Summary
Det foreliggende arbejde beskriver en eksperimentel protokol for transøsofageal atrieudbrud pacing for effektiv induktion af atrieflimren (AF) hos rotter. Protokollen kan bruges i rotter med sunde eller ombyggede hjerter, hvilket muliggør undersøgelse af AF-patofysiologi, identifikation af nye terapeutiske mål og evaluering af nye terapeutiske strategier.
Abstract
Dyreforsøg har bragt vigtig indsigt i vores forståelse vedrørende atrieflimren (AF) patofysiologi og terapeutisk styring. Reentry, en af de vigtigste mekanismer involveret i AF-patogenese, kræver en vis masse myokardievæv for at forekomme. På grund af atriernes lille størrelse har gnavere længe været betragtet som 'resistente' over for AF. Selvom spontan AF har vist sig at forekomme hos rotter, kræves langvarig opfølgning (op til 50 uger) for at arytmi kan forekomme i disse modeller. Det foreliggende arbejde beskriver en eksperimentel protokol for transøsofageal atriel burst pacing for hurtig og effektiv induktion af AF hos rotter. Protokollen kan med succes anvendes til rotter med sunde eller ombyggede hjerter i nærvær af en lang række risikofaktorer, der muliggør undersøgelse af AF-patofysiologi, identifikation af nye terapeutiske mål og evaluering af nye profylaktiske og / eller terapeutiske strategier.
Introduction
Atrieflimren (AF) er den mest almindelige vedvarende hjertearytmi, der opstår i klinisk praksis, og dens forekomst og prævalens fortsætter med at stige dramatisk på verdensplan1. Denne arytmi påvirker op til 4% af verdens befolkning ifølge nylige undersøgelser2. Men i betragtning af at paroxysmal AF kan være asymptomatisk og derfor kan undslippe detektion, vil den sande forekomst af AF sandsynligvis være meget højere end den, der præsenteres i litteraturen.
AF's patofysiologi er blevet intensivt undersøgt. Ikke desto mindre forbliver de underliggende mekanismer i denne komplekse arytmi ufuldstændigt belyst, og dette afspejler sig i de begrænsede terapeutiske muligheder med tvivlsom effekt. Dyreforsøg har bragt vigtig indsigt i vores forståelse vedrørende AF patofysiologi og terapeutisk ledelse. Reentry, en af de vigtigste mekanismer involveret i AF-patogenese3, kræver en vis masse myokardievæv for at kunne forekomme. Således har store dyr generelt været foretrukket i AF-undersøgelser, mens gnavere på grund af deres atriers ringe størrelse længe har været betragtet som "resistente" over for AF. Brugen af store dyr hæmmes dog mest af håndteringsvanskeligheder. I mellemtiden, selvom spontan AF har vist sig at forekomme hos rotter4, kræves langvarig opfølgning (op til 50 uger) for at arytmi kan forekomme i disse modeller5. Modeller, der sikrer hurtig AF-forekomst hos små gnavere, er også blevet udviklet. Oftest bruger disse modeller akut elektrisk stimulering, ofte i nærvær af andre begunstigende tilstande, såsom samtidig parasympatisk stimulering eller kvælning, til kunstigt at inducere AF 6,7. Selv om sådanne modeller er effektive, tillader de ikke evaluering af kritiske AF-relaterede egenskaber, såsom den progressive elektriske, strukturelle, autonome eller molekylære ombygning af atrierne, eller virkningerne af konventionelle eller ikke-konventionelle antiarytmiske lægemidler på det atriale substrat eller på risikoen for ventrikulær proarytmi 8,9.
Det foreliggende arbejde beskriver en eksperimentel protokol for langsigtet transøsofageal atriel burst pacing for hurtig og effektiv induktion af AF hos rotter. Protokollen er velegnet til både akutte og langsigtede undersøgelser og kan med succes anvendes til rotter med sunde eller ombyggede hjerter i nærvær af en lang række risikofaktorer, der muliggør undersøgelse af AF-patofysiologi, identifikation af nye terapeutiske mål og evaluering af nye profylaktiske og / eller terapeutiske strategier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Procedurer, der involverer dyreforsøgspersoner, blev godkendt af den etiske komité ved University of Medicine, Pharmacy, Science and Technology "George Emil Palade" i Târgu Mureș, af den rumænske nationale sundheds- og fødevaresikkerhedsautoritetsmyndighed og overholdt retningslinjerne fra Det Internationale Råd for Laboratoriedyrevidenskab (direktiv 2010/63/EU).
