Summary
Föreliggande arbete beskriver ett experimentellt protokoll för transesofageal förmakssprängning för effektiv induktion av förmaksflimmer (AF) hos råttor. Protokollet kan användas på råttor med friska eller ombyggda hjärtan, vilket möjliggör studier av AF-patofysiologi, identifiering av nya terapeutiska mål och utvärdering av nya terapeutiska strategier.
Abstract
Djurstudier har gett viktiga insikter i vår förståelse när det gäller patofysiologi för förmaksflimmer (AF) och terapeutisk hantering. Återinträde, en av de viktigaste mekanismerna som är involverade i AF-patogenes, kräver en viss massa myokardvävnad för att kunna inträffa. På grund av förmakens lilla storlek har gnagare länge ansetts vara "resistenta" mot AF. Även om spontan AF har visat sig förekomma hos råttor krävs långtidsuppföljning (upp till 50 veckor) för att arytmin ska uppstå i dessa modeller. Föreliggande arbete beskriver ett experimentellt protokoll för transesofageal förmakssprängning för snabb och effektiv induktion av AF hos råttor. Protokollet kan framgångsrikt användas hos råttor med friska eller ombyggda hjärtan, i närvaro av en mängd olika riskfaktorer, vilket möjliggör studier av AF-patofysiologi, identifiering av nya terapeutiska mål och utvärdering av nya profylaktiska och / eller terapeutiska strategier.
Introduction
Förmaksflimmer (AF) är den vanligaste ihållande hjärtarytmi som påträffas i klinisk praxis och dess förekomst och prevalens fortsätter att öka dramatiskt över hela världen1. Denna arytmi påverkar upp till 4% av världens befolkning enligt nyligen genomförda studier2. Men med tanke på att paroxysmal AF kan vara asymptomatisk och därför kan undgå upptäckt, är den verkliga förekomsten av AF sannolikt mycket högre än den som presenteras i litteraturen.
AF:s patofysiologi har studerats intensivt. Ändå förblir de underliggande mekanismerna för denna komplexa arytmi ofullständigt belysta och detta återspeglas i de begränsade terapeutiska alternativen, med tvivelaktig effekt. Djurstudier har gett viktiga insikter i vår förståelse när det gäller AF-patofysiologi och terapeutisk hantering. Återinträde, en av de viktigaste mekanismerna som är involverade i AF-patogenes3, kräver en viss massa myokardvävnad för att kunna inträffa. Således har stora djur i allmänhet föredragits i AF-studier, medan gnagare på grund av den lilla storleken på deras förmak länge har ansetts vara "resistenta" mot AF. Användningen av stora djur hindras dock främst av hanteringssvårigheter. Under tiden, även om spontan AF har visat sig förekomma hos råttor4, krävs långtidsuppföljning (upp till 50 veckor) för att arytmin ska inträffa i dessa modeller5. Modeller som säkerställer snabb AF-förekomst hos små gnagare har också utvecklats. Oftast använder dessa modeller akut elektrisk stimulering, ofta i närvaro av andra gynnande tillstånd, såsom samtidig parasympatisk stimulering eller kvävning, för att artificiellt inducera AF 6,7. Även om de är effektiva tillåter sådana modeller inte utvärdering av kritiska AF-relaterade egenskaper, såsom progressiv elektrisk, strukturell, autonom eller molekylär ombyggnad av förmaken, eller effekterna av konventionella eller icke-konventionella antiarytmiska läkemedel på förmakssubstratet eller på risken för ventrikulär proarytmi 8,9.
Föreliggande arbete beskriver ett experimentellt protokoll för långsiktig transesofageal förmakssprängning för snabb och effektiv induktion av AF hos råttor. Protokollet är lämpligt för både akuta och långsiktiga studier och kan framgångsrikt användas på råttor med friska eller ombyggda hjärtan, i närvaro av en mängd olika riskfaktorer, vilket möjliggör studier av AF-patofysiologi, identifiering av nya terapeutiska mål och utvärdering av nya profylaktiska och / eller terapeutiska strategier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Förfaranden som involverar djurförsökspersoner godkändes av etikkommittén vid University of Medicine, Pharmacy, Science and Technology "George Emil Palade" i Târgu Mureș, av den rumänska nationella sanitära veterinär- och livsmedelssäkerhetsmyndigheten och följde Internationella rådet för laboratoriedjursvetenskapliga riktlinjer (direktiv 2010/63/EU).
