다. 3 개의 다른 코-투-두뇌 통로 날짜8보고 되었습니다. 첫 번째는 비 강 점 막에 있는 후 각 점 막에서 개는 후 각 신경을 통해 전달 하는 후 각 신경 통로. 두 번째는 삼차 신경을 통해는 hindbrain에 brainstem에 비 강 점 막의 호흡기 점 막에서 전달 trigeminal 신경 통로. 세 번째는 CSF 통로, CSF 통해 뇌에 걸쳐 배포 됩니다. 코-투-두뇌 통로 BBB에 의해 그리고 중앙 신경8, 를 biomedicines에 전달 하는 수단으로 장애가 될 경향이 있는 친수성 고분자의 관리에 관하여 상당한 주목을 받고 있다 9 , 10 , 11 , 그러나 12., 몇 가지 이전의 연구는 명확 하 게 설명 작은 동물을 위한 intranasal 관리의 방법 코-투-두뇌 통로 통해 후보 약물의 배달 확인. 이 따라, 후보 약물에 대 한 코-투-두뇌 전달 시스템 설계 측면에서 중요 한 장애를 나타내는 작은 동물을 사용 하 여 코-투-두뇌 약물 전달 메커니즘에 관련 된 연구에 매우 천천히 진행이 되었습니다. 따라서,이 연구에서 우리는 intranasal 행정 biomedicines, 중앙 신 경계 질환을 대상으로 등 다양 한 후보 약물의 분포를 조사 하기 위해 흡입 마 취에 대 한 두 개의 프로토콜을 개발 했다. 우리 또한 정량적 평가 위해 사용할 수 있는 메서드를 설명 합니다.
마스크 필요가 없습니다으로 피 펫이이 연구에서 개발 하는 일시적으로 열 수 있는 흡입 마스크를 사용 하 여 의해 intranasal 관리 방법, 각 성 없이 안정적인 마 취 상태에서 동물 들과 함께 신뢰할 수 있는 관리를 수행할 수 게 수 (그림 1)를 제거. 이 기술을 사용 하 여, 우리는 수용 성 고분자 (눌린;의 배달 증명 MW: 5000) 두뇌에. 로 눌린 BBB를 침투 하지 않습니다, 그것은 쥐 두뇌13혈관 내 볼륨 공간 (약 10-15 μ/g 뇌)의 표식으로 사용할 수 있습니다. 우리는 작은 실험 오류와 함께 우수한 양적 결과를 얻었다. [14C]의 수준-두뇌에 눌린 높았다 명확 하 게 정 맥 주사 관리 (데이터 표시 되지 않음) 후 보다 intranasal 관리 후. 따라서, 우리는이 기술을 intranasal 행정 과목 흡입 마 취 (그림 2) 유지는 피 펫을 사용 하 여 기존의 관리를 가능 하 게 실행 가능한 접근 방식을 나타냅니다 설립. 흡입 마 취 비 강 상피 막에 영향 되 고, 그 결과, 비 강 상피 통해 침투성을 증가. 더 연구는 두뇌 배달 흡입 마 취, 복 관리 등 기존의 마 취에 비해 역방향 cannulation 메서드를 사용 하 여 특성에 필요 합니다.
우리는 이후 MC의 효과 최소화 하기 위해 개발 된 식도 통해 기도 측면에서 역방향 cannulation 통해 관리 조사. 쥐, 히 라이 메서드를 닫습니다 식도 수술을 요구 한다 그리고 MC 효과 최소화 하기 위해 코를 입구에서 관리. 쥐, 그것은 물리적으로 코의 입구에서 cannulation 수행 하기 어려운 그리고 intranasal 행정 재채기 발생할 수 있습니다. 직접 식도 및 기도 수술에 의해 닫고 intranasal 동시에 수행할 수 있다는 장점이 있는 마이크로 주사기 펌프, 식도에서 비 강에 삽입 하는 정을 연결 하는 우리의 역방향 cannulation 메서드 관리 합니다. 마이크로 주사기 펌프의 조정 용이 정확한 주입 속도 볼륨을 사용 하 여 관리. 이 기술을 사용 하 여, 우리 기록 관리 친수성 고분자의 상당히 높은 수준의 후 각 전구, 뇌, 그리고 피 펫 방법 (그림 3)를 사용할 때 보다 마우스의 수 질 oblongata. 이 나타납니다 intranasal 행정을 피 펫을 사용 하 여, 솔루션은 자발적인 호흡에 따라 수 동적으로 관리 하기 때문에 되도록 솔루션 엠씨에 의해 기관지와 식도 삭제 될 하는 경향이 있다. 반면, 식도 역 정을 통해 코 구멍으로 관리, 솔루션 코 구멍으로 주사기 펌프를 사용 하 여 적극적으로 관리 된다. 그것은이 이렇게 실질적으로 뇌에 분포 상부로 이어지는 비 강에 마약 솔루션의 보존을 증가 표시 됩니다. 또한, 우리 후 각 전구 및 수 질 oblongata, 눈에 띄게 관련 코-투-두뇌 통로에 보다 뇌에 관리 솔루션의 상부를 감지. 따라서, 우리는 식도 역 정을 통해 비 강에 관리 마약 후보자의 코-투-두뇌 배달의 완전 한 잠재력을 평가 하기 위한 실행 가능한 방법입니다 시연 했다.
