Summary
Burada, deneysel hayvan için kararlı burunici Yönetimi'nin altında inhalasyon anestezi en az fiziksel stres ile iki roman yöntemleri açıklanmaktadır. Biz de beyin radiolabeled [14C] kullanarak burun beyin yolu üzerinden ilaç dağıtım seviyelerinde kantitatif değerlendirilmesi için bir yöntem tarif-suda çözünen oluştururlar, bir modeli substrat olarak inulin.
Abstract
Etkilerinin yönetim terapötik ajanlar, kan - beyin bariyerini circumvents burun beyin teslimi için olası bir yol olarak bildirilmiştir. Ancak, kantitatif analiz hem de en iyi yönetim koşulları ile ilgili olarak ve rejimleri araştırmalar burun beyin teslimat için dozaj kaç rapor edilmiştir. Kemirgenler kullanarak burun beyin yolu mekanizmaları üzerinde araştırma sınırlı sürüyor burun beyin vasıtalarının aday ilaçlar için tasarlama açısından önemli bir engeli temsil eder.
Bu konuda biraz ilerleme kazanmak için geliştirilen ve istikrarlı burunici yönetim inhalasyon anestezi altında iki yeni yöntem için deneysel hayvan değerlendirilir. Biz aynı zamanda radyo etiketli [14C] kullanarak burun beyin yolu üzerinden beyin ilaç dağıtım seviyelerinde değerlendirilmesi için bir yöntem tarif-inulin (Moleküler ağırlığı: 5.000) suda çözünen oluştururlar, bir modeli substrat olarak.
Başlangıçta, biz hayvanlara istikrarlı anestezi altında güvenilir yönetim gerçekleştirmek için bize etkin geçici olarak açılabilir maske kullanan bir pipet-tabanlı burunici Yönetim Protokolü geliştirilmiştir. Bu sistemle, [14C]-inulin beyne az deneysel hata ile teslim.
Daha sonra mucociliary izni (MC) etkilerini en aza indirmek için geliştirilmiştir yemek borusu yoluyla hava yolu taraftan ters cannulation gerektiren bir burunici Yönetim Protokolü geliştirdik. Bu teknik yol açtı [14C] anlamlı olarak daha yüksek düzeylere-inulin, kantitatif olfaktör ampul, cerebrum ve soğanı, pipet yöntemi daha tespit edildi. Bu saklama burun boşluğunda uyuşturucu çözümün önemli ölçüde MC bir yönün nazal kavite içine şırınga pompa kullanarak etkin yönetim tarafından artış olmuştur çünkü gibi görünüyor.
Sonuç olarak, bu çalışmada geliştirilen burunici yönetiminin iki yöntem farmakokinetik Rodents değerlendirmek için son derece yararlı teknikleri beklenebilir. Ters cannulation yöntemi, özellikle burun beyin teslim ilaç adaylarının tam potansiyelini değerlendirmek için yararlı olabilir.
Introduction
Peptidler, oligonucleotides ve antikorlar gibi biomedicines Şu anda hiçbir iyileştirici tedavi var ateşe dayanıklı merkezi sinir sistemi bozuklukları için yeni tedavi ajanı olarak potansiyel uygulama için kabul edilir. Ancak, çoğu biomedicines suda çözünen oluştururlar olduğundan, intravenöz veya sözlü yönetimi ile beyin içine kandan teslimat kan - beyin bariyerini (BBB) empedans nedeniyle son derece zor olur.
Son yıllarda, burunici yönetim BBB1,2,3,4,5önler terapötik ajanlar, burun beyin teslimi için olası bir yol olarak bildirilmiştir. Ancak, kantitatif analiz burun beyin yolu teslim6ile ilgili görece az sayıda rapor edilmiştir. Ayrıca, hemen hemen hiçbir rapor kurulan en uygun yönetim koşulları ve birimi gibi dozaj rejimleri edilmiştir kez, zaman dönemleri ve hız, burun beyin teslim araştırmalar için. Yukarıda belirtilen eksiklikleri için aşağıdaki nedenlerden atfedilen: etkilerinin Yönetim (i) bir en iyi yöntem fareler için kurulacak henüz ve (ii) etkilerinin yönetim pipetting tarafından genel olarak kullanılan, genellikle karakterize mucociliary izni (MC) nedeniyle hayvanlar arasında görülmemelidir varyasyon tarafından böylece sık sık belirli bir ilacın gerçek burun beyin teslim potansiyel underestimations için önde gelen.