1. Transesofagealt förmakssprängningspacingprotokoll
- Randomisera vuxna manliga Wistar-råttor (200-400 g kroppsvikt) i två grupper: Stim och SHAM.
- Bedöva djuren.
- För induktion, använd 2,5% isofluran, 4 L/min, 99,5%O2.
- För underhåll, använd en blandning av ketamin/medetomidin (75,0/0,5 mg/kg) administrerat intraperitonealt.
- Kontrollera anestesins djup genom att testa hornhinnereflexen (5% glukoslösning) och nociceptiv abstinensreflex (tåklämma). Övervaka andningsfrekvensen (ett fall på 50% är acceptabelt under anestesi; normal hastighet är mellan 70-120 andetag / minut) och kroppstemperaturen med hjälp av en rektal termometer (normal temperatur är mellan 96,5 - 99,5 ° F eller 35,9 - 37,5 ° C).
OBS: Fortsätt proceduren först efter att effektiviteten av anestesi har bekräftats. Övervaka anestesidjupet regelbundet under hela protokollet. Upprepa intraperitoneal ketamin / medetomidin injektion vid behov. - Applicera en oftalmisk salva på båda ögonen för att förhindra hornhinneskador.
- Lägg djuret i ryggläge och placera det på en värmedyna för att hålla kroppstemperaturen vid ~ 37 ° C.
- Fäst de tre yt-EKG-elektroderna på råttbenen i en bly II-konfiguration (figur 1A).
- Placera den negativa elektroden på höger framben.
- Placera den positiva elektroden på vänster bakben.
- Placera jordningselektroden på vänster framben.
- Fäst elektroderna på plats med tunna elastiska armbandssträngsnören.
- Slå på yt-EKG-inspelningen och utför kontinuerlig EKG-inspelning under hela proceduren (figur 1B) med hjälp av ett kommersiellt eller lokalt utvecklat förvärvsprogram10.
- För elektrisk stimulering, använd en 5-6 F fyrpolär kateter ansluten till en mikrokontrollerbaserad hjärtpacemaker10.
- När djuret är sövt, sätt in katetern genom munhålan, i matstrupen. Mät avståndet mellan de övre snedställningarna och hjärtat (bedömt genom palpation) för att approximera djupet vid vilket katetern ska sättas in i matstrupen.
VARNING: Var försiktig så att du inte tvingar katetern eftersom det finns risk för matstrupen perforering. - Bekräfta den korrekta positionen för stimuleringskatetern vid förmakens nivå enligt följande.
- Applicera elektrisk stimulering med en frekvens av 400 stimuli / minut (stimulansvaraktighet 6 ms).
- Kontrollera om EKG-spårningen visar konstant fångst av förmaken (dvs. varje elektrisk stimulans följs av ett smalt QRS-komplex) (Figur 2).
- Bestäm den diastoliska tröskeln - dvs den lägsta spänningen som krävs för att erhålla förmaksupptagning (i allmänhet mellan 10 V och 20 V).
OBS: Utför följande för djuren i Stim-gruppen. - När kateterns korrekta position har bestämts, ställ in stimulatorn till en frekvens på 4 000 stimuli / minut (stimulansvaraktighet 6 ms), vid en spänning 3 V över den diastoliska tröskeln (Figur 3).
- Applicera på varje djur 15 på varandra följande stimuleringscykler, 20 s vardera, med ett fritt intervall på 5 minuter mellancyklerna 11. Beroende på studiemålen, upprepa protokollet för varje råtta i 10 dagar, med en hastighet av 5 dagar / vecka, vid samma tidpunkt varje dag.
- Kontrollera stimuleringens effektivitet enligt följande.
- Identifiera sinusnodens återhämtningstid (SNRT), som visas i slutet av den snabba takten som ett tidsintervall som är längre än cykellängden som registrerats under sinusrytmen (figur 4A) och representerar det tidsintervall som krävs för återupptagande av sinusrytmen efter att överväxelns undertryckande slutar.