결론적으로, 우리가이 연구에서 개발 된 intranasal 관리의 두 가지 방법 코-투-두뇌 통로 통해 작은 동물 약 동학을 평가 하기 위한 매우 유용한 기술 될 기대 될 수 있습니다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 연구는 민간 대학 연구 브랜딩 프로젝트에서 문 부 과학성;에서 부분적으로 지원 되었다 과학 (JSP);의 승진을 위한 일본 사회에서 과학 Research (C) (17 K 08249 [T.K. 하 T.S.])에 대 한 특정 [T.K.]을 [를 T.S.], 생화학의 발전 그리고 다케다 과학 재단에 대 한 하 마 구치 재단에서 공동 연구에 대 한 그랜트. 우리는 실험에 그들의 귀중 한 기술 지원 씨 유야 특별히 및 양 아키코 아사미 감사 합니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ddY mouse | Japan SLC, Inc. | Male, 4-6 weeks, 20-30 g | |
| Isoflurane | Pfizer | v002139 | |
| Isoflurane setup | SHINANO manufacturing CO. LTD. | SN-487-OTAir, SN-489-4 | |
| Isoflurane mask | SHINANO manufacturing CO. LTD. | For small rodents | |
| Isoflurane mask (openable type) | SHINANO manufacturing CO. LTD. | Special orders | |
| Anesthesia Box | SHINANO manufacturing CO. LTD. | SN-487-85-02 | |
| Animal experiments scissors-1 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | B-27H | |
| Animal experiments scissors-2 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | B-13H | |
| Tweezers-1 | FINE SCIENCE TOOLS Inc. | 11272-30 | Dumont #7 Dumoxel |
| Tweezers-2 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | A-12-1 | |
| Cannula tube (PE-50) | Becton, Dickinson and Company. | 5069773 | I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm |
| Cannula tube (SP-10) | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | KN-392 | I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm |
| Shaver | MARUKAN, LTD. | DC-381 | |
| Stereoscopic microscope | Olympus Corporation | SZ61 | |
| Needle 27G 1/2 in 13 mm | TERUMO CORPORATION | NN-2738R | |
| 1 mL syringe | TERUMO CORPORATION | SS-01T | |
| Syringe pump | Neuro science | NE-1000 | |
| Cellulose membrane | Toyo Roshi Kaisya, Ltd. | 00011090 | |
| Micro spatula | Shimizu Akira Inc. | 91-0088 | |
| Micropipette (0.5-10 uL) | Eppendorf AG | Z368083 | |
| Pipette chip | Eppendorf AG | 0030 000.811 | |
| Tape | TimeMed Labeling System, Inc. | T-534-R | For fixing mouse |
| [14C]-Inulin | American Radiolabeled Chemicals Inc. | ARC0124A | 0.1 mCi/mL |
| EtOH | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | 054-00461 | |
| Liquid scintillation counter | Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc | Tri-Carb 4810TR |
References
- Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat. Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).
- Illum, L. Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system. European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).
- Hanson, L. R., Frey, W. H. 2nd Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease. BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).
- Chapman, C. D., et al. Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans. Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).
- Kanazawa, T. Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy. Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).
- Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route. Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).
- Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat. International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).
- Lochhead, J. J., Thorne, R. G. Intranasal delivery of biologics to the central nervous system. Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).
- Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. Strategies to deliver peptide drugs to the brain. Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).
- Kanazawa, T. Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles. Medical Devices. 8, 57-64 (2015).
- Kanazawa, T., et al. Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide. International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).
- Kamei, N., et al. Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse. Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).
- Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique. Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).