İnhalasyon anestezi isoflurane kullanarak (başlatma: %4, bakım: % 2) ile bir inhalasyon kemirgen için maske azaltılması amacı ile yaygın kullanımı kazanmıştır veya cerrahi ile ilişkili ağrı ortadan kaldırarak gerçekleştirilen deneysel hayvanlar üzerinde. Maskelerinin kullanımı nispeten basit tipik ilaç idaresi deneysel hayvan subkutan, mayi ve intravenöz yolları üzerinden inhalasyon anestezi altında gerçekleştirmek yapar. Ancak, burunici yönetimi söz konusu olduğunda, maskeyi geçici olarak ilaç idaresi için hayvanlardan kaldırılması gerekir. Bakım altında %2 ile isoflurane, hayvanlar genellikle uyandırmak hızla inhalasyon anestezi. Yönetim birim doz başına büyük olduğunda, bu yemek borusu içine burun boşluğundan akmaya uyuşturucu çözüm neden olabilir ve bu nedenle tek bir büyük doz küçük burunici yönetim için birden çok daha küçük dozlarda içine bozuk aşağı gerekebilir hayvanlar. Yinelenen yönetim için maske kaldırma ve sürekli burun boşluğuna teslimat için yeterli süre burunici yönetim gerektirir olduğu fareler anesteziden yönetim işlemi sırasında uyandırmak yüksek bir olasılık. Bu çok zor burunici Yönetimi'nin altında istikrarlı bir anestezik durumu gerçekleştirmek yapar ve muhtemelen burun beyin teslimat kemirgenler arasında gözlenen görülmemelidir değişimine katkıda bulunur.
Bu çalışmada, bu nedenle en az fiziksel stres deneysel hayvanlar üzerinde empoze iki roman yöntemi, istikrarlı burunici Yönetimi'nin altında inhalasyon anestezi, geliştirdi. Birinci yontem için biz burunici yönetimi inhalasyon anestezi sırasında sağlayan geçici olarak açılabilir maske kullanılır. Maskeyi açılabilir parçası yönetim zamanlama uyarınca bir pipet kullanarak kararlı burunici yönetimini kolaylaştırmak için kullanılan bir silikon tak içermektedir. İkinci yöntem için bir kanül cerrahi burun boşluğuna yemek borusu geçmek eklenmiş ve böylece ilaç çözüm doğrudan ve güvenli bir biçimde istikrarlı inhalasyon altında nazal kavite içine teslim bir şırınga pompa sonra buna bağlıydı anestezi. Önemli ölçüde MC etkilerini en aza indirerek, uyuşturucu retentively burun boşluğunda geliştirilmiş olacaktır çünkü bu yöntem uyuşturucu teslim burun beyin rota üzerinden beyin içine geliştirebilirsiniz. Buna ek olarak, uyuşturucu dağıtım düzeyleri (% enjekte doz/g beyin için) radyo etiketli [14C] kullanarak beyin kantitatif değerlendirilmesi için bir yöntemi açıklamak-inulin [molekül ağırlığı (MW): 5.000], suda çözünen bir modeli substrat olarak oluştururlar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bu hayvan çalışma (#AP17P004) Nihon Üniversitesi hayvan bakım ve kullanım Komitesi (Tokyo, Japonya) tarafından onaylanmış yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi. Bu çalışmada (#17-0001) Nihon Üniversitesi Eczacılık Okulu radyoizotop Merkezi tarafından kabul edildi.
1. hayvanlar inhalasyon anestezi altında burunici yönetim için kullanılan
- Deneysel fareler altında 12-h açık/koyu döngüsü (ışık üzerinde saat 8 ' de – 8:00 arası), paslanmaz çelik kafeslerde tutulan 23 ± 1 ° C, nem % 50 ± % 10 ve gıda ve su ad libitum erişim, kontrollü bir sıcaklık ile ev.
- Deneme önce fareler % 2 isoflurane, % 4'lük bir konsantrasyon aşağıdaki başlangıcında inhalasyon yolu ile anestezi. Anesthetization gerekli düzeyde yüzey keşfetmiş kaybolması için kontrol ederek onaylayın.