OBS: Overdrive suppression representerar hämningen av sinusnodaktivitet genom att elektriskt stimulera hjärtat i en takt som är högre än den inneboende rytmen. - Identifiera förekomsten av AF-episoden, som här definieras som närvaron av tre eller flera på varandra följande oregelbundna, supraventrikulära slag (dvs. oregelbundet ventrikelsvar med smala QRS-komplex), med P-vågor frånvarande eller ersatta av små, förvrängda "f" -vågor (figur 4B).
- Identifiera sinusnodens återhämtningstid (SNRT), som visas i slutet av den snabba takten som ett tidsintervall som är längre än cykellängden som registrerats under sinusrytmen (figur 4A) och representerar det tidsintervall som krävs för återupptagande av sinusrytmen efter att överväxelns undertryckande slutar.
- Om AF-episoden inte slutar spontant när nästa stimuleringscykel ska utföras (dvs. i slutet av de fem fria minuterna mellan cyklerna), applicera inte nästa stimulering.
- Vänta ytterligare 5 minuter. Om AF-avsnittet fortfarande fortsätter efter dessa 10 minuter, avsluta protokollet för den dagen.
OBS: Om utvärdering av svårighetsgraden av elektriskt inducerad AF önskas kan längre EKG-övervakning utföras.
- Vänta ytterligare 5 minuter. Om AF-avsnittet fortfarande fortsätter efter dessa 10 minuter, avsluta protokollet för den dagen.
- Om svår bradykardi eller asystol uppträder i slutet av stimuleringen (dvs på grund av elektrisk stimulering av vagusnerven), avsluta protokollet. Om den elektriska aktiviteten inte snabbt återgår till det normala, utför extern hjärtmassage och administrera atropinsulfat (0,05 mg /kg) intraperitonealt.
- Vid slutet av proceduren, vänd anestesin med atipamezol (1 mg / kg) administrerat intraperitonealt. Hus råttorna individuellt i rena burar med extra värme och observera regelbundet tills de är helt återställda. Ingen annan specifik djurvård krävs i slutet av protokollet.
- Analysera yt-EKG-spårningarna och bestäm följande.
- Inducerbarheten av AF som uttrycks i procent (dvs . [antal stimuleringscykler följt av AF-episoder / totalt antal applicerade stimuleringscykler] x 100).
- Varaktigheten för varje AF-episod.
- Förekomsten av "ihållande" (dvs >10 min) AF-episoder.
OBS: Utför följande för djuren i SHAM-gruppen.
- För råttorna i SHAM-gruppen, följ steg 1.1 till 1.7 enligt beskrivningen ovan, utan att använda någon elektrisk stimulering.
- Håll katetern på plats i 80 min (dvs den tid som krävs för att fylla i protokollet hos Stim-råttor) utan att applicera någon elektrisk stimulering, samtidigt som yt-EKG kontinuerligt registreras.
- Vid slutet av proceduren, vänd anestesi med atipamezol (1 mg / kg). Ingen annan specifik djurvård krävs i slutet av protokollet.
- Analysera yt-EKG-spårningarna och bestäm parametrarna som beskrivs i steg 1.16.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
I en proof-of-concept-studie tilldelades 22 vuxna wistar-hanråttor (200-400 g) slumpmässigt i två grupper: Stim (n = 15) och SHAM (n = 7). Alla djur hölls individuellt i polykarbonatburar, i ett klimatstyrt rum (21-22 ° C), med fri tillgång till vatten och torrfoder under hela studien. Transesofageal stimuleringsprotokollet som beskrivs ovan applicerades på alla djur i 10 dagar, 5 dagar per vecka. Alla djur genomgick samma protokoll, förutom att råttorna i SHAM-gruppen inte fick aktiv elektrisk stimulering.
Som förväntat inducerades inga episoder av AF hos SHAM-djuren under hela protokollet. Därför kunde inga andra parametrar (dvs. af-episodernas varaktighet och förekomsten av "ihållande" AF-episoder) utvärderas i denna grupp.
På den första stimuleringsdagen presenterade 12 (80%) av de 15 Stim-djuren AF-episoder (Relativ risk = 3,33, p < 0,001 mot SHAM-gruppen med Fishers exakta test). Hos Stim-råttorna, av 164 stimuleringscykler som applicerades den första stimuleringsdagen, följdes 42 av AF-episoder (medianinducerbarhet på 20% [interkvartilintervall på 6,67-72,22] jämfört med 0% i SHAM-gruppen) (Figur 5).