1. Transesophageal atrial burst pacing protokol
- Randomiser voksne mandlige Wistar-rotter (200-400 g kropsvægt) i to grupper: STIM og SHAM.
- Anæstesi dyrene.
- Til induktion skal du bruge 2,5% isofluran, 4 L/min, 99,5%O2.
- Til vedligeholdelse skal der anvendes en blanding af ketamin/medetomidin (75,0/0,5 mg/kg) administreret intraperitonealt.
- Kontroller dybden af anæstesien ved at teste hornhinderefleksen (5% glucoseopløsning) og den nociceptive tilbagetrækningsrefleks (tåklemme). Overvåg respirationsfrekvensen (et fald på 50% er acceptabelt under anæstesi; normal hastighed er mellem 70-120 vejrtrækninger / minut) og kropstemperaturen ved hjælp af et rektalt termometer (normal temperatur er mellem 96,5 - 99,5 ° F eller 35,9 - 37,5 ° C).
BEMÆRK: Fortsæt proceduren først, når effektiviteten af anæstesi er bekræftet. Overvåg dybden af anæstesi med jævne mellemrum i hele protokollen. Gentag intraperitoneal ketamin/medetomidininjektionen, når det er nødvendigt. - Påfør en oftalmisk salve på begge øjne for at forhindre hornhindeskader.
- Læg dyret i liggende stilling og læg det på en varmepude for at holde kropstemperaturen på ~ 37 ° C.
- Fastgør de tre overflade-EKG-elektroder til rottelemmerne i en bly II-konfiguration (figur 1A).
- Placer den negative elektrode på højre forben.
- Placer den positive elektrode på venstre bagben.
- Placer jordingselektroden på venstre forben.
- Fastgør elektroderne på plads ved hjælp af tynde elastiske armbåndssnore.
- Tænd for EKG-optagelse på overfladen, og udfør kontinuerlig EKG-optagelse under hele proceduren (figur 1B) ved hjælp af et kommercielt eller et lokalt udviklet anskaffelsesprogram10.
- Til elektrisk stimulering skal du bruge et 5-6 F quadripolært kateter, der er forbundet til en mikrocontrollerbaseret hjertepacemaker10.
- Når dyret er anæstesi, skal du indsætte kateteret gennem mundhulen i spiserøret. Mål afstanden mellem de øvre fortænder og hjertet (vurderet ved palpation) for at tilnærme sig dybden, hvor kateteret skal indsættes i spiserøret.
FORSIGTIG: Pas på ikke at tvinge kateteret, da der er risiko for spiserørsperforering. - Bekræft den korrekte position af stimuleringskateteret på atriernes niveau som følger.
- Påfør elektrisk stimulering med en frekvens på 400 stimuli / minut (stimulusvarighed 6 ms).
- Kontroller, om EKG-sporingen viser konstant indfangning af atrierne (dvs. hver elektrisk stimulus efterfølges af et smalt QRS-kompleks) (figur 2).
- Bestem den diastoliske tærskel - dvs. den laveste spænding, der kræves for at opnå atriel indfangning (generelt mellem 10 V og 20 V).
BEMÆRK: Udfør følgende for dyrene i STIM-gruppen. - Når kateterets korrekte position er bestemt, indstilles stimulatoren til en frekvens på 4.000 stimuli/minut (stimulusvarighed 6 ms) ved en spænding 3 V over den diastoliske tærskel (figur 3).
- Påfør på hvert dyr 15 på hinanden følgende stimuleringscyklusser, 20 s hver, med et frit interval på 5 minutter mellemcyklus 11. Afhængigt af undersøgelsesmålene gentages protokollen for hver rotte i 10 dage med en hastighed på 5 dage/uge på samme tid hver dag.
- Kontroller effektiviteten af stimuleringen som følger.
- Identificer sinusknudegenvindingstiden (SNRT), som vises i slutningen af det hurtige tempo som et tidsinterval, der er længere end cykluslængden registreret under sinusrytmen (figur 4A) og repræsenterer det tidsinterval, der kræves for genoptagelse af sinusrytmen, efter at overdrive-undertrykkelsen er afsluttet.