2. yönetim çözümü hazırlanması
- Bir yönetim çözümü [14C] hazırlamak-fosfat tamponlu tuz çözeltisi içinde sulandrarak tarafından inulin (50 mikron, fare başına 0.5 μCi/mL) ve 4 ° C'de kadar kullanmak.
3. burunici idareleri fareler için
-
Geçici olarak açılabilir solunum maskesi kullanarak micropipette Yöntem (resim 1)
Not: Bu teknik Frey ve ark. tarafından kurulan bir micropipette etkilerinin yönetim iletişim kuralı'nı bir değişiklik olduğunu. 3- Fareler üzerinde bir corkboard sırtüstü pozisyonda onların bacaklarda % 2 isoflurane (Şekil 1A) ile inhalasyon anestezi altında taping tarafından tamir et.
- Toplam hacmi 25-μL yönetim çözümü için her fare fareler inhalasyon anestezi altında (Şekil 1B ve C) sabit iken alternatif olarak sol ve sağ burun deliklerin 1-2 μL dozlar ile 30-s aralıklarla yönetmek.
- Not: atık anestezik gaz maskesi açıldığında ve pasif yolla (atık anestezik gaz Canister) (duman hood, zor kanallı Biyogüvenlik kabini, vakum, vb) etkin yöntemlerle yaşlandırma ne zaman yumuk
-
Cannulation ters m yemek borusu yoluyla hava yolu taraftan alınan (Şekil 2)
Not: Bu teknik etkilerinin emme protokolü için rats Takoyakushi vd tarafından kurulan bir değişiklik olduğunu. 7- Fareler üzerinde bir corkboard sırtüstü pozisyonda onların bacaklarda % 2 isoflurane ile inhalasyon anestezi altında taping tarafından tamir et.
- Boyun saç tıraş ve bir alkol durulama tarafından takip betadin veya klorheksidin uygulaması aracılığıyla hazırlandı.
- Trakea ve yemek borusu küçük bir insizyon attım (1.5 cm) yaptıktan sonra forseps ile cilt altındaki boğaz genişleterek makasla ortaya çıkarmak.
- Bir kesik (1 mm) makas kullanarak borusunda olun.
- Bir kanül Ekle (iç çapı: 0,58 mm, dış çap: 0.965 mm) için 1.2 cm uzunluğunda ve solunum maskesi iç kanül karşı tarafındaki diğer ucuna iliştirin.
- Makas kullanarak borusunda bir kesi (1 mm) yapmak, bir kanül Ekle (iç çapı: 0,28 mm, dış çapı: 0,61 mm) için doğru burun boşluğuna arka kısmı 1.4 cm uzunluğunda ve (Şekil 2A ve B) ligate.
Not: Yordamlar 3.2.2-3.2.4 × 10 büyütmede stereoskopik mikroskop altında yapılmıştır. - Bir iğne (27G × 1/2) bir yönetim çözümü ile dolu bir 1-mL şırınga ekleyin ve programlanabilir bir mikro-şırınga pompa bağlayın.
- Yukarıda 3.2.5 (Şekil 2C), yemek borusu içine eklenen kanül iğneye takın.
- 25 μL [14C] toplam hacmi yönetmek-inulin çözüm sabit bir hızda (5 μL/dk) (Şekil 2C ve 2D).
4. kantitatif deney suda çözünen oluştururlar radyo etiketli kullanarak ([14C]-inulin)
- Anestezi altında deneysel fareler başını kesmek ve beyni zarar vermemesi için bakım sırasında makas kullanarak kendi craniums ve medulla oblongata tarafındaki açın.
- Dikkatle tüm beyin kafatası üzerinden bir mikro spatula kullanarak scooping ayıklayın.
- Yer bir filtre kağıdı üzerinde buz üzerinde depolanan bir petri serum fizyolojik solüsyonu ile nemlendirilmiş.
- Ayıklanan beyin üzerinde ıslatılmış Süzgeç kağıdı yerleştirin.
- En az [14C] etkisini ortadan kaldırmak için tuzlu çözüm ile ıslatılmış bir pamuk bez ile beyin yüzeyine kalarak kan yok etmek-inulin kan beyin yüzeyinde.
- Beyin hızla incelemek ve onları üç parçaya bölün: olfaktör ampul, cerebrum ve soğanı (pons dahil).