Under de 10 dagarna av protokollet inducerades AF effektivt hos alla djur (figur 6). I genomsnitt 15,6 ± 8,7 episoder av AF inducerades hos Stim-djuren under hela protokollets varaktighet. Av det totala antalet tillämpade stimuleringscykler följdes 20,05% av AF och 41 (17,30%) episoder av AF varade mer än 600 s. Den genomsnittliga varaktigheten av AF-episoder som varar mindre än 600 s är 40,12 s (tabell 1).
Figur 1: Yt-EKG-registrering. (A) EKG-elektrodernas positionering - två på nivån på frambenen och en på djurets vänstra bakben. (B) Spårning av yt-EKG som registrerats innan elektrisk stimulering appliceras. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: EKG-spårning som bekräftar fångst av förmaken. EKG-spårningen bekräftar kateterns korrekta position, dvs ett smalt QRS-komplex observeras efter varje elektrisk stimulans med en frekvens av 400 stimuli / minut. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Mikrokontrollerbaserade inställningar för pacemaker. Stimuleringsparametrar ställs in på en frekvens av 4000 stimuli / minut (ppm: pulser per minut), stimulansvaraktighet på 6 ms (WDTh: bredd) och spänning på 11 V (dvs 3 V över den diastoliska tröskeln). Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: EKG-spårningar som bekräftar effektiviteten av stimuleringsprotokollet. (A) Sinusnodens återhämtningstid (SNRT). Observera att tidsintervallet vid stimuleringens upphörande (SNRT) är längre än den cykellängd som registrerats under sinusrytmen (RR-intervall, dvs. intervallet mellan R-vågorna i två på varandra följande QRS-komplex, vilket representerar varaktigheten av en hjärtcykel). (B) Uppkomsten av en episod av förmaksflimmer efter avslutad förmaksstimuleringscykel. Notera de oregelbundna, smala QRS-komplexen, frånvaron av P-vågor och de små, förvrängda "f" -vågorna. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 5: Inducerbarhet av förmaksflimmer (AF) den första stimuleringsdagen i Stim (n = 15) och SHAM (n = 7) grupperna. Data uttrycks som median- och interkvartilintervall. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 6: Genomsnittlig daglig inducerbarhet av förmaksflimmer under de 10 dagarna av stimuleringsprotokollet hos Stim-råttorna.
| Elektriskt inducerade förmaksflimmerepisoder (n = 237) | Antal (%) | Genomsnittlig varaktighet (sekunder) |
| varaktighet ≥600 sekunder | 41 (17.30%) | - |
| varaktighet < 600 sekunder | 196 (82.70%) | 40.12 |
Tabell 1: Temporala parametrar för elektriskt inducerade "ihållande" och "icke-ihållande" förmaksflimmerepisoder i Stim-gruppen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Föreliggande papper beskriver ett experimentellt protokoll för långsiktig transesofageal förmakssprängning för snabb och effektiv induktion av AF hos råttor, lämplig för både akuta och långsiktiga AF-studier. Det 10-dagars stimuleringsprotokoll som beskrivs här har framgångsrikt använts för att utveckla en "sekundär spontan AF-modell" (dvs. en modell där AF-induktion genom elektrisk stimulering utvecklas spontant efter en period av AF-induktion genom elektrisk stimulering)10. Protokollets varaktighet kan dock variera beroende på det exakta syftet med studien.
Andra parametrar, såsom storleken på stimuleringskatetern, kan också justeras, beroende på djurens storlek. Försiktighet bör dock iakttas för att undvika användning av alltför stora katetrar, eftersom de kan orsaka tryck på luftstrupen och hindra normal andning. För 200-400 g råttor orsakar 5-6 F katetrar försumbart tryck på luftstrupen och tillåter att protokollet implementeras utan behov av endotrakeal intubation.