BEMÆRK: Overdrive-undertrykkelse repræsenterer hæmningen af sinusknudeaktivitet ved elektrisk at stimulere hjertet med en hastighed, der er højere end den indre rytme. - Identificer forekomsten af AF-episoden, som her defineres som tilstedeværelsen af tre eller flere på hinanden følgende uregelmæssige, supraventrikulære slag (dvs. uregelmæssig ventrikulær respons med smalle QRS-komplekser), hvor P-bølger er fraværende eller erstattet af små, forvrængede "f" -bølger (figur 4B).
- Identificer sinusknudegenvindingstiden (SNRT), som vises i slutningen af det hurtige tempo som et tidsinterval, der er længere end cykluslængden registreret under sinusrytmen (figur 4A) og repræsenterer det tidsinterval, der kræves for genoptagelse af sinusrytmen, efter at overdrive-undertrykkelsen er afsluttet.
- Hvis AF-episoden ikke slutter spontant, når den næste stimuleringscyklus skal udføres (dvs. ved udgangen af de fem frie minutter mellem cyklusserne), må du ikke anvende den næste stimulering.
- Vent i yderligere 5 minutter. Hvis AF-episoden stadig fortsætter efter de 10 minutter, skal du afslutte protokollen for den pågældende dag.
BEMÆRK: Hvis der ønskes en evaluering af sværhedsgraden af elektrisk induceret AF, kan der udføres længere EKG-overvågning.
- Vent i yderligere 5 minutter. Hvis AF-episoden stadig fortsætter efter de 10 minutter, skal du afslutte protokollen for den pågældende dag.
- Hvis der opstår alvorlig bradykardi eller asystol i slutningen af stimuleringen (dvs. på grund af elektrisk stimulering af vagusnerven), skal du afslutte protokollen. Hvis den elektriske aktivitet ikke vender tilbage til normal hurtigt, skal du udføre ekstern hjertemassage og administrere atropinsulfat (0,05 mg / kg) intraperitonealt.
- Ved afslutningen af proceduren vendes anæstesien med atipamezol (1 mg/kg) administreret intraperitonealt. Hus rotterne individuelt i rene bure med supplerende varme og observer med jævne mellemrum, indtil de er fuldt genoprettet. Der kræves ingen anden specifik dyrepleje i slutningen af protokollen.
- Analyser overflade-EKG-sporinger, og bestem følgende.
- Fremkaldeligheden af AF, som udtrykkes i procent (dvs. [antal stimuleringscyklusser efterfulgt af AF-episoder / det samlede antal anvendte stimuleringscyklusser] x 100).
- Varigheden af hver AF-episode.
- Tilstedeværelsen af 'vedvarende' (dvs. >10 min) AF-episoder.
BEMÆRK: Udfør følgende for dyrene i SHAM-gruppen.
- For rotterne i SHAM-gruppen skal du følge trin 1.1 til 1.7 som beskrevet ovenfor uden at anvende nogen elektrisk stimulering.
- Hold kateteret på plads i 80 minutter (dvs. den tid, der kræves for at fuldføre protokollen i STIM-rotter) uden at anvende nogen elektrisk stimulering, mens du kontinuerligt registrerer overflade-EKG.
- Ved afslutningen af proceduren vendes anæstesien med atipamezol (1 mg / kg). Der kræves ingen anden specifik dyrepleje i slutningen af protokollen.
- Analysér overflade-EKG-sporingerne, og bestem de parametre, der er beskrevet i trin 1.16.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
I en proof-of-concept-undersøgelse blev 22 voksne Wistar-hanrotter (200-400 g) tilfældigt fordelt i to grupper: STIM (n = 15) og SHAM (n = 7). Alle dyr blev opholdt individuelt i polycarbonatbure i et klimakontrolleret rum (21-22 °C) med fri adgang til vand og tørfoder under hele undersøgelsen. Den ovenfor beskrevne transesophageal stimulationsprotokol blev anvendt på alle dyr i 10 dage, 5 dage om ugen. Alle dyr gennemgik den samme protokol, bortset fra at rotterne i SHAM-gruppen ikke modtog aktiv elektrisk stimulering.
Som forventet blev der ikke induceret episoder af AF i SHAM-dyrene i hele protokollen. Derfor kunne ingen andre parametre (dvs. varigheden af AF-episoder og tilstedeværelsen af "vedvarende" AF-episoder) evalueres i denne gruppe.