- Beyin örnekleri doku solubilizer 50 ° c için 1 h yerleştirin.
- Sıvı mercek kokteyl 10 μL beyin örnekleri için ekleyin.
- 25 μL aliquot mercek uygulanan çözüm radyoaktivite belirlemek için bir mercek şişe kokteyl içinde çözünmüş yönetim çözümünün aktarın.
- Disintegrations [14C] dakika radyoaktivite beyin örnek başına ölçmek ([14C] Xbeyin) ve uygulanan çözüm ([14C]inç dozX) uygun bir ile donatılmış bir sıvı mercek Counter 3H ve 14C. Crossover Düzeltme
5. veri analizi
- Aşağıdaki denklemi kullanarak uyuşturucu dağıtım düzeyleri (%) enjekte doz (kimlik %) için Hesapla:
ID % ⁄g beyin = ([14C] Xbeyin/ [14C]dozX) × 100,
nerede Xbeyin (dpm/g beyin) [14C] miktarı - inulin ölçülen beyin dokusunda ve Xinç doz (dpm/25 μL çözüm) [14C] konsantrasyonu ise - inulin çözümde burunici yönetimi için kullanılır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Şekil 3 gösterir [14C]-inulin düzeyleri (kimlik % ⁄g beyin) olfaktör ampul (A), cerebrum (B) ve (C) mevcut çalışmada değerlendirildi burunici yönetim iki tür kullanılarak elde soğanı. Pipet etkin yöntem teslim [14C] kullanarak burunici yönetim-inulin açılabilir solunum maskeleri (Şekil 1) kullanarak beyin içine. İnhalasyon anestezi altında nicel sonuçlar deneysel görülmemelidir varyasyon eksikliği düşük standart hata tarafından belirtildiği gibi muayene hayvanlar arasında ortaya koydu. Özofagus ters kanül burun boşluğuna yönetim yöntemi [14C] yönetmek için kullanıldığında - inulin inhalasyon anestezi (resim 2), önemli ölçüde daha yüksek düzeyleri [14C] altında - inulin gözlendi olfaktör ampul ( Şekil 3A), cerebrum (Şekil 3B) ve soğanı (Şekil 3 c), daha pipet yöntemi ile. Ayrıca, içinde beyin, daha yüksek [14C]-inulin düzeylerini belirgin burun beyin yolu daha cerebrum içinde söz konusu olfaktör ampul ve soğanı, algılandı.
Şekil 1: geçici olarak açılabilir solunum maskesi ile birlikte bir micropipette kullanarak burunici yönetim. (A) kapalı bir maske ile sabit bir fare yönetim ve (B) yakın çekim ve (C) tüm sayısı açılan maskesi önce bir pipet kullanarak burunici yönetim sırasında gösterilen fotoğraflar. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2: bir şırınga pompa kullanarak yemek borusu yoluyla hava yolu taraftan ters cannulation tarafından burunici yönetim. (A) cerrahi alan, (B) yakın çekim ve (C) tüm görüş ve (D) bir sabit fare düzeninin kanül iki tür sonra gösterilen fotoğrafları yemek borusu ve nefes borusu içine eklenen ve mikro şırıngada bir solunum maskesi bağlı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: Karşılaştırma [14C]-inulin düzeyleri olfaktör ampul (A), (B) cerebrum ve soğanı (C) aşağıdaki iki tür burunici yönetim. İnç-A ve inç-B micropipette Yöntem (Şekil 1) ve ters cannulation yöntemi (resim 2) etkilerinin yönetim için sırasıyla gösterir. Her yöntemle, [14C] 25 μL toplam hacmi-yönetilen inulin (50 mikron, 0.5 μCi/mL). İNÇ-B yönetim oranı 5 μL/dk oldu. Her sütun temsil eden ortalama ± S.E. (n = 4). p < 0,01 (öğrenci t-test) Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
İlaçlar burun beyin teslimini bu yolu BBB atlar bir doğrudan ulaşım yol gösterdiği için merkezi sinir sistemi bozuklukları üzerinde belirgin bir etkisi olması bekleniyor. Üç farklı burun beyin yolları tarihi8' e rapor edilmiştir. İlk Olfaktör mukoza burun mukozasında üzerinden ön için Olfaktör sinir geçer Olfaktör sinir yoludur. Ikinci solunum mukoza burun mukozasında üzerinden arka beyin, beyin sapı ile trigeminal sinir geçirir trigeminal sinir yoludur. Üçüncü Beyin bos üzerinden boyunca dağıtılır CSF yoludur. Burun beyin yolu BBB tarafından ve merkezi sinir sistemi8' e, biomedicines teslim aracı olarak engelledi eğilimindedir hidrofilik oluştururlar, yönetim ile