Ett viktigt steg i protokollet är korrekt positionering av stimuleringskatetern inuti matstrupen, vid förmakens nivå (steg 1.7). Detta steg bör endast utföras efter noggrann kontroll av anestesins djup, eftersom brist på effektiv anestesi ökar risken för hjärt-andningsstopp under följande steg i protokollet. Övervakning av hjärtats elektriska aktivitet med hjälp av yt-EKG ger i allmänhet tillräckliga data för att bekräfta att katetern är korrekt placerad inuti matstrupen (dvs stimulering med en frekvens som är högre än den inneboende hjärtfrekvensen illustrerar överväxelundertryckningsfenomenet på sinusnoden och varje stimulans följs av ett smalt QRS-komplex). Utförande av esofageal elektrokardiograminspelningar kan dock användas för att ytterligare bekräfta den korrekta positionen för stimuleringskatetern.
Med tanke på den normala baslinjepulsen för Wistar-råttor12 är det viktigt att utföra den initiala stimuleringen med en frekvens som är högre än råttornas egen hjärtfrekvens (dvs. >400 stimuli / minut) för att säkerställa konstant fångst av förmaken (steg 1.8). Under detta steg bör stimuleringsfrekvensen anpassas till varje djurs baslinjepuls. I närvaro av en korrekt stimuleringshastighet kan brist på konstant förmaksinfångning bero på antingen felaktig positionering av katetern eller stimulering vid en spänning under det diastoliska tröskelvärdet (steg 1.9). Båda scenarierna kan resultera i ineffektiv stimulering och protokollfel. Med tanke på att variationer i kroppstemperaturen kan främja hjärtarytmier13 bör man vara uppmärksam på att upprätthålla konstant kroppstemperatur (37 °C) under hela ingreppet.
Den teknik som beskrivs här har också ett antal begränsningar. Med tanke på vagusnervens anatomiska närhet till matstrupen kan samtidig elektrisk stimulering av vagusnerven inträffa under protokollet, vilket ökar risken för hjärt-andningsstopp. Dessutom bör man komma ihåg att parasympatisk stimulering sannolikt också kommer att bidra till AF-förekomst i denna modell och att andra modeller kan vara mer adekvata för studier som syftar till att utvärdera och / eller manipulera det autonoma nervsystemet.
Djurmodeller fortsätter att spela en viktig roll för att riva upp de patofysiologiska mekanismerna som ligger till grund för AF och för att förbättra terapeutiska strategier. En idealisk AF-modell för djur bör vara snabb och enkel att återskapa, reproducerbar och bör efterlikna så mycket som möjligt den patologi som observerats hos människor14. Hos gnagare består de flesta AF-modeller av akut AF-induktion, oftast i närvaro av andra gynnande faktorer, förutom elektrisk stimulering av förmaken 6,15. Sådana modeller kan emellertid inte bedöma rollen av progressiv förmaksombyggnad i AF-patofysiologi, kan inte testa de långsiktiga effekterna av olika antiarytmiska läkemedel och kan inte bedöma den ventrikulära proarytmiska risken i samband med kronisk antiarytmisk behandling 8,9. I andra studier16 tillämpades ett enda stimuleringsprotokoll på kroniskt ombyggda, AF-benägna förmak. Även om denna strategi övervinner några av dessa nackdelar tar den inte hänsyn till AF: s inverkan i sig på förmaksproarytmisk ombyggnad och på framtida AF-förekomst 8,9. Under tiden inducerar långvarig (t.ex. 10 dagar) applicering av det transesofageala förmakspacingprotokollet som beskrivs ovan progressiv förmaksproarytmisk ombyggnad och skapar den förmaksmiljö som krävs för spontan förekomst av AF, efter att stimuleringsprotokollen har slutförts10.