På den første stimuleringsdag præsenterede 12 (80%) af de 15 STIM-dyr AF-episoder (relativ risiko = 3,33, p < 0,001 vs. SHAM-gruppen ved hjælp af Fishers nøjagtige test). I STIM-rotterne blev 42 ud af 164 stimuleringscyklusser, der blev anvendt på den første stimuleringsdag, efterfulgt af AF-episoder (median inducerbarhed på 20% [interkvartilområde på 6,67-72,22] vs. 0% i SHAM-gruppen) (figur 5).
I løbet af de 10 dages protokol blev AF effektivt induceret i alle dyr (figur 6). Et gennemsnit på 15,6 ± 8,7 episoder af AF blev induceret i STIM-dyrene i hele protokollens varighed. Af det samlede antal anvendte stimuleringscyklusser blev 20,05% efterfulgt af AF, og 41 (17,30%) episoder af AF varede mere end 600 s. Den gennemsnitlige varighed af AF-episoder, der varer mindre end 600 s, er 40,12 s (tabel 1).
Figur 1: Overflade-EKG-optagelse. (A) EKG-elektroder positionering - to på forbenets niveau og en på dyrets venstre bagben. (B) Overflade-EKG-sporing, der registreres, før elektrisk stimulering påføres. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: EKG-sporing, der bekræfter indfangning af atrierne. EKG-sporingen bekræfter kateterets korrekte position, dvs. et smalt QRS-kompleks observeres efter hver elektrisk stimulus med en frekvens på 400 stimuli / minut. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Mikrocontroller-baserede hjertepacemakerindstillinger. Stimuleringsparametre indstilles til en frekvens på 4.000 stimuli / minut (ppm: impulser pr. Minut), stimulusvarighed på 6 ms (WDTh: bredde) og spænding på 11 V (dvs. 3 V over den diastoliske tærskel). Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: EKG-sporinger, der bekræfter effektiviteten af stimuleringsprotokollen. (A) Sinusknudegenopretningstiden (SNRT). Bemærk, at tidsintervallet ved ophør af stimulering (SNRT) er længere end cykluslængden registreret under sinusrytme (RR-interval, dvs. intervallet mellem R-bølgerne i to på hinanden følgende QRS-komplekser, der repræsenterer varigheden af en hjertecyklus). (B) Udseendet af en atrieflimren episode efter afslutningen af den atriale elektriske stimuleringscyklus. Bemærk de uregelmæssige, smalle QRS-komplekser, fraværet af P-bølger og de små, forvrængede "f" -bølger. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Inducerbarhed af atrieflimren (AF) på den første stimuleringsdag i STIM-grupperne (n = 15) og SHAM (n = 7). Data udtrykkes som median og interkvartilområde. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: Gennemsnitlig daglig inducerbarhed af atrieflimren i løbet af de 10 dage, stimuleringsprotokollen i STIM-rotterne.
| Elektrisk inducerede atrieflimren episoder (n = 237) | Antal (%) | Gennemsnitlig varighed (sekunder) |
| varighed ≥600 sekunder | 41 (17.30%) | - |
| varighed < 600 sekunder | 196 (82.70%) | 40.12 |
Tabel 1: Tidsmæssige parametre for elektrisk inducerede 'vedvarende' og 'ikke-vedvarende' atrieflimren episoder i STIM-gruppen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dette papir beskriver en eksperimentel protokol for langsigtet transøsofageal atriel burst pacing for hurtig og effektiv induktion af AF hos rotter, egnet til både akutte og langsigtede AF-undersøgelser. Den 10-dages stimuleringsprotokol, der er beskrevet heri, er med succes blevet anvendt til at udvikle en 'sekundær spontan AF-model' (dvs. en model, hvor AF efter en periode med AF-induktion ved elektrisk stimulering udvikler sig spontant)10. Protokollens varighed kan dog variere afhængigt af det nøjagtige formål med undersøgelsen.
Andre parametre, såsom størrelsen på stimuleringskateteret, kan også justeres afhængigt af dyrenes størrelse. Der skal dog sørges for at undgå brug af for store katetre, da de kan forårsage pres på luftrøret og hindre normal vejrtrækning. For 200-400 g rotter forårsager 5-6 F katetre ubetydeligt tryk på luftrøret og tillader protokollen at blive implementeret uden behov for endotracheal intubation.