ilgili görüşmelerde büyük ilgi gördü 9 , 10 , 11 , 12. ancak, az önceki çalışmalar açıkça küçük hayvanların burunici yönetim metodları aday ilaçlar burun beyin yolu üzerinden teslimini doğrulamak için anlatmıştık. Buna göre burun beyin vasıtalarının aday ilaçlar için tasarlama açısından önemli bir engeli temsil eden burun beyin ilaç teslimat mekanizmalarını için küçük hayvanlar, kullanma ile ilgili araştırma çok yavaş ilerlemeler kaydedilmiştir. Bu nedenle, bu çalışmada, biomedicines, merkezi sinir sistemi hastalıkları hedefleyen gibi çeşitli aday uyuşturucu dağıtım araştırmak için inhalasyon anestezi altında burunici yönetim için iki protokol geliştirdik. Ayrıca kantitatif değerlendirilmesi için kullanılan bir yöntem nitelendirdi.
Maskeler için yok gibi etkilerinin yönetimi tarafından Bu çalışmada geliştirilen geçici olarak açılabilir solunum maskeleri kullanarak pipet yöntemi, uyanış, olmadan kararlı anestezi hali hayvanlarla güvenilir yönetim gerçekleştirmek olanak verir olmak (Şekil 1) kaldırıldı. Bu tekniği kullanarak, suda çözünen makromolekül (inulin; teslimini gösterdi MW: 5.000) beyin. İnulin BBB nüfuz etmez gibi bir işaretleyici damar içi birim alanı (yaklaşık 10-15 μL/g beyin) sıçan beyin13olarak kullanılabilir. Biz küçük deneysel hata ile kantitatif mükemmel sonuçlar elde. [14C] düzeyini-inulin beyinde açıkça yüksek burunici yönetim sonra intravenöz Yönetim (veri gösterilmez) sonra. Buna göre kurduk bu teknik konular inhalasyon anestezi (Şekil 2) altında kalırken bir pipet kullanarak geleneksel yönetim sağlar burunici yönetim için uygun bir yaklaşım temsil eder. İnhalasyon anestezi nazal epitel membran etkiler ve sonuç olarak, geçirgenliği nazal epitel ile artırın. Daha fazla çalışmaları mayi yönetimi gibi geleneksel anestezi ile karşılaştırıldığında inhalasyon anestezi altında ters cannulation yöntemini kullanarak beyin teslim karakterize etmek için gereklidir.
Biz daha sonra MC etkilerini en aza indirmek için geliştirilmiştir yemek borusu yoluyla hava yolu taraftan ters cannulation üzerinden yönetim araştırdık. Rat, Takoyakushi'nın yöntemi özofagus kapatmak için ameliyat gerektirir ve sonra girişinden MC etkisi en aza indirmek için burun yönetmek için. Farelerde, fiziksel olarak cannulation burun girişinden gerçekleştirmek zordur ve etkilerinin yönetim hapşırma neden olabilir. Bizim ters cannulation yöntemi özofagus burun boşluğundan yemek borusu ve hava yolu cerrahi ile kapatın ve aynı anda burunici gerçekleştirmek mümkün olduğunu avantaja sahip bir mikro-şırınga pompa doğrudan takılan kanül bağlanır Yönetim. Mikro-şırınga pompa düzeltilmesi hassas dozaj oranları ve birimleri kullanarak yönetimini kolaylaştırır. Bu tekniği kullanarak, olfaktör ampul, cerebrum ve medulla oblongata farelerin pipet Yöntem (Şekil 3) kullanarak zaman daha anlamlı olarak daha yüksek düzeyde yönetilen hidrofilik oluştururlar kaydettik. Bu bir pipet kullanarak burunici yönetim ile çözüm pasif spontan solunum uygun olarak yönetilir çünkü öyle ki çözüm trakea ve yemek borusu doğru MC tarafından ortadan eğilimi gibi görünüyor. Buna ek olarak, bir özofagus ters kanül aracılığıyla nazal kavite içine yönetim ile çözüm aktif bir şırınga pompa burun boşluğuna kullanılarak yönetilir. Görünüşe göre bu yaklaşım önemli ölçüde daha yüksek bir dağıtım seviyelere beyinde önde gelen ilaç çözüm burun boşluğunda tutma artırır. Ayrıca, belirgin burun beyin yolu daha cerebrum içinde söz konusu olfaktör ampul ve soğanı, yönetilen çözüm yüksek düzeyde tespit ettik. Buna göre yönetim bir özofagus ters kanül aracılığıyla nazal kavite içine ilaç adaylarının burun beyin teslimini tam potansiyelini değerlendirmek için uygun bir yöntem olduğunu gösterdi.