Den experimentella modellen som beskrivs här kan därför användas effektivt inte bara för att bedöma akut AF-induktion, utan också för att skapa en modell av (sekundär) spontan AF. Denna modell ger därför ett antal stora fördelar, vilket skapar förutsättningar för en bättre förståelse av de mekanismer som är involverade i förekomsten och underhållet av AF, samt för att identifiera och testa nya terapeutiska strategier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga intressekonflikter.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av ett bidrag från det rumänska ministeriet för utbildning och forskning, CNCS - UEFISCDI, projektnummer PN-III-P1-1.1-TE-2019-0370, inom PNCDI III.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Antisedan (Atipamezole Hydrochloride) 5mg / mL, solution for injection | Orion Corporation | 06043/4004 | for Rats use 1 mg / kg |
| Dormitor (Medetomidine Hydrochloride) 1 mg / mL, solution for injection | Orion Corporation | 06043/4003 | for Rats use 0.5 mg / kg |
| E-Z Anesthesia Single Animal System | E-Z Systems Inc | EZ-SA800 | Allows the manipulation of one animal at a time |
| Isoflurane 99.9%, 100 mL | Rompharm Company | N01AB06 | |
| Ketamine 10%, 25 mL | for Rats use 75 mg / kg | ||
| Microcontroller-based cardiac pacemaker for small animals | Developed in our laboratory (See Reference number 10 in the manuscript) | ||
| Surface ECG recording system | Developed in our laboratory (See Reference number 10 in the manuscript) |
References
- Kornej, J., Börschel, C. S., Benjamin, E. J., Schnabel, R. B. Epidemiology of atrial fibrillation in the 21st century: Novel methods and new insights. Circulation Research. 127 (1), 4-20 (2020).
- Hindricks, G., et al. 2020 ESC Guidelines for the diagnosis and management of atrial fibrillation developed in collaboration with the European Association for Cardio-Thoracic Surgery (EACTS): The Task Force for the diagnosis and management of atrial fibrillation of the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal. 42 (5), 373 (2021).
- Veenhuyzen, G. D., Simpson, C. S., Abdollah, H. Atrial fibrillation. Canadian Medical Association Journal. 171 (7), 755-760 (2004).
- Lau, D. H., et al. Atrial arrhythmia in ageing spontaneously hypertensive rats: unraveling the substrate in hypertension and ageing. PloS One. 8 (8), 72416 (2013).
- Scridon, A., et al. Unprovoked atrial tachyarrhythmias in aging spontaneously hypertensive rats: The role of the autonomic nervous system. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (3), 386-392 (2012).
- Haugan, K., Lam, H. R., Knudsen, C. B., Petersen, J. S. Atrial fibrillation in rats induced by rapid transesophageal atrial pacing during brief episodes of asphyxia: a new in vivo model. Journal of Cardiovascular Pharmacology. 44 (1), 125-135 (2004).
- Sugiyama, A., Takahara, A., Honsho, S., Nakamura, Y., Hashimoto, K. A simple in vivo atrial fibrillation model of rat induced by transesophageal atrial burst pacing. Journal of Pharmacological Sciences. 98 (3), 315-318 (2005).
- Scridon, A. Dissociation between animal and clinical studies. where do we go wrong. Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 497-500 (2021).
- Mulla, W., et al. Rapid atrial pacing promotes atrial fibrillation substrate in unanesthetized instrumented rats. Frontiers in Physiology. 10, 1218 (2019).
- Scridon, A., et al. Spontaneous atrial fibrillation after long-term transesophageal atrial burst pacing in rats. Technical and procedural approach to a new in vivo atrial fibrillation model. Romanian Journal of Laboratory Medicine. 26 (1), 105-112 (2018).
- Halatiu, V. B., et al. Chronic exposure to high doses of bisphenol A exhibits significant atrial proarrhythmic effects in healthy adult rats. Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 587-595 (2021).
- Zaciragić, A., Nakas-ićindić, E., Hadzović, A., Avdagić, N. Average values of electrocardiograph parameters in healthy, adult Wistar rats. Medical Archives. 58 (5), 268-270 (2004).
- Cheshire, W. P. Thermoregulatory disorders and illness related to heat and cold stress. Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical. 196, 91-104 (2016).
- Șerban, R. C., Scridon, A. Data linking diabetes mellitus and atrial fibrillation-how strong is the evidence? From epidemiology and pathophysiology to therapeutic implications. Canadian Journal of Cardiology. 34 (11), 1492-1502 (2018).
- Nishida, K., Michael, G., Dobrev, D., Nattel, S. Animal models for atrial fibrillation: clinical insights and scientific opportunities. Europace. 12 (2), 160-172 (2010).
- Qiu, H., et al. DL-3-n-Butylphthalide reduces atrial fibrillation susceptibility by inhibiting atrial structural remodeling in rats with heart failure. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 391 (3), 323-334 (2018).