Et vigtigt trin i protokollen er den korrekte placering af stimuleringskateteret inde i spiserøret på niveauet af atrierne (trin 1.7). Dette trin bør kun udføres efter omhyggelig kontrol af dybden af anæstesien, da mangel på effektiv anæstesi øger risikoen for hjerte-åndedrætsstop under de følgende trin i protokollen. Overvågning af hjertets elektriske aktivitet ved hjælp af overflade-EKG giver generelt tilstrækkelige data til at bekræfte, at kateteret er korrekt placeret inde i spiserøret (dvs. stimulering med en frekvens, der er højere end den iboende puls, illustrerer overdrive-undertrykkelsesfænomenet på sinusknuden, og hver stimulus efterfølges af et smalt QRS-kompleks). Udførelse af esophageal elektrokardiogramoptagelser kan dog bruges til yderligere at bekræfte den korrekte position af stimuleringskateteret.
I betragtning af den normale baseline-puls for Wistar-rotter12 er det vigtigt at udføre den indledende stimulering med en frekvens, der er højere end rotternes egen puls (dvs. >400 stimuli/minut) for at sikre konstant indfangning af atrierne (trin 1.8). I løbet af dette trin skal stimuleringsfrekvensen tilpasses hvert dyrs baseline puls. I nærvær af en korrekt stimuleringshastighed kan manglen på konstant atriel indfangning skyldes enten forkert placering af kateteret eller stimulering ved en spænding under den diastoliske tærskel (trin 1.9). Begge scenarier kan resultere i ineffektiv stimulering og protokolfejl. Da variationer i kropstemperaturen kan fremme hjertearytmier13, bør man være opmærksom på at opretholde konstant kropstemperatur (37 °C) under hele proceduren.
Teknikken beskrevet heri har også en række begrænsninger. I betragtning af vagusnervens anatomiske nærhed til spiserøret kan samtidig elektrisk stimulering af vagusnerven forekomme under protokollen, hvilket øger risikoen for hjerte-åndedrætsstop. Derudover skal man huske på, at parasympatisk stimulering sandsynligvis også vil bidrage til AF-forekomst i denne model, og at andre modeller kan være mere passende til undersøgelser, der sigter mod at evaluere og / eller manipulere det autonome nervesystem.
Dyremodeller spiller fortsat en vigtig rolle i optrævlingen af de patofysiologiske mekanismer, der ligger til grund for AF, og i forbedringen af terapeutiske strategier. En ideel dyre-AF-model skal være hurtig og nem at genskabe, reproducerbar og bør så meget som muligt efterligne den patologi, der observeres hos mennesker14. Hos gnavere består de fleste AF-modeller i akut AF-induktion, oftest i nærvær af andre favoriserende faktorer, ud over elektrisk stimulering af atrierne 6,15. Sådanne modeller kan imidlertid ikke vurdere rollen som progressiv atriel ombygning i AF-patofysiologi, kan ikke teste de langsigtede virkninger af forskellige antiarytmiske lægemidler og kan ikke vurdere den ventrikulære proarytmiske risiko forbundet med kronisk antiarytmisk behandling 8,9. I andre undersøgelser16 blev en enkelt stimuleringsprotokol anvendt på kronisk ombyggede, AF-tilbøjelige atrier. Selv om denne strategi overvinder nogle af disse ulemper, tager den ikke hensyn til AF's indvirkning i sig selv på atriel proarytmisk ombygning og på fremtidig AF-forekomst 8,9. I mellemtiden inducerer langvarig (f.eks. 10 dage) anvendelse af den transesophageale atrielle pacingprotokol, der er beskrevet ovenfor, progressiv atriel proarytmisk ombygning og skaber det atrielle miljø, der kræves til spontan forekomst af AF, efter at stimuleringsprotokollerne er afsluttet10.