Sonuç olarak, bu çalışmada geliştirdiğimiz burunici yönetim iki yöntem farmakokinetik burun beyin yolu üzerinden küçük hayvanlarda değerlendirmek için son derece yararlı teknikleri olması beklenebilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu çalışmada kısmen özel üniversite araştırma marka projeden MEXT tarafından desteklenen; bir Grant-in-Aid bilim (JSP'ler); tanıtımı için Japonya toplumdan bilimsel Research (C) (17 K 08249 [için T.K. ve TS]) için bir hibe için [için T.K.] [için T.S.] Biyokimya ilerleme ve Takeda Bilim Vakfı için Hamaguchi temelden kooperatif araştırma. Biz Bay Yuya Nito ve Bayan Akiko Asami deneyler onların değerli teknik yardım için teşekkür ederiz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ddY mouse | Japan SLC, Inc. | Male, 4-6 weeks, 20-30 g | |
| Isoflurane | Pfizer | v002139 | |
| Isoflurane setup | SHINANO manufacturing CO. LTD. | SN-487-OTAir, SN-489-4 | |
| Isoflurane mask | SHINANO manufacturing CO. LTD. | For small rodents | |
| Isoflurane mask (openable type) | SHINANO manufacturing CO. LTD. | Special orders | |
| Anesthesia Box | SHINANO manufacturing CO. LTD. | SN-487-85-02 | |
| Animal experiments scissors-1 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | B-27H | |
| Animal experiments scissors-2 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | B-13H | |
| Tweezers-1 | FINE SCIENCE TOOLS Inc. | 11272-30 | Dumont #7 Dumoxel |
| Tweezers-2 | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | A-12-1 | |
| Cannula tube (PE-50) | Becton, Dickinson and Company. | 5069773 | I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm |
| Cannula tube (SP-10) | NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD. | KN-392 | I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm |
| Shaver | MARUKAN, LTD. | DC-381 | |
| Stereoscopic microscope | Olympus Corporation | SZ61 | |
| Needle 27G 1/2 in 13 mm | TERUMO CORPORATION | NN-2738R | |
| 1 mL syringe | TERUMO CORPORATION | SS-01T | |
| Syringe pump | Neuro science | NE-1000 | |
| Cellulose membrane | Toyo Roshi Kaisya, Ltd. | 00011090 | |
| Micro spatula | Shimizu Akira Inc. | 91-0088 | |
| Micropipette (0.5-10 uL) | Eppendorf AG | Z368083 | |
| Pipette chip | Eppendorf AG | 0030 000.811 | |
| Tape | TimeMed Labeling System, Inc. | T-534-R | For fixing mouse |
| [14C]-Inulin | American Radiolabeled Chemicals Inc. | ARC0124A | 0.1 mCi/mL |
| EtOH | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | 054-00461 | |
| Liquid scintillation counter | Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc | Tri-Carb 4810TR |
References
- Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat. Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).
- Illum, L. Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system. European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).
- Hanson, L. R., Frey, W. H. 2nd Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease. BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).
- Chapman, C. D., et al. Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans. Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).
- Kanazawa, T. Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy. Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).
- Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route. Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).
- Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat. International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).
- Lochhead, J. J., Thorne, R. G. Intranasal delivery of biologics to the central nervous system. Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).
- Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. Strategies to deliver peptide drugs to the brain. Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).
- Kanazawa, T. Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles. Medical Devices. 8, 57-64 (2015).
- Kanazawa, T., et al. Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide. International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).
- Kamei, N., et al. Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse. Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).
- Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique. Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).