Den eksperimentelle model, der er beskrevet heri, kan derfor effektivt anvendes ikke kun til vurdering af akut AF-induktion, men også til at skabe en model af (sekundær) spontan AF. Denne model giver derfor en række store fordele, idet den skaber forudsætningerne for en bedre forståelse af de mekanismer, der er involveret i forekomsten og vedligeholdelsen af AF, samt for at identificere og afprøve nye terapeutiske strategier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af en bevilling fra det rumænske ministerium for uddannelse og forskning, CNCS - UEFISCDI, projektnummer PN-III-P1-1.1-TE-2019-0370, inden for PNCDI III.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Antisedan (Atipamezole Hydrochloride) 5mg / mL, solution for injection | Orion Corporation | 06043/4004 | for Rats use 1 mg / kg |
| Dormitor (Medetomidine Hydrochloride) 1 mg / mL, solution for injection | Orion Corporation | 06043/4003 | for Rats use 0.5 mg / kg |
| E-Z Anesthesia Single Animal System | E-Z Systems Inc | EZ-SA800 | Allows the manipulation of one animal at a time |
| Isoflurane 99.9%, 100 mL | Rompharm Company | N01AB06 | |
| Ketamine 10%, 25 mL | for Rats use 75 mg / kg | ||
| Microcontroller-based cardiac pacemaker for small animals | Developed in our laboratory (See Reference number 10 in the manuscript) | ||
| Surface ECG recording system | Developed in our laboratory (See Reference number 10 in the manuscript) |
References
- Kornej, J., Börschel, C. S., Benjamin, E. J., Schnabel, R. B. Epidemiology of atrial fibrillation in the 21st century: Novel methods and new insights. Circulation Research. 127 (1), 4-20 (2020).
- Hindricks, G., et al. 2020 ESC Guidelines for the diagnosis and management of atrial fibrillation developed in collaboration with the European Association for Cardio-Thoracic Surgery (EACTS): The Task Force for the diagnosis and management of atrial fibrillation of the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal. 42 (5), 373 (2021).
- Veenhuyzen, G. D., Simpson, C. S., Abdollah, H. Atrial fibrillation. Canadian Medical Association Journal. 171 (7), 755-760 (2004).
- Lau, D. H., et al. Atrial arrhythmia in ageing spontaneously hypertensive rats: unraveling the substrate in hypertension and ageing. PloS One. 8 (8), 72416 (2013).
- Scridon, A., et al. Unprovoked atrial tachyarrhythmias in aging spontaneously hypertensive rats: The role of the autonomic nervous system. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (3), 386-392 (2012).
- Haugan, K., Lam, H. R., Knudsen, C. B., Petersen, J. S. Atrial fibrillation in rats induced by rapid transesophageal atrial pacing during brief episodes of asphyxia: a new in vivo model. Journal of Cardiovascular Pharmacology. 44 (1), 125-135 (2004).
- Sugiyama, A., Takahara, A., Honsho, S., Nakamura, Y., Hashimoto, K. A simple in vivo atrial fibrillation model of rat induced by transesophageal atrial burst pacing. Journal of Pharmacological Sciences. 98 (3), 315-318 (2005).
- Scridon, A. Dissociation between animal and clinical studies. where do we go wrong. Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 497-500 (2021).
- Mulla, W., et al. Rapid atrial pacing promotes atrial fibrillation substrate in unanesthetized instrumented rats. Frontiers in Physiology. 10, 1218 (2019).
- Scridon, A., et al. Spontaneous atrial fibrillation after long-term transesophageal atrial burst pacing in rats. Technical and procedural approach to a new in vivo atrial fibrillation model. Romanian Journal of Laboratory Medicine. 26 (1), 105-112 (2018).
- Halatiu, V. B., et al. Chronic exposure to high doses of bisphenol A exhibits significant atrial proarrhythmic effects in healthy adult rats. Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 587-595 (2021).
- Zaciragić, A., Nakas-ićindić, E., Hadzović, A., Avdagić, N. Average values of electrocardiograph parameters in healthy, adult Wistar rats. Medical Archives. 58 (5), 268-270 (2004).
- Cheshire, W. P. Thermoregulatory disorders and illness related to heat and cold stress. Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical. 196, 91-104 (2016).
- Șerban, R. C., Scridon, A. Data linking diabetes mellitus and atrial fibrillation-how strong is the evidence? From epidemiology and pathophysiology to therapeutic implications. Canadian Journal of Cardiology. 34 (11), 1492-1502 (2018).
- Nishida, K., Michael, G., Dobrev, D., Nattel, S. Animal models for atrial fibrillation: clinical insights and scientific opportunities. Europace. 12 (2), 160-172 (2010).
- Qiu, H., et al. DL-3-n-Butylphthalide reduces atrial fibrillation susceptibility by inhibiting atrial structural remodeling in rats with heart failure. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 391 (3), 323-334 (2018).